双酚A对小鼠睾丸间质细胞毒性及miR-203-3p和PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响

目的研究双酚A对小鼠睾丸间质细胞的毒性作用,及对miR-203-3p和PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响。方法不同浓度BPA(0、2、10、50、250μmol/L)处理小鼠睾丸间质细胞24 h,CCK8法检测细胞活力,Real time PCR检测miR-203-3p和FOXO1、AKT、PI3K的相对表达水平。结果不同浓度BPA处理细胞后,细胞活力随BPA剂量的增大而减少,50、250μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。各处理组miR-203-3p表达量均较对照组升高,10、250μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2、10μmol/L组FOXO1表达量较对照组升高,50、250μmol/L组表达量较对照组降低,2、50、250μmol/L组FOXO1相对表达量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001)。各处理组AKT水平均出现下降趋势,10、50、250μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。各处理组PI3K水平均出现下降趋势,50、250μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论双酚A致睾丸间质细胞损伤,影响miR-203-3p和FOXO信号通路相关基因的改变。     

孕期染毒双酚A对雄性子代生殖发育影响

目的 探讨母鼠孕期接触双酚A对子代雄鼠生殖发育的影响及作用机制.方法 将受孕SD雌鼠40只,随机分为双酚A0、10、50、250 mg/kg染毒组,以2 mL/kg容积自受孕第5d灌胃染毒至第20d;孕第21 d每组处理5只孕鼠,检测母鼠血中性激素水平,胎鼠数、死胎数、胎鼠重和胎盘重,高效液相色谱法检测母鼠血及胎盘中双酚A含量,另5只孕鼠自然分娩,待雄性子鼠性成熟后检测血中性激素水平,生殖器官脏器系数、病理、精子质量.结果 10、50 mg/kg剂量组母鼠血清中雌二醇(E2)含量分别为1 780.78、1 680.10 pmol/L,明显高于对照组的1361.74pmol/L(P＜0.01),低、中、高3个染毒组睾酮(T)含量分别为5.55、4.76、6.79 nmol/L,明显高于对照组的3.20 nmol/L(P＜0.01);50、250mg/kg剂量组雄性子鼠附睾及前列腺脏器系数分别为0.297、0.325和0.153、0.173,均高于对照组(P＜0.01),镜下可见附睾间质及前列腺上皮有增生改变;250 mg/kg剂量组精子活动率为52.9%,明显低于对照组的67.4% (P ＜0.05).结论 孕期染毒双酚A对胎鼠发育无明显影响,但影响子鼠生殖器官发育和精子生成质量.     

邻苯二甲酸单乙基己酯和镉对大鼠睾丸巨噬细胞分泌白介素-10的影响

目的研究邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)及氯化镉对大鼠睾丸巨噬细胞分泌细胞因子白介素-10(IL-10)的影响。方法利用贴壁法提取SPF级成年雄性Wistar大鼠的睾丸巨噬细胞(TM),分别暴露于终浓度0(对照,0.1%DMSO)、0.1、1、10、100、1 000μmol/L的MEHP或氯化镉溶液培养24 h,采用CCK8法测定细胞活性。并将细胞分别暴露于终浓度0(对照,0.1%DMSO)及1、10、100μmol/L的MEHP和(或)0.1、1、10μmol/L的氯化镉溶液,并加入激活剂(5μg/ml LPS),培养24 h后,采用ELISA法检测细胞分泌IL-10的情况。结果与对照组比较,100、1 000μmol/L MEHP或10、100、1 000μmol/L氯化镉暴露组大鼠TM细胞抑制率均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着MEHP或氯化镉暴露浓度的升高,大鼠TM细胞抑制率均呈上升趋势。经5μg/ml LPS激活后,各暴露组细胞因子IL-10的分泌量高于对照组,除100μmol/L MEHP+10μmol/L氯化镉暴露组外,差异均有统计学意义(P0.05)。与激活剂组比较,各浓度MEHP和氯化镉单独或联合暴露对大鼠TM分泌IL-10的抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着MEHP和(或)氯化镉暴露浓度的升高,对大鼠TM分泌IL-10的抑制率均呈上升趋势。与相同浓度MEHP+氯化镉联合暴露组比较,10、100μmol/L的MEHP暴露组及1、10μmol/L氯化镉暴露组大鼠TM细胞IL-10的分泌抑制率较低,差异均有统计学意义(P0.05)。析因分析结果显示,10μmol/L MEHP+1μmol/L氯化镉暴露和100μmol/L MEHP+10μmol/L氯化镉暴露对大鼠TM分泌IL-10的抑制作用表现出协同作用。结论在本实验条件下,MEHP和氯化镉联合暴露对大鼠TM细胞IL-10的分泌抑制作用表现为协同作用。     

茶多酚、维生素C对镉肾毒性影响的实验研究

目的 研究茶多酚(TP)、维生素C(Vc)对镉肾毒性的影响。方法 将Wistar大鼠40只，随机分成4组。第1组为对照组，第2组大鼠皮下注射1．44mg／kg氯化镉溶液；第3、4组大鼠以TP、Vc预处理后皮下注射1．44mg／kg氯化镉溶液，每周3次，连续6周。分别在实验开始后第4周和6周时将大鼠移入代谢笼，收集24h尿样，分别测定尿N-乙酰-P-氨基葡萄糖酶(NAG)活性和尿蛋白、尿镉含量。于最后一次注射24h后处死大鼠，采集血液和肾皮质样品。测定各组大鼠血清尿素氮、血及肾皮质的丙二醛(MDA)含量，血及肾皮质镉含量。结果 染镉4周后，与单纯染镉组比较，TP和Vc能明显降低尿NAG酶活性和尿蛋白含量。染镉6周后，TP和Vc能显降低血清尿素氮、血及肾皮质MDA含量。TP还能显降低血、肾皮质镉及升高尿镉含量。结论 TP、Vc预处理对镉中毒所致的肾损伤有一定的预防作用，此种预防作用可能与它们的抗氧化作用及促进镉排泄有关。     

双酚A对初断乳雄性大鼠生殖器官发育和精子生成的影响

目的观察初断乳大鼠双酚A（BPA）染毒6周后生殖器官发育及精子生成的变化。方法将4周龄的Wistar雄性大鼠40只,随机分成对照组、BPA50、100、200mg/kg染毒组,每组10只,以2ml/kg容积皮下染毒BPA6周,每周4d（周一、周二、周四、周五）,每天1次。染毒结束后摘取并称量大鼠睾丸、附睾、前列腺、精囊腺质量并计算脏器系数,光镜检测病理学改变;酶联免疫法检测血中睾酮（T）、雌二醇（E2）水平;计数精子总数、运动率、畸形率。结果随染毒剂量的增加,大鼠附睾、前列腺、精囊腺的质量和脏器系数均显著下降（P〈0.05或P〈0.01）;精子数量减少,运动率降低,畸形率增加;200mg/kg组的T水平显著低于对照组（P〈0.05）,镜下可见200mg/kg组大鼠前列腺平滑肌细胞缺失,基底膜细胞排列紊乱,精囊内精囊液量明显减少。结论BPA可影响雄性大鼠生殖器官发育成熟,并对精子生成有影响。     

丙烯酰胺对雄性大鼠的生殖损伤及机制研究

目的：研究丙烯酰胺对雄性大鼠生精功能及睾丸的损害作用,探讨产生雄性生殖毒性的原因及CYP2E1的作用。方法：选择健康成熟的雄性Wistar大鼠60只,随机分为阴性对照组（生理盐水）、ACR 20mg/kg组、诱导剂无水乙醇200mg/kg组、无水乙醇200mg/kg＋ACR 20mg/kg组、抑制剂二乙基二硫代氨荃甲酸钠（DDC）20mg/kg组、DDC20mg/kg＋ACR20mg/kg共6组,以5ml/kg容量连续灌胃染毒4周。检测睾丸、附睾、前列腺、精囊腺脏器系数和睾丸病理;血中睾酮（T）、雌二醇（E2）含量;睾丸组织GSH、GR、GSH-Px水平;精子数,精子畸形率;曲细精管第Ⅶ、Ⅷ期各细胞成分构成变化。结果：ACR、ACR＋诱导剂及ACR＋抑制剂组精子数下降、畸形率升高,与阴性对照组比较存在显著差异,GSH含量显著升高（P〈0.05）,其它指标均无显著变化（P〉0.05）。结论：ACR可引起大鼠生精功能的改变,但未观察到CYP2E1在这种改变中的明显作用。     

镉对小鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 研究镉对小鼠肾脏细胞凋亡的影响。方法 将小鼠分成5组,分别注射0．9％生理盐水,80、160、240或320mg／kg的CdCl2溶液,连续6周,于染毒4周和6周后每组处死一半小鼠,测定肾脏系数,用流式细胞术检测细胞凋亡,用免疫组化法测Bcl—2。结果 染镉组小鼠肾脏系数较对照组显著增高,而且细胞凋亡率较对照组明显增高,Bcl—2蛋白表达明显下降。结论 镉可诱导小鼠肾脏细胞凋亡。     

活化T细胞核因子在DEHP调控IL-4表达中作用

目的 通过研究活化T细胞核因子(NFAT)在邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)影响白细胞介素-4(IL-4)表达中的作用,探讨DEHP的免疫毒性机制.方法 以佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)为激活剂,用10、50 μmol/L DEHP染毒激活的脾淋巴细胞4h,同时用0.5μmol/L钙调神经磷酸酶抑制剂他克莫司(FK506)进行干预,最后分别检测IL-4、NFATp、NFATc mRNA表达与NFATp和NFATc蛋白表达.结果 以10 ng/mL PMA+0.5 mg/mL Ion为激活剂时,激活组的IL-4 mRNA表达相对值为(2.53±0.42),50μmol/L DEHP染毒组的相对值为(18.21±1.67),差异有统计学意义(P＜0.01);而FK506干预组的IL-4 mRNA表达相对值为(9.85±1.24),与50μmol/L DEHP染毒组比较,差异有统计学意义(P ＜0.01);50μmol/L DEHP染毒组的NFATc mRNA表达相对值为(2.00±0.32),激活组的相对值为(1.37±0.10),差异有统计学意义(P＜0.05);同时DEHP促进NFATc蛋白在细胞质和细胞核里表达;染毒4h后,与激活组NFATp mRNA表达相对值(2.51±0.45)比较,10、50 μmol/L DEHP染毒组的相对值分别为(5.14 ±0.28)和(5.38±0.60),差异均有统计学意义(P＜0.01);但DEHP降低了细胞质和细胞核里NFATp蛋白表达.结论 NFAT在DEHP调控IL-4表达中具有重要作用.