CD4+CD25+ T细胞发育调控模型的建立及其意义

目的 建立小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞发育调控的模型,为天然调节性T细胞调控研究提供基础平台。方法 采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量趋势变化与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的趋势变化相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。结论 体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

CXCL16在小鼠免疫性肝损伤中的作用及意义

目的研究CXCL16的表达对小鼠免疫性肝损伤中的作用及意义。方法建立卡介苗和内毒素诱导的小鼠肝损伤模型，通过实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学分析CXCL16在肝组织中的表达变化，根据肝脏病理变化和免疫组织化学结果分析，比较CXCL16的表达水平和肝脏损伤程度的关系。从模型中各个时间点的肝损伤组织中分离浸润单核细胞，计算浸润的细胞数量变化，并进一步分析其中主要的CD4和CD8T淋巴细胞亚群的数量变化，研究CXCL16在肝脏炎症和损伤中的作用和意义。结果成功复制了小鼠免疫性肝损伤模型，发现在肝脏炎症和损伤中CXCL16表达水平显著上调，CXCL16的表达水平与肝脏损伤程度密切相关，肝脏组织浸润的单核细胞数晕明显增加，淋巴细胞尤其是CD4 、CD8 T淋巴细胞数量也有明显的增加。结论小鼠肝脏损伤过程中CXCL16表达水平的增加与肝损伤程度密切相关，CXCL16趋化淋巴细胞浸润可能是导致肝脏损伤的重要机制之。     

NO介导Th1／Th2免疫偏移与日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肝病变的作用

目的：观察日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变为一氧化氮（NO）、Th1/Th2细胞因子水平的动态变化，探讨NO介导Th1/Th2免疫偏移在血吸虫卵肉芽肿病变中的作用。方法：采用石蜡切片，HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变。用硝酸还原酶法和ELISA夹心法分别检测日本血吸虫感染小鼠0－12周血清及脾CD4^ T淋巴细胞培养上清NO、IFNγ和IL－4表达水平，并进行相关分析。结果：感染小鼠0－12周血清和脾CD4^ T淋巴细胞培养上清NO表达水平与小鼠肝肉芽肿病变动态相一致，并呈显著正相关，与IFNγ表达水平呈显著正相关，而与IL－4在小鼠感染慢性期（12周）呈显著负相关。结论：NO在日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变过程中可能是一种与Th1/Th2细胞因子具有同样重要作用的调节因子，并可能是通过调节Th1/Th2细胞因子而发挥作用的，通过调控NO合成介导Th1/Th2免疫偏移可能是控制血吸虫卵肉芽肿病变的新途径。     

重组抗人CD25嵌合单克隆抗体的表达及纯化

采用NSO工程细胞表达重组抗人CD25嵌合单克隆抗体,在5 L细胞反应器进行批次培养,细胞悬液中目标单抗的平均表达量为108 mg/L,每批细胞悬液总体积为4 L.细胞悬液离心后上清液经rProtein A Sepharose FF和SPSepharose FF两步色谱纯化,得纯度大于95%的单抗,回收率约33%.纯化产物经Western blotting验证为目标单抗,具有免疫原性.N-端15个氨基酸序列测定结果与理论序列相符.     

4T1荷瘤小鼠肿瘤相关巨噬细胞（TAM）的表型及吞噬功能的研究

目的:研究小鼠乳腺癌实验动物模型中,荷瘤晚期肿瘤相关巨噬细胞的表型和功能,并探讨其与M2型巨噬细胞的关系.方法:从4T1荷瘤4周的雌性BALB/c小鼠中获取肿瘤相关巨噬细胞,用RT-PCR方法检测其巨噬细胞相关分子CCL3、CCL22、iNOS和Arg Ⅰ的表达水平,用FACS检测巨噬细胞中CDl6/32+和CD206+细胞所占比例,并通过酵母菌吞噬试验评估其功能.结果:肿瘤相关巨噬细胞与荷瘤小鼠的脾脏巨噬细胞相比,表达较高水平的CCL22和CD206,并且对酵母菌的吞噬能力显著下降.结论:4T1荷瘤4周小鼠肿瘤相关巨噬细胞在表型和功能上倾向于替代性活化的巨噬细胞.     

抗CD4单抗增强抗CD3单抗／IL—2活化的肿瘤特异性T细胞的抗瘤活性

目的探讨抗CD4mAb增强抗CD3mAb刺激的肿瘤特异性T细胞增殖和杀瘤活性的作用。方法将肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞,采用4种不同的方案培养1单独加2×104U/LrIL2IL2组2单独加抗CD3mAb抗CD3组3加抗CD3mAb48h后,再加入抗CD3mAb和2×104U/LrIL2抗CD3 IL2组4同时加抗CD3mAb和抗CD4mAb48h后,再加入抗CD3mAb、抗CD4mAb和2×104U/LrIL2抗CD3 IL2 抗CD4组。然后分别检测4组效应细胞的增殖水平、杀瘤活性及表型。结果抗CD3 IL2组细胞的3HTdR掺入量在第6,12和20d分别为:22045、13986和1931;抗CD3 IL2 抗CD4组细胞的3HTdR掺入量在第6、12和20d,分别为46193、31047和7443,后者明显高于前者P0.05。在培养12d时,抗CD3 IL2组的细胞对FBL3细胞株的最大杀伤率为83.6%;抗CD3 IL2 抗CD4组细胞的最大杀伤率为91.7%。细胞表型:FACS分析表明,抗CD3 IL2 抗CD4组培养12d的细胞,99%以上为Thy1.2 细胞,且CD4 、CD25 细胞的百分率均高于抗CD3 IL2组。结论抗CD4mAb对抗CD3mAb刺激、IL2诱导的肿瘤特异性T细胞的增殖和杀瘤活性具有增强作用。     

山西医学院86级学生血清肥达氏反应抗体水平调查

438名本校86级学生血清肥达氏反应抗体滴度几何值的95％单侧上界值为:TO129.33,TH117.03,PA27.96,PB176.44;按二倍稀释法计算滴度区段则为;TO_1:160,TH_1:160,PA_1:40,PB_1:320。入学前长期居留于晋南的学生,PB平均滴度显著高于来自晋中与晋北者。4种抗体中有3种女性水平高于男性。     

HBsAg在T7双质粒系统转染真核细胞中的表达

目的：研究双质粒T7表达系统在真核细胞中表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的情况。方法：脂质体介导的T7双质粒共转染真核细胞，以斑点酶免疫试验(DOT-EIA)检测HBsAg表达情况。结果：HBsAg在质粒转染细胞后24h开始表达，72h达高峰。结论：T7双质粒表达系统能在体外培养的真核细胞中高效表达HBsAg，该系统可能在乙型肝炎病毒(HBV)基因免疫、外源性蛋白的制备等方面发挥重要作用。     

实时定量RT—PCR检测临床肝组织标本中CXCL16及其受体的表达

[目的]建立实时定量RT—PCR方法并检测不同病理状态的肝脏组织中CXCL16趋化因子及其受体CXCR6的表达变化。[方法]建立外参照标准和灵敏的荧光实时定量RT—PCR方法，检测人正常肝组织、癌旁肝组织及癌组织标本中的趋化因子CXCL16及其受体的表达变化，进一步测定和比较其它相关的趋化因子表达谱的表达情况。[结果]获得了灵敏特异的实时定量RT—PCR方法，CXCL16及其受体在癌旁肝损伤组织中显著上调表达，显著高于趋化因子表达谱中其它趋化因子的表达变化，提示它在淋巴细胞尤其是T细胞介导的肝脏损伤过程中可能发挥重要作用。[结论]简便可靠的实时定量RT—PCR适用于检测病理组织中特异基因的表达变化，趋化因子表达谱改变尤其是CXCL16及其爱体CXCR6的显著变化可能与肝脏疾病的病理发生发展密切相关。     

踏实做事 忠厚待人——追念吴厚生教授

本刊副主编吴厚生教授不幸于 2 0 0 2年 9月 8日病逝。吴教授毕生为我国免疫学事业的发展鞠躬尽瘁 ,深受免疫学界的尊重和爱戴。本期特发表复旦大学上海医学院免疫学系熊思东教授的纪念文字 ,并刊登该系青年学者在吴教授指导下写就的研究论文 ,以示悼念。·编者·