IS6110-限制性片段长度多态性DNA分型在结核分子流行病学研究中的应用

目的 建立宁夏、北京和上海等地结核分支杆菌发离株IS6110－RFLP DNA指纹图谱，观察其流行病学特征。方法 提取结核分支杆菌基因组DNA，经限制性内切酶PvuⅡ切割、琼脂糖凝胶电泳和Southern转印后，用荧光标记的IS6110DNA序列中245bp探针杂交，以核酸化学发光试剂盒探测荧光信号，比较各菌株指 IS6110拷贝数和带型，分析不同地理区域流行菌株的特点。结果 103例结核患的临床分离株，经245bp探针杂交后的指纹图谱显示大部分菌株含8－21个IS6110拷贝，在宁夏和北京地区流行的结核分支杆菌带型具有共同特点，并有成簇分布的现象，在上海分离株中发现1株零拷贝株和1株单拷贝株。结论 IS6110－RFLP DNA分型方法可用于我国流行的结核分支杆菌分子流行病学研究；宁夏分离株与北京分离株在基因上亲缘关系较相近。     

基于多因子降维法的肺结核易感基因-基因交互作用研究

目的 分析宁夏银川地区肺结核易感基因间的交互作用.方法 结合前期病例对照研究结果(PCRRFLP法检测肺结核易感基因MCP-1、CCR2、VDR、NRAMP1-3'UTR、NRAMP1D543N、NRAMP1INT4及MBLG54A分型,银川地区肺结核病例271例,健康对照299例),运用MDR法分析肺结核易感基因-基因交互作用模型.结果 有统计学意义的最佳交互模型包含VDR基因和CCR2基因,该模型的检验样本准确度为0.6248,交叉验证一致性的结果为10/10.结论 VDR基因和CCR2基因可能协同增强了宿主对结核杆菌的易感性,从而增加了宿主肺结核病的患病风险.     

宁夏回汉族人群MBL基因G54A位点多态性的分布特征

目的探讨甘露聚糖结合凝集素（MBL）结构基因外显子1第54位密码子点突变G54A多态性在宁夏回汉族人群的分布特征。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测MBL基因外显子1第54位密码子点突变G54A的基因型。结果 （1）宁夏回与汉族群体的MBL基因54（G/A）多态性位点基因型频率和等位基因频率的分布差异无统计学意义（P〉0.05）;（2）宁夏群体的基因型频率分布与高加索人等群体差异无统计学意义（P〉0.05）,而与广东汉族群体以及日本群体比较差异有统计学意义（P〈0.01）;（3）宁夏人群第54位密码子等位基因频率与高加索人等群体差异无统计学意义（P〉0.05）,而等位基因频率与广东汉族、张家口汉族以及日本群体差异有统计学意义（P〈0.01）。结论不同的区域种族群体MBL结构基因外显子1第54位密码子的基因型频率和等位基因频率分布不尽一致。     

慢性精神分裂症患者自理和社会能力恢复措施及影响因素

目的探讨恢复慢性精神分裂症患者自理及社会能力措施及其影响因素。方法病例为2001-07/2002-07武汉大学人民医院精神卫生中心住院治疗的慢性精神分裂症患者38例,随机分为观察组和对照组,每组各19例。两组维持药物治疗,观察组进行工娱疗法、音乐疗法、心理疗法,6次/周,治疗7～92次,平均(32±21)次。于治疗前及治疗后3个月应用简明精神病评定量表、精神病患者护理观察量表、住院精神病患者康复疗效评定量表综合评价患者的康复情况。结果每组各有19例患者的评定结果纳入结果分析。①两组治疗后简明精神病评定量表、精神病患者护理观察量表、住院精神病患者康复疗效评定量表评分均较治疗前降低,观察组治疗后上述各量表评分的改善优于对照组,差异有显著性(P均<0.001)。②多元逐步回归分析,治疗后各量表评分与治疗疗次数呈负相关,与活动能力、配合治疗呈正相关。结论综合性康复治疗能有效改善慢性精神分裂症患者生活自理能力和社会适应能力,治疗次数多、活动能力好、配合治疗者治疗效果好。     

不同文化程度老年患者心理健康浅析

在临床护理工作中．我们发现不同教育程度的老年患者有不同的心理特征．为了进一步了解其心理特点．指导临床护理一完善以病人为中心的护理工作确们做了如下研究。1资料与方法资料：来源于1998年1～11月在我院住院的老年患者，既往无精神病史．年龄在60岁以上．按受教育程度分为A组高中及相关教育以上，B组为高中以下（初中、小学）oA组54例，B组49例。方法：采用症状自评量表（SCL－90）．由受过专门训练的人员统一评分．将两组各项因于得分分别进行t检验。2结果SCL－90九项因于得分．B组均较A组高，且在统计学上有显著性差异或非常显…     

致病性耶尔森氏菌的临床快速诊断

在三种致病性的yersinia(耶尔森氏菌)中,y.pseudotuberculosis(假结核菌)和y.enterocolitia(小肠结肠炎菌)为肠道致病菌,在进入哺乳动物肠内之前,自由的生活在潮湿的自然环境和食物中。代谢特点受周围自然环境调节,运动性在25℃最强,在37℃甚至停止。大多数野生动物是无症状的病原携带者,引起的感染是特有的肠系膜淋巴结炎,在临床症状上类似于阑尾炎。由于在自然进化过程中形成了在低温下增殖的优势(甚至在4℃也能发生分裂繁殖),过去感染发病率多见于冬春季节。但近年来随着冰箱在家庭及餐饮业中的普及,在西方发达国家,由这两种肠道致病菌引起的胃肠炎和严重腹泻比痢疾还多,被视为新型的肠道致病菌,一年四季都可见流行。在我国近年来各省市都报道有分布。在实验诊断方面,直接分离法检出率较低,冷增菌(4℃)法时间较长,PCR检测虽简便、快捷、特异,但我国这方     

肠出血性大肠埃希菌O157:H7菌影生物学活性的初步研究

目的制备肠出血性大肠埃希菌O157∶H7细菌菌影,在细胞及动物水平对其生物学活性进行初步评价。方法将包含噬菌体phiX174裂解基因E的重组质粒pLSE转化肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 EDL933及大肠埃希菌DH5α,42℃诱导制备菌影。利用间接免疫荧光实验观察菌影主要抗原结构,并利用电镜观察菌影对Hep-2细胞的黏附。将菌影免疫小鼠后,采用间接ELISA法检测小鼠特异性抗体,并通过小鼠攻毒实验考察菌影的保护效果。结果成功构建了重组质粒pLSE,制备出O157∶H7及DH5α菌影。O157∶H7菌影保留了病原菌的主要外膜抗原,能紧密黏附细胞Hep-2但并不侵入细胞。O157∶H7菌影免疫雄性BALB/c小鼠诱导特异性IgG抗体的产生。攻击试验结果显示小鼠对致死剂量O157∶H7 EDL933强毒株的保护率达到80%。结论 O157∶H7菌影的成功制备及生物学活性的初步析为研制O157∶H7菌影疫苗奠定了基础。     

小鼠卵巢玻璃化冻存不同时段FSH干预对Cx43表达的影响

目的通过在玻璃化冻存不同阶段给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)干预,观察FSH对缝隙连接蛋白Connexin-43(Cx43)表达的影响,从而寻找最佳的FSH干预途径。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3 IU/mL FSH干预玻璃化冻存组,包括全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(FG-FSH)以及冻存后添加FSH组(LG-FSH)。通过形态学、免疫组织化学技术及Western-blot技术观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达情况。结果正常卵泡百分比为玻璃化冻存数量最低,全称FSH干预玻璃化冻存组最高(P<0.05),全程添加FSH组(OG-FSH)最高,而其他组间正常卵泡百分比间的比较差异无统计学意义。各组间Cx43蛋白表达量从高到低,依次为全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(FG-FSH)、冻存后添加FSH组(LG-FSH)、新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG),且差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH更有利于卵巢组织形态结构的保持以及Cx43蛋白的表达。     

小鼠卵巢玻璃化冻存中FSH干预对移植卵巢VEGF和VEGFR-2表达的影响

目的 通过在玻璃化冻存液中给予重组人促卵泡刺激素（rhFSH）,观察冻存卵巢异体异位移植后VEGF和VEGFR-2表达的变化,探索卵巢玻璃化冻存中的FSH干预对移植卵巢血流重建相关因子的影响.方法 对4周龄C57BL/6J小鼠卵巢进行异体肾被膜下移植,实验分为新鲜移植组（FCG）、单纯玻璃化冻存移植组（VCG）和0.3IU·mL^-1 FSH干预玻璃化冻存移植组（VG-FSH）.通过监测受体小鼠动情周期的变化、卵巢组织切片中正常卵泡百分比、移植后2、7、14、28d卵巢VEGF及其受体VEGFR-2的表达,判断FSH干预效果.结果 FSH干预冻存组的正常卵泡数、VEGF及VEGFR-2的表达均高于单纯玻璃化冻存组（P＜0.05）,且均低于新鲜移植组;FSH干预冻存组动情周期恢复所需时间明显低于冻存组（P＜0.05）,而明显长于新鲜移植组（P＜0.05）.结论 玻璃化冻存全程添加FSH干预,有利于冻存卵巢移植后的卵泡存活及功能恢复,可能与上调促血管生成的VEGF、VEGFR-2蛋白的表达有关.     

Rho相关激酶抑制剂Y27632对小鼠腔前卵泡体外发育的作用

目的 探讨Rho相关激酶（ROCK）抑制剂Y27632在小鼠腔前卵泡体外发育中的作用。 方法 取出生12.5 d的小鼠卵巢,机械法收集单枚腔前卵泡,采用超低吸附96孔板模拟3D环境对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的实验组,通过形态学观察、卵泡直径的变化、成熟卵泡的数量、成熟卵母细胞纺锤体的变化等来评估卵泡的整体发育情况。采用Real-time PCR技术检测颗粒细胞中卵泡刺激素受体（FSHR）、卵母细胞中骨形态发生蛋白15（BMP15）、生长分化因子9（GDF9）等以及凋亡相关基因（Bad、Bax和Caspase-3）的表达情况,同时,用细胞存活染料检测卵泡发育过程中颗粒细胞的凋亡情况。 结果 ROCK抑制剂Y27632对卵泡直径增长和基本发育指标（存活数、成腔率和成熟率）无明显影响（P>0.05）,但对照组卵母细胞成熟后纺锤体组装出现异常。培养8 d后,与对照组相比,实验组颗粒细胞特异性基因FSHR上调;卵母细胞特异性基因BMP15和GDF9上调,而叉头框O3（FoxO3)下调;凋亡基因Bax、Bad和Caspase3表达下调,实验组卵泡内的颗粒细胞凋亡明显少于对照组。 结论 小鼠卵泡体外发育过程中,ROCK抑制剂Y27632能够抑制颗粒细胞的凋亡,防止卵母细胞纺锤体组装异常,进而提高卵泡体外发育质量。