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改进的亚硫酸氢钠测序法检测HepG2 RASSF1A基因CpG岛甲基化状态 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 改进亚硫酸氢钠测序法,并检验改进后方法在甲基化检测中的可行性。方法 提取人肝癌细胞株HepG2基因组DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后Ras相关家族1A基因(RASSF1A)启动子序列设计特异引物并结合沉降PCR扩增,T-A载体克隆、测序。结果 HepG2细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的16个CpG位点均被甲基化。结论 改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增,提高PCR效率,更适于基因甲基化状态的检测。 相似文献
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目的改进聚合酶链反应(PCR),并检验改进后的方法在甲基化检测中的可行性。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7,提取基因组DNA,利用亚硫酸氢盐测序法,用常规、降落及改进PCR分别扩增,比较扩增效果,PCR产物纯化回收后,TA克隆入载体pGEM-T,转化大肠杆菌(E.coli DH5α),筛选阳性克降,经PCR扩增鉴定后获得阳性重组质粒,测序比对。结果改进后PCR与常规、降落PCR相比,扩增效率增高,二聚体及非特异性扩增减少;测序结果显示,MCF-7细胞基因组DNA中,RASSFIA基因启动子CpG岛是高甲基化的,E-cadherin基因启动子CpG岛末呈现高甲基化状态。结论改进后方法提高了以PCR为基础的甲基化分析的可行性,更适用于基因甲基化状态的检测,并为扩增富含CG的基因启动子区域提供参考。 相似文献
3.
目的 评估某市两城区(商业区和工业区)住宅室内空气质量,为改善室内空气质量提供依据.方法 2020年于采暖季和非采暖季监测某市两城区共60户住宅的空气化学污染物,检测指标包括PM2.5,PM10,NO2,甲醛,苯,甲苯和二甲苯7项指标;采用空气质量指数法评价住宅室内空气质量.结果 2020年某市商业区和工业区住宅室内空气7项检测指标合格率分别在20.8%~100.0%和22.5%~100.0%,其中均以PM2.5合格率最低.与非采暖季比较,采暖季商业区 PM2.5(x2=22.282)、PM10(x2=32.042)和甲醛(x2=18.033)合格率较低(P<0.05),工业区 PM2.5(x2=34.839)和 PM10(x2=33.147)合格率较低,甲醛(x2=4.615)合格率较高,差异有统计学意义(P<0.05).商业区和工业区住宅室内空气质量综合指数(AQI)分别为1.12和1.19,均超过0.5,属于轻度污染;各项分指数中,IPM2 5,IPM10和I甲醛均超过0.5,其中以采暖季IPM2.5最高,商业区和工业区分别为2.91和3.16,属重度污染.结论 某市商业区和工业区的住宅室内空气质量均存在轻度污染,颗粒物是首要污染物、甲醛次之,采暖季尤为严重. 相似文献
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目的 探讨宫颈癌腔内放疗时不同体积的膀胱、直肠与危及器官受照剂量的关系。方法 选取宫颈癌患者共47例,给予剂量点处方剂量600 cGy的高剂量率腔内后装治疗,用剂量体积直方图(DVH)评价标准计划下不同体积的膀胱、直肠和小肠对相应受照剂量的影响。将膀胱按体积大小分成<80 cm3组、80~120 cm3组和>120 cm3组,直肠按体积大小分成>60 cm3 组和≤60 cm3组,分析其体积与剂量分布的关系。采用方差分析和t检验方法分析D1 cm3、D2 cm3、D30%和D50%。结果 与膀胱体积<80 cm3组相比,80~120 cm3组和>120 cm3组的膀胱D30%、D50%受照剂量增高(F=5.074、5.088,P<0.05),小肠D1 cm3和D2 cm3值差异无统计学意义(P>0.05);与直肠体积>60 cm3 组相比,≤60 cm3组的直肠D1 cm3受照剂量减小(t=-2.045,P<0.05)。结论 宫颈癌近距离放疗时,保持膀胱的适当充盈,直肠体积的减少,可使直肠、膀胱和小肠的受照射剂量均相对降低,从而减少放疗的不良反应。 相似文献
5.
目的 探讨局部应用抗氧化剂VitC、VitE对准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)术后角膜组织的影响。方法 将24只实验免分成2组,每组12只,行双眼一5.0DPRK。一组术后左眼每日结膜下注射VitC0.1g,右眼为对照;另一组术后左眼每日结膜下注射VitE25mg,有眼为对照。于术后1、3、7、14天测定角膜组织超氧化物歧酶(super—oxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及谷肮甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxNe,GSH—PX)的变化,观察其病理变化。结果 术后1、3天角膜SOD、GSH—Px活性小于对照组(P<0.01),MDA的水平高于对照组(P<0.01)。局部应用抗氧化剂组其角膜SOD、GSH—PX活性高于单纯激光组(P<0.01),MDA水平低于单纯激光组(P<0.01)。结论 准分子激光屈光性角膜切削术后,存在着氧自由基性的组织损伤破坏,局部应用VitC、VitE能降低角膜的自由基损伤。 相似文献
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血清锰的石墨炉原子吸收分光光度计测定方法 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立一种血清锰的石墨炉原子吸收分光光度检测方法。方法:将血清和0.44 M的HNO3按1∶9充分稀释后,15000 r/m高速离心10 min,取上清20μl直接测定。结果:以PE-AA800型原子吸收分光光度计为对象,发现最佳灰化温度为1300℃,最佳原子化温度为1900℃,最佳净化温度为2450℃和基底改进剂为5μg钯+3μg硝酸镁;平均回收率可达到97.75%;变异系数(CV)为5.0%;特征浓度为6.37610 pg/0.0044A,检出限为6.7 pg。结论:该法为一种可信度较高,操作性较强的血清锰的实用测定方法。 相似文献
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电焊作业对工人神经行为功能的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:了解电焊工神经行为功能损伤的特点。方法:对125名电焊工和50名对照组人员进行问卷和应用WHO推荐的神经行为核心测试组合(NCTB)进行神经行为功能检测。结果:电焊工的神经行为功能总体上差于对照组,疲劳-惰性等7项指标得分显著性低于对照组,而错误打点、总打点数高于对照组。但没发现剂量-效应关系。回归分析显示,愤怒-敌意、最慢反应时与累积接触水平间有显著性负相关。结论:电焊作业可引起电焊工的神经行为功能损害;电焊工可能对低剂量职业接触有一定的耐受能力。影响因素主要有年龄、性别、文化水平、婚姻状况、吸烟量等。 相似文献
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目的研究二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)亚急性染毒对清洁级小鼠心脏和肝脏的影响,并探讨其脂质过氧化损伤机制。方法40只小鼠随机分为4组,分别以1.26、0.63、0.32g/kg经口灌胃染毒,对照组给予生理盐水,每日1次,染毒50d。染毒后宰杀,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的活力和肝脏、心脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果染毒后,各组间血清中ALT、AST水平无明显变化;各组间肝脏组织中SOD、MDA水平亦无明显变化;NO水平仅低剂量组下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);血清中LDH、α-HBDH水平在各组间差异无统计学意义,高剂量组和低剂量组CK-MB比对照组及中剂量组均明显升高(P0.01或P0.05),心脏组织中SOD和NO水平组间差异无统计学意义,MDA水平升高,且中剂量组和低剂量组较对照组,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论DMF在该剂量下对小鼠肝脏影响不明显;DMF对小鼠的心肌具有一定的损害;DMF能够增加心肌的脂质过氧化水平,心肌损伤与脂质过氧化水平升高可能具有一定的关联。 相似文献
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目的了解中原地区农民居住以及生活环境条件,为环境综合治理提供依据。方法于2010—2011年对中原地区3省7个县区560户农村家庭采用现场观察和入户调查的方式,调查垃圾、污水处理、水源及饮用水、厕所等环境卫生状况及相关因素。结果 28.2%(158/560)的家庭庭院整体卫生状况较好;59.8%(335/560)的庭院有散养的家禽家畜,30.2%(169/560)的院落中可见禽畜粪便;58.2%(326/560)的家庭随意堆放生活垃圾,47.9%(268/560)的家庭随意倾倒生活污水,20.7%(116/560)的家庭将污水直接倒入水沟和河流。调查农户以生物质燃料(木材、秸秆等)和煤为主要炊用燃料,分别占61.3%(343/560)和40.4%(226/560)。66.8%(374/560)的家庭为分散式取水,饮用浅层地下水,其中65.9%(369/560)的水井距厕所距离在20m之内,31.6%(177/560)的水井距水塘、池塘距离在50 m之内。调查农户厕所简陋,其中25.9%(145/560)没有顶棚,43.8%(245/560)未清理干净。结论应加强调查地区改水改厕和垃圾污水处理,改善环境卫生状况。 相似文献