大黄素通过非Caspase依赖通路诱导膀胱癌细胞BIU87凋亡的机制

目的 研究大黄素对人膀胱癌细胞BIU87凋亡及凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)和核酸内切酶G( Endonuclease G,Endo G)的mRNA和蛋白表达的影响,探讨大黄素的抗癌机制. 方法 取对数生长期的人膀胱癌细胞株BIU87,分别加入大黄素和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养.实验分为4组:空白对照组、Z-VAD-FMK组、大黄素组、大黄素+Z-VAD-FMK组.采用甲基噻唑(MTT)比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对体外培养的BIU87细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测各组细胞AIF和Endo G mRNA的表达,蛋白质印迹法检测各组细胞AIF和Endo G蛋白的表达. 结果 MTT检测显示,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强.根据IC50值,选择80 μmol/L的大黄素干预72 h作为干预条件.大黄素组细胞凋亡率为(44.57±1.52)％,大黄素+Z-VAD-FMK组为(35.58±1.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR和蛋白质印迹结果显示,大黄素+Z-VAD-FMK组中AIF mRNA和蛋白为1.74±0.11、2.59±0.13,大黄素组为1.36±0.08、1.89±0.14,空白对照组为0.37±0.02、0.53±0.11,Z-VAD-FMK组为0.42±0.06、0.44 ±0.07,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);大黄素+ Z-VAD-FMK组中Endo G mRNA和蛋白为2.28±0.15、3.31±0.36,大黄素组为1.85±0.13、2.15 ±0.27,空白对照组为0.53±0.07、0.71 0.16,Z-VAD-FMK组为0.61±0.04、0.67±0.22,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡.     

大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂（Z-VAD-FMK）组及大黄素＋Z-VAD-FMK组]。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子（AIF）和核酸内切酶G（Endo G）的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素＋Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义（均〈0.01）,大黄素组与大黄素＋Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义（〈0.01）。大黄素＋Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义（均〈0.01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

显微手术与血管内栓塞治疗颅内动脉瘤临床体会

颅内动脉瘤破裂所致的蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage．SAH）是较为常见的急性脑血管意外,本院2004年9月至2008年12月手术夹闭治疗动脉瘤26例。同时血管内栓塞治疗颅内动脉瘤27例,现报道如下。     

尿流改道后输尿管结石的处理（附8例报告）

目的：评价尿流改道后输尿管结石的治疗方案。方法：回顾性分析8例尿流改道后输尿管结石的处理方法,术前泌尿系腹部平片、泌尿系彩超、肾输尿管膀胱CT平扫明确为输尿管结石,所有患者对症治疗,随访观察1周,患者如结石未自行排出,行体外冲击波碎石术（ESWL）或逆行输尿管镜钬激光碎石。结果：2例患者输尿管结石自行排出;3例患者行ESWL,1例碎石后结石成功排出;5例行逆行输尿管软镜碎石成功。8例患者结石治疗后均未出现并发症。结论：尿流改道后输尿管结石的处理包括短期随访观察、ESWL及逆行输尿管软镜碎石治疗。逆行输尿管软镜碎石是安全有效的,可作为尿流改道患者输尿管结石的理想治疗方法之一。     

尿激酶在重度脑室出血治疗中的应用

重度脑室出血(Severe Intraventricular Hemorrhage,SIVH),发病急骤,死亡率高达60％～90％,致死原因主要为脑脊液循环通路受阻,血块对脑干及下丘脑的压迫,及血块所释放的促炎因子的毒性作用。我们对1998年初-2000年初收治的自发性SIVH病人采用了大剂量尿激酶逐渐递减、短期闭管的方法进行纤溶治疗,取得了较好的疗效,报道如下。     

Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞T24侵袭能力的影响

目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞,观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞,用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平,并采用Transwel!小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后,与对照组和空白对照组相比,体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低（P〈0．01）。结论Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达,并显著抑制T24细胞的侵袭能力。     

Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞T24侵袭能力的影响

目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞,观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法 Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞,用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平,并采用Transwell小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果 Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后,与对照组和空白对照组相比,体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。结论 Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达,并显著抑制T24细胞的侵袭能力。     

不同途径腹腔镜肾盂成形术治疗肾盂输尿管连接部梗阻的选择

目的探讨不同途径腹腔镜肾盂成形术治疗肾盂输尿管连接部梗阻的方法及特点。方法回顾性分析经腹腔途径行腹腔镜肾盂成形术治疗的12例和经后腹腔途径行腹腔镜肾盂成形术治疗的15例肾盂输尿管连接部梗阻患者的临床资料。结果 27例均成功手术。经腹腔途径12例手术时间为115～240min,出血50～200ml,术后住院7～10d,术后出现尿漏1例;经后腹腔途径15例手术时间为110～190min,出血50～120ml,术后住院6～11d,术后出现尿漏2例。结论经后腹腔途径入路简单直接,对腹腔脏器干扰少,手术空间小,能满足手术暴露和操作要求,可作为首选术式;对于伴有肾重度积水肾盂位置明显低位或Ⅲ度肾下垂患者,应选择经腹腔途径行腹腔镜肾盂成形术。