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目的观察小鼠巨噬细胞系RAW264．7细胞在低氧培养箱（1％O2）内不同时间段糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）mRNA和蛋白表达的变化．探讨低氧对RAW264．7细胞中GR表达的调节。方法采用体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264．7细胞,将细胞接种于60mm dish内．细胞长至50％时,将培养液置换为含5％无激素胎牛血清的无糖DMEM培养液,放入低氧培养箱内,同时输入含1％O2,5％CO2,94％N：的混合气体,分别于低氧处理4、8、12h后将细胞取出,抽提RNA或者蛋白．应用real—timePCR和Western印迹分析测定GRmRNA和蛋白的表达水平．以未低氧处理RAW264．7细胞为对照。结果低氧处理4h可使RAW264．7细胞中GRmRNA的表达明显上调为对照的1．8倍（P〈0．05）,处理至12hGRmRNA的表达仍高于对照,约为对照的2．7倍（P〈0．05）;低氧处理RAW264．7细胞8hGR蛋白的表达也明显升高,约为对照的1．7倍（P〈0．05）,至低氧处理12h,GR蛋白的表达仍高于对照。结论低氧可以上调体外RAW264．7细胞GRmRNA和蛋白的表达。 相似文献
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目的 观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞在低氧培养箱(1% O2)内不同时间段糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白表达的变化,探讨低氧对RAW264.7细胞中GR表达的调节.方法 采用体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于60 mm dish内,细胞长至50%时,将培养液置换为含5%无激素胎牛血清的无糖DMEM培养液,放入低氧培养箱内,同时输入含1% O2、5% CO2、94% N2 的混合气体,分别于低氧处理4、8、12 h后将细胞取出,抽提RNA或者蛋白,应用real-timePCR 和Western印迹分析测定GRmRNA和蛋白的表达水平,以未低氧处理RAW264.7细胞为对照.结果 低氧处理4 h可使RAW264.7细胞中GR mRNA的表达明显上调为对照的1.8倍(P<0.05),处理至12 h GRmRNA的表达仍高于对照,约为对照的2.7倍(P<0.05);低氧处理RAW264.7细胞8 h GR蛋白的表达也明显升高,约为对照的1.7倍(P<0.05),至低氧处理12 h,GR蛋白的表达仍高于对照.结论 低氧可以上调体外RAW 264.7细胞GR mRNA和蛋白的表达. 相似文献
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