人外周血CD123+髓系树突状细胞的体外诱导及生物学特性研究

树突状细胞（DC）是功能强大的专职抗原提呈细胞，根据其表面标记，DC分为髓系DC（myeloid-DC，mDC）和浆细胞样DC（plasmacytoid-DC，pDC）两个大的亚群，前者主要用于抗肿瘤免疫治疗，后者主要参与免疫耐受。最近，在体外诱导的mDC表面发现淋巴系D-C特异性标记CD123的高度表达，但这群兼具髓系和淋巴系标记的DC是否为一个特殊的亚群尚未见报道。     

沈阳市自来水中的烷基酚类污染物

目的 了解沈阳市自来水中环境雌激素类污染物——烷基酚类物质的污染现状。方法 采用固相萃取、气相色谱-质谱仪联机离子选择性检测方法,于2002-2003年测定沈阳市自来水厂21份出厂水样中的烷基酚类污染物。结果 沈阳市自来水中烷基酚类污染物主要是4-t-辛基苯酚、壬基苯酚和双酚A,最高浓度分别为690．5ng／L(范围：29．5—690．5ng／L)、2791．6ng／L(范围：212．1-2791．6ng／L)和161．0ng／L(范围：14．7—161．0ng／L)。水厂之间自来水中烷基酚类污染物的种类和浓度具有明显的差异,同一个水厂出厂水中的烷基酚类污染物存在季节性差异。结论 沈阳市自来水中烷基酚类污染应引起重视,并采取必要的措施保护人群饮水安全。     

染料木黄酮对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用及其机制研究

目的观察染料木黄酮(genistein,GEN)对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,探讨GEN抑制3T3-L1细胞分化的作用及分子机制。方法用含1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松和胰岛素的培养液(MDI)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,同时用GEN或p38抑制剂SB203580干预。作用6d后,用油红染色实验观察脂肪形成情况;检测细胞培养液中非酯化脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)的含量;用Western blotting技术检测细胞中脂肪酸合酶(FAS)的蛋白表达。用GEN预处理30min后,用胰岛素刺激3T3-L1细胞,检测磷酸化p38MAPK(p-p38)的蛋白表达。结果GEN可以有效抑制3T3-L1细胞的脂肪形成,降低培养液中NEFA、TG的含量。胰岛素刺激后,3T3-L1细胞中p-p38的表达迅速增强,并在5min时达到高峰,GEN可以有效降低p-p38的表达。GEN、SB203580均能降低FAS的蛋白表达。结论染料木黄酮能有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的脂肪分化,其机制是通过p38途径对FAS的抑制发挥作用。     

重组人类红细胞生成素治疗血透贫血患者的长期疗效观察

用重组人类红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）治疗血液透析贫血患者６７例。治疗３年后患者的血红蛋白（Ｈｂ）及红细胞比积（Ｈｔ）均较３年前明显增高；血清铁和血清铁蛋白较３年前降低；收缩压、舒张压及心胸比值则无明显变化。提示长期使用ｒＨｕＥＰＯ能有效地改善血透患者的贫血状态，但同时也导致缺铁。     

IFN-γ激活的脐血树突状细胞对肿瘤细胞的杀伤作用及其机制研究

树突状细胞(dendriticcell,DC)不仅具有抗原提呈功能,本身也具有一定程度的肿瘤杀伤活性。目前,有关DC直接抗肿瘤活性的研究主要集中于外周血及骨髓来源的DC,而脐带血DC尚未见相关报道。因此,本文以脐血单核细胞诱导的DC为研究对象,检测其在成熟刺激因子γ干扰素(interferonγ,IFNγ)激活后对恶性血液病细胞株的杀伤活性,并通过细胞膜及细胞内TNF家族配体的改变初步探讨其杀伤机制。结果发现:①脐血单个核细胞在含有rhGMCSF(800IUml)、IL4(1000IUml)及rhTNFα(100IUml)的培养液中培养12d后呈现典型的DC形态。同时,细胞表面CD…     

脐血CD123+髓系树突状细胞的生物学特性研究

探讨人脐血单核细胞在髓系树突状细胞（DC）体外诱导体系中获得的CD123^＋髓系DC的生物学特性。分离脐血单核细胞，用人重组的粒／单核细胞集落刺激因子（GMCSF）和IL-4将其诱导为IX2。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子、CD123和CDllc的表达，并用间接免疫磁珠法将其中CD123^＋ DC加以分离纯化；激光共聚焦显微镜、扫描电镜和倒置显微镜观察CD123^＋ DC形态；^3H-TdR渗入法检测CD123^＋ DC对同种异体T细胞的刺激能力。脐血单核细胞经GM-CSF和IL4诱导7d后，细胞表面高度表达HLA-DR、CD86、CDllc和CD123，低表达CD83，丧失CD14的表达，其中CD123和CDllc均匀分布于DC表面。免疫磁珠纯化后的CD123^＋ DC呈现不成熟DC形态，除细胞体积较小外，其表面突起类似于CD123DC。CD123^＋ DC能明显刺激同种异体T细胞增殖，但其刺激能力较CD123 DC组低（P〈0．05）。GM-CSF和IL-4培养体系中的CD123^＋DC可能是DC分化发育过程中更早期的未成熟髓系DC，具有独特的生物学特性。     

激活的人外周血及脐血树突状细胞对肿瘤细胞直接杀伤作用的比较

目的 :探索人外周血或脐带血树突状细胞在干扰素 γ(IFN γ)或细菌脂多糖 (LPS)激活前后对肿瘤细胞杀伤活性的影响。方法 :分离健康供者外周血或脐血单核细胞 ,用重组粒单细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白介素 4 (IL 4 )或联合肿瘤坏死因子 (TNF α)将其分别诱导为外周血树突状细胞 (PbDC)及脐血树突状细胞 (CbDC) ,二者分别于诱导第 7天或第 11天在合成培养基中加入LPS或IFN γ继续培养 12小时 ,将其激活。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的改变 ;同时 ,以Jurkat、HL6 0及Daudi为靶细胞 ,以不同效靶比与DC共同培养 18小时 ,采用51 Cr释放实验检测DC激活前后抗肿瘤活性的差异。结果 :①LPS及IFN γ可上调外周血及脐带血DC表面CD86、CD83的表达 ,以LPS刺激组更明显 ,但对CD1a的表达影响较小。②以PbDC为效应细胞 ,LPS或IFN γ可分别增强DC对Daudi或HL6 0的杀伤活性 ,在效靶比为 2 0 :1时与未加刺激因子对照组(Medium DC)相比差异有显著意义 (P <0 0 1)。然而 ,LPS DC对HL6 0、IFN DC对Daudi则无明显杀伤活性 ;但二者对Jurkat却均有杀伤作用。③以CbDC为效应细胞 ,LPS及IFN γ对其杀伤活性的调节作用与对PbDC的相似。但在未加刺激因子前 ,Cb DC可有效杀伤Jurkat细胞 ,而Medium PbDC对Jurkat细胞未见杀伤     

小儿急性白血病长期生存病例的探讨

大阪小儿白血病研究组所属十所医院,至1979年11月末,五年以上长期生存白血病患者共38例,其中急性淋巴细胞性白血病(ALL)33例,急性粒细胞性白血病(AML)5例。男20例,女18例。诱导缓解:强地松40mg/m~2,连日给药。长春新碱1.5mg/m~2,每周一次静注,4～6周后做骨髓穿刺,若确定完全缓解,改维持疗法。维持缓解初期,为预防神经系统白血病,鞘内注射氨甲喋呤12mg/m~2,每周1～2次,共五次,同时颅骨照射2400rad,维持疗法应用6MP50mg/m~2,连日口服,环磷酰胺200mg/m~2、氨甲喋呤20mg/m~2,每周一次     

树突状细胞对肿瘤细胞株的直接杀伤活性

目的 对比分析干扰素－γ（Interferon-γ,IFN-γ)或脂多糖（lipoplysaccharide,LPS)刺激后的树突状细胞（dendritic cell,DC)对肿瘤细胞杀伤活性的差异。方法 分离健康供者外周血单核细胞，用粒单细胞集落刺激因子和白介素－4诱导为DC。于培养液中加入LPS或IFN－γ培养12h，作为LPS激活的DC（LPS－DC）及IFN－γ激活的DC（IFN－DC）。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的改变，以明确LPS或IFN－γ对DC的不同刺激作用；同时，以恶性血液病细胞株HL－60 Jurkat及Daudi为靶细胞，用不同效靶比与DC共同培养18h，采用^51Cr释放试验检测LPS－DC及IFN－DC抗肿瘤活性的差异。结果 ①LPS及IFN－γ可不同程度的上调DC表面CD86、CD80、CD83及CD1a的表达，以LPS刺激组明显。②IFN－γ和LPS可分别增强DC对HL60及Daudi的杀伤活性，在效靶比为20：1及10：1时杀伤率与未加刺激因子对照组（medium-DC)相比差异有显著意义（P＜0．05）。相反，IFN－γ－DC对Daudi、LPS－DC对HL－60无明显杀伤活性，但两者对Jurkat均具杀伤作用。结论 LPS及IFN－γ激活的DC对肿瘤细胞的杀伤活性具有相对肿瘤特异性。     

VEGF、MMP-2在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理学因素和预后的关系

目的:探讨血管内皮细胞生长因子和基质金属蛋白酶与非小细胞肺癌生长、浸润、淋巴结转移等临床病理学因素和预后的相关性.方法:研究对象为1994年5月～1995年12月在东京医科大学第一外科手术切除的149例非小细胞肺癌.标本经丙酮固定、石蜡包埋后,制成4 μm厚的切片,以抗VEGF、抗MMP-2作为一次抗体,采用ABC法进行免疫组织化学染色,显微镜下观察记数阳性细胞表达率.结果:VEGF、MMP-2的阳性表达率分别为63.1%、72.3%.VEGF的表达与肿瘤浸润(T因素,P＜0.01)、淋巴结转移(N因素,P＜0.01)显著相关,VEGF的表达在不同的TNM分期(Ⅰ/Ⅱ Ⅲ Ⅳ)之间有显著性差异(P＜0.01),在有无淋巴管浸润上也有显著性差异(P＜0.05).MMP-2的表达与淋巴结转移(P＜0.01)和淋巴管浸润(P＜0.01)显著相关.对135例患者进行了生存期分析.本组3a和5a生存率分别为59.1%和47.2%.Kplan-Meier生存分析显示本组患者的生存期与VEGF(P＜0.01)和MMP-2(P＜0.05)的表达均显著相关.而VEGF和MMP-2联合表达者预后更差(P＜0.01).结论:VEGF、MMP-2的表达与非小细胞肺癌的发生、发展过程有关,VEGF、MMP-2的表达与非小细胞的预后密切相关.VEGF和MMP-2联合表达更有助于评价肿瘤的恶性度和判断预后.