基于转录组测序方法研究加替沙星对小鼠的肝损伤作用

目的： 探讨加替沙星（GAT）对小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法： 选取32只SPF级雄性昆明小鼠作为研究对象，随机分为4组：低、中、高剂量（分别为25、50、100 mg/kg） GAT组和对照组。给药体积按10 mL/kg，连续灌胃给药7 d，对照组给予对应体积的生理盐水。通过检测各组小鼠血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、肌酐（CRE）和甘油三酯（TG）浓度，初步评价加替沙星导致的小鼠肝组织损伤。进一步利用转录组测序技术检测各组小鼠肝脏的基因表达谱，筛选差异表达基因，对差异基因进行基因本体论（GO）功能分类，并采用京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库进行信号通路富集分析。结果： 与对照组比较，高剂量GAT组小鼠肝脏质量显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组肝脏系数显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组小鼠血清ALT浓度显著降低（P<0.05或0.01）；低剂量GAT组小鼠血清AST浓度显著降低（P<0.01）。与对照组比较，中剂量GAT组共筛选出27个差异表达基因（包括20个上调基因，7个下调基因）。GO功能分类提示这些基因主要富集在免疫系统、多细胞生物、多生物及生殖过程等17个生物过程中。KEGG通路分析提示差异基因主要富集于脂质代谢、萜类化合物和聚酮化合物的代谢等22条通路中。结论： GAT可导致小鼠肝功能发生变化，并通过影响小鼠肝脏内胆汁酸和胆固醇等内分泌系统和脂质代谢等的平衡，造成肝组织损伤。     

碲化镉量子点对小鼠肾脏的氧化损伤作用

目的探讨碲化镉量子点(CdTe QDs)对小鼠肾脏的氧化损伤作用。方法将40只雄性ICR小鼠随机分为5组,每组8只动物,尾静脉注射CdTe QDs溶液染毒。染毒组染毒浓度分别为0.5、5、50和500 nmol/ml,每只动物注射0.2 ml;对照组注射等体积的生理盐水,染毒24 h后小鼠脱臼处死。采用生化方法检测肾脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,免疫组化法观察肾脏细胞8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)表达水平、TUNEL法检测肾细胞凋亡。结果 500 nmol/ml CdTe QDs染毒组MDA含量显著增加,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01);5、50和500 nmol/ml CdTe QDs染毒组SOD和CAT活性与对照组比较显著降低(P0.01);免疫组化法观察0.5、5、50、500nmol/ml CdTe QDs染毒组肾细胞核内均可见棕褐色的8-OHd G阳性颗粒表达,TUNEL法检测可见50、500 nmol/ml CdTe QDs染毒组有凋亡细胞阳性颗粒表达。结论本实验条件下CdTe QDs可对小鼠肾脏组织产生一定程度的氧化损伤作用,并有一定的剂量-效应关系。     

云锡等生产性粉尘对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

用巨噬细胞吞噬酵母菌的方法检测吞噬粉尘后大鼠肺泡巨噬细胞功能。发现:云锡氧化矿尘、云锡硫化矿尘、香花岭矿尘、二氧化硅尘、宣威煤烟尘等五种粉尘不同程度地抑制巨噬细胞的吞噬功能。SiO_2在染尘后第二周即有改变。其它生产性粉尘均在染尘后3～6周致肺泡巨噬细胞吞噬功能下降,并在第6周仍维持较低水平。结果表明:云锡等生产性粉尘对大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能有抑制作用,从而使体内非特异免疫受到影响,破坏免疫监视系统,这可能是促使肺癌发生和发展的一个有利因素之一。     

氰戊菊酯对细胞色素P450 2B1/2B2的诱导

１５只ＳＤ大鼠随机分为氰戊菊酯（Ｆｅｎ）组（１２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×７,ｉｇ）,苯巴比妥（ＰＢ）诱导组（８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×３,ｉｐ）及溶剂对照组（给予Ｆｅｎ组等体积的二甲亚砜,处理同Ｆｅｎ组）．应用不连续ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分离细胞色素Ｐ４５０,用ＣＯ差示光谱法和细胞色素Ｃ还原法测定Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０还原酶活性,用ＣＹＰ２Ｂ１／２Ｂ２抗体及ＣＹＰ３Ａ１／３Ａ２抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析,用免疫组化和半定量ＲＴ－ＰＣＲ等技术观察Ｆｅｎ影响大鼠脑,肝组织细胞色素Ｐ４５０亚型的特异性．结果显示,与溶剂对照组相比Ｆｅｎ可使脑和肝中Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－Ｐ４５０还原酶活性增高;Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２增加,Ｐ４５０３Ａ１／３Ａ２未见改变;Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２ｍＲＮＡ含量相应增加．由于正常大鼠脑,肝组织中Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２表达很低,Ｆｅｎ对该亚型Ｐ４５０的诱导可能会干扰机体对内,外源化合物的正常代谢,从而产生毒作用．     

石杉碱甲对急性水胺硫磷和辛硫磷中毒时AChE活力的影响

目的观察石杉碱甲(哈伯因,HupA)对水胺硫磷和辛硫磷急性染毒小鼠的AChE活力的影响。方法实验小鼠随机分为HupA干预组和未干预组,所有小鼠均经口给予一定剂量水胺硫磷或辛硫磷,干预组小鼠于染毒前2 h经口给予HupA,而后定时测定染毒后全血、红细胞和脑组织的AChE活力值。结果无论是水胺硫磷还是辛硫磷染毒,HupA干预组的全血、红细胞及脑组织AChE活力均高于同时点的未干预组。结论 HupA可以对抗水胺硫磷和辛硫磷对AChE活性的抑制作用,提示HupA可能具有预防和治疗水胺硫磷和辛硫磷中毒的作用。     

戊二醛交联法固定鼠肝微粒体

报告了用戊二醛交联法固定鼠肝微粒体并以ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｃ－还原酶为标志酶的初步研究结果。固定后酶的耐热及耐碱性均有提高，但催化活性尚不能令人满意。     

异丙隆原药致癌作用研究

异丙隆原药为固体粉末,浅灰白色,20℃时在水中溶解度72 mg/L,常温保存.该农药属取代脲类选择性芽前、芽后除草剂.适用于小麦、大麦、玉米、豆类等作物.对大鼠的LD50雄性为3160 mg/kg、雌性为3690 mg/kg[1].为观察异丙隆原药的致癌作用,我们进行了异丙隆原药致癌性试验,现报告如下.     

宫内铅暴露降低海马NMDAR—2A mRNA表达及影响成年后大鼠海马长时程增强

本研究观察了宫内低水平铅暴露对成年后大鼠海马穿通纤维-齿状回颗粒细胞层LTP(长时程增强)及21日龄大鼠海马NMDAR-2A(N-甲基-D-天门冬氨酸受体2A亚型)mRNA表达的影响,从分子水平探讨铅神经毒性的远期危害作用。雌性大鼠从交配前10天开始直到断乳(产后21天)饮用含0.5g/L或2g/L的醋酸铅水,在仔鼠70～90日龄时,利用在位电生理技术测定大鼠海马齿状回由强直刺激诱导的群峰电位。结果表明,虽然铅暴露大鼠的血铅水平已降至100μg/L以下,但海马齿状回LTP的幅度在60min时低铅组分别为(139±41)%和(136±31)%,在高铅组为(151±32)%和(145±30)%而对照组均显著较高,分别为(311±112)%和(319±114)%。提示发育早期铅暴露对学习记忆的损害可能持续到成年期。以原位杂交法检测21日龄仔鼠海马DG(齿状回)、CA1及CA2区NMDAR-2AmRNA表达情况。对DG区颗粒细胞层,CA1及CA2区锥体细胞层分析表明,中毒组动物NMDAR-2AmRNA的表达明显低于对照组,下降幅度分别为34%、37%和44%。因为NMDA受体通道开放是LTP触发之基础,所以宫内低铅暴露对NMDA受体mRNA表达的影响很可能是铅对LTP远期危害的关键分子机制。     

莠去津的毒理学特性

莠去津(atrazine)是一种世界范围内广泛使用的三嗪类除草剂,大量用于玉米、高粱、咖啡、小麦、甘蔗等田地及针叶林地和草坪,而且每年的使用量不断递增。本文以现有的毒理学资料为依据,对莠去津的急性和慢性毒性、生殖发育毒性、遗传毒性、毒代动力学、神经毒性、免疫毒性和人群研究等作简要综述,拟为制订我国的莠去津职业卫生标准和保护接触者健康提供参考。     

辛硫磷与灭多威混配对家兔的急性毒效应

目的观察有机磷农药与氨基甲酸酯混配制剂的急性毒效应,为其中毒的防治提供依据.方法常用低毒有机磷类农药--辛硫磷和高毒氨基甲酸酯类农药--灭多威混配.家兔随机分为辛硫磷组、灭多威组和辛硫磷+灭多威组,分别经腹腔一次注入含量为40%的辛硫磷(511.0 mg/kg体重)、含量为98%的灭多威(18.5 mg/kg体重)、含量为40%的辛硫磷(258.4 mg/kg体重)与含量为98%的灭多威(9.6 mg/kg体重)混剂.注射后于不同时间点记录动物血压、坐骨神经传导速度、心电图,测定全血胆碱酯酶(ChE)和血浆对氧磷酶(PON)活力.结果3个农药染毒组家兔坐骨神经传导速度在中毒早期无明显变化,而临死前显著降低,辛硫磷+灭多威混配组为(46.4±4.2)mm/s,与染毒前自身[(53.3±4.0)mm/s]相比,差异有显著性(P=0.021).心电图检查提示,各农药染毒组动物均有心肌毒性反应.灭多威染毒组存活的2只动物血压无明显降低,而辛硫磷或辛硫磷+灭多威染毒动物的血压明显下降.灭多威染毒动物的全血ChE活力降低约20%,辛硫磷或辛硫磷+灭多威染毒动物的ChE活力显著下降,在中毒120 min时降低约80%.3个农药染毒组动物血浆PON的动态变化与染毒前比较,差异不明显.结论未见辛硫磷+灭多威混剂对家兔的急性毒性有协同或拮抗作用.