PC对CIA小鼠关节的保护作用研究

目的：研究蛋白C(PC)对胶原诱导的关节炎（CIA）的影响及其是否通过内皮细胞蛋白C受体（EPCR）通路发挥作用。方法：构建CIA小鼠模型，并随机分为CIA模型组和CIA+PC组。CIA+PC组预防性给予PC,CIA模型组不做任何处理。应用量化评分评估PC对足肿胀的缓解程度；Micro-CT、HE染色、甲苯胺蓝染色观察小鼠骨/软骨破坏情况；双重免疫荧光法检测EPCR在小鼠滑膜组织中的表达情况；应用siEPCR腺病毒载体干扰EPCR蛋白表达，观察其对PC作用的影响。结果：PC干预CIA小鼠后，小鼠的临床评分降低，足爪肿胀程度减轻，骨侵蚀缓解；在CIA小鼠和DBA1小鼠的关节滑膜组织中检测到EPCR表达，且CIA小鼠EPCR表达明显低于DBA1小鼠。PC+siEPCR腺病毒载体干预CIA小鼠后，CIA小鼠临床评分无明显降低，关节症状未得到有效缓解。结论：PC可改善CIA小鼠的关节症状，进而缓解CIA疾病进展。而siEPCR可逆转PC的这种保护作用，因此PC缓解CIA疾病进展依赖于EPCR蛋白表达。     

儿童朗格罕细胞组织细胞增生症BRAFV600E突变对预后的影响

目的 探讨BRAFV600E突变在儿童朗格罕细胞组织细胞增生症（LCH）中的预后意义以及影响儿童LCH的预后因素。方法 回顾性纳入首都医科大学附属北京儿童医院2016年1月1日至2017年12月31日收治的初治LCH患儿，采用数字PCR方法检测患儿病灶组织中的BRAFV600E突变，分析突变与临床特征和预后的相关性，影响预后的因素。结果 140例LCH患儿纳入研究，诊断时中位年龄为2.2（0.1~15.7）岁，男89例（63.6%），女51例。临床分型为单系统（SS）60例（42.9%），多系统无危险器官受累（MS RO－）47例（33.6%），多系统有危险器官受累（MS RO+）33例（23.6%）。中位随访时间34.1（0.9~50.7）月，随访期内70例（50.0%）出现进展或复发，12例（9.6%）出现持续性后遗症，死亡3例（2.1%）。总体3年无进展生存率（PFS）、无事件生存率（EFS）和总生存率（OS）分别为（48.9±4.5）%、（46.6±4.4）%和（97.8±1.2）%。①儿童LCH中BRAFV600E突变阳性率67.1%（94/140）。②BRAFV600E突变与患儿临床分型明显相关，突变阳性率MS RO+患儿（90.9%）高于MS RO－患儿（53.2%）或SS患儿（65.0%）（P=0.001）；皮肤受累患儿中突变阳性率（77.8%）高于非皮肤受累的患儿（P=0.042）；③BRAFV600E突变阳性患儿进展/复发率（57.4%）高于突变阴性患儿（34.8%），P=0.019。3种临床分型中突变阳性和阴性患儿的预后差异均无统计学意义。④多因素分析结果表明，危险器官受累是影响LCH患儿PFS的独立预后因素（HR=2.702，P=0.003），垂体受累（HR=3.582，P<0.001）、危险器官（HR=2.321，P=0.008）和耳部受累（HR=2.093，P=0.013）是EFS的独立预后因素。结论 LCH患儿BRAFV600E突变与危险器官受累密切相关，突变阳性患儿的进展/复发率高于突变阴性患儿，BRAFV600E不是儿童LCH的独立预后因素。     

侧柏叶中的1个新苯丙素苷

目的研究侧柏Platycladus orientalis叶的化学成分及抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法采用硅胶、MCI、聚酰胺及制备液相色谱分离纯化并用波谱技术进行结构鉴定。采用DPPH和ABTS法进行抗氧化活性研究,p NPG法进行α-葡萄糖苷酶抑制活性研究。结果从侧柏叶80%乙醇提取物中分离得到了11个化合物,分别鉴定为4-O-(1′,3′-二羟基丙基-2′-)-二氢松柏醇9-O-β-D-葡萄糖苷(1)、杨梅苷(2)、5,8,3′,4′-四羟基黄酮7-O-β-D-木糖苷(3)、isomassonianoside B(4)、(-)-异落叶松脂素9′-O-β-D-葡萄糖苷(5)、(7R,8S,7′S,8′R)-4,9,4′,7′-tetrahydroxy-3,3′-dimethoxy-7,9′-epoxylignan4-O-β-D-glucopyranoside(6)、柳杉酚(7)、桃柁酚(8)、5,6-dehydrosugiol methyl ether(9)、isopimara-8,15-dien-7-one(10)和α-L-鼠李糖乙醇苷(11)。结论化合物1为新化合物,命名为侧柏苷A;已知化合物中,7个化合物(4～7、9～11)为首次从侧柏植物得到,6个(4～6、9～11)为首次从侧柏亚科植物中得到,4个(5、6、10、11)为首次从柏科植物中得到。化合物2～6显示出了一定的抗氧化活性;2和3显示了一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

五岁以下重症肺炎患儿预后的危险因素

目的 探讨五岁以下重症肺炎患儿的临床治疗及影响预后的危险因素，为临床小儿重症肺炎的防治、诊治及预后提供理论依据。方法 收集2016年10月～2018年10月徐州医科大学第二附属医院住院部115例重症肺炎患儿的临床资料，回顾性分析所有患儿的临床资料、并发症及相关治疗，并采用Logistic回归分析其预后的危险因素。 结果 115例重症肺炎患儿中，呼吸性酸中毒42例（36.52%）；低钠血症38例（33.04%）和低钙血症37例（32.17%）；呼吸合胞病毒33例（28.69%）；肺炎克雷伯杆菌11例（9.57%）；胸部X线检查示斑片状阴影105例（91.30%），经治疗无效或加重者，80例行胸部CT检查示肺节段性不张44例（55.00%）。106例患儿出现并发症，其中47.17%患儿出现一种并发症，5283%患儿出现两种及以上并发症，所有患儿均使用抗生素治疗。使用与未使用机械通气患儿的预后比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。经单因素分析，入院前病程、转入重症监护室、有基础疾病、有并发症、贫血、电解质酸碱平衡紊乱、低白蛋白的患儿治疗有效率显著降低（P＜0.05）。经多因素Logistic回归分析，入院前病程、转入重症监护室、有基础疾病、有并发症、贫血、电解质酸碱平衡紊乱、低白蛋白均为影响重症肺炎患儿预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论 重症肺炎患儿的病情复杂多样，入院前病程、转入重症监护室、基础疾病、并发症、贫血、电解质酸碱平衡紊乱、白蛋白均为影响重症肺炎患儿预后的独立危险因素，应积极治疗，有效给予对症干预，以改善患儿预后，降低患儿病死率。     

肿瘤坏死因子α拮抗剂治疗炎性关节病不良反应分析

目的评价肿瘤坏死因子α(TNF-α)抑制剂治疗炎性关节病患者的不良反应分析,为临床治疗提供参考。方法观察并记录226例在我科病房和门诊接受了TNF-α抑制剂治疗的炎性关节病的患者,其中英夫利西单抗疗程5个月,国产重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(商品名:益赛普)及其他TNF-α抑制剂疗程为3个月,观察患者用药后的不良反应。采用χ2检验法进行统计分析。结果接受TNF-α抑制剂治疗的226例炎性关节病患者,随访用药后发生不良反应,其中英夫利西单抗和国产重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(商品名:益赛普)及其他组引起的不良反应发生率差异有统计学意义(分别为35%,71%,52%,P=0)。结论 TNF-α抑制剂治疗炎性关节病其主要不良反应为感染,其次为局部注射反应,最严重的不良反应为全身性过敏反应,主要发生在第3,4次接受英夫利西单抗治疗的患者,因此,临床使用TNF-α抑制剂时应对患者严密监测。     

扶正消瘤颗粒对原发性肝癌血清中VEGF、HIF-1α表达的影响及临床意义＊

目的 探讨扶正消瘤颗粒对原发性肝癌血清中血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）和缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）表达的影响及临床意义。方法 选择符合纳入标准的原发性肝癌患者66例，按1∶1随机分试验组和对照组。观察治疗过程中两组VEGF、HIF-1α水平的变化及对患者临床疗效指标的影响。结果 （1）在性别、年龄、合并乙型肝炎、Child-Pugh分级、AFP值、临床分期方面，试验组和对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。（2）肝癌患者在治疗各时间节点的VEGF和HIF-1α表达水平呈线性正相关（r = 0.829，P < 0.001）。（3）VEGF浓度在经导管动脉化疗栓塞术（Transcatheter arterial chemoembolization，TACE）后3月降至术前水平（P > 0.05），HIF-1α在TACE后3月仍高于术前（P < 0.05）。（4）扶正消瘤颗粒可降低HIF-1α水平，下调VEGF的表达。（5）扶正消瘤颗粒可减少TACE序贯RFA治疗后的不良反应，提高患者的生活质量（P < 0.05）。（6）血清中VEGF水平与生活质量无明显相关性（P > 0.05，r = 0.251），HIF-1α水平与生活质量存在正相关性（P < 0.05，r = 0.450）。结论 扶正消瘤颗粒可明显改善TACE序贯RFA治疗后患者生活质量，降低HIF-1α水平，下调VEGF的表达，抑制肿瘤血管生成。     

胰岛素泵与每日多次胰岛素注射治疗妊娠合并1型糖尿病:CONCEPTT随机试验的预设分析

2018年12月,Diabetes Care杂志发表了一篇对“1型糖尿病女性孕期连续血糖监测的研究”(Continuous Glucose Monitoring in Women With Type 1 Diabetes in Pregnancy Trial,CONCEPTT)的预设性二级分析,探讨胰岛素泵治疗妊娠合并1型糖尿病的疗效[1].CONCEPTT是一项多中心、非盲、随机试验,用于评估实时连续血糖监测(real-time continuous glucose monitoring,CGM)联合自我血糖监测(self-monitoring of blood glucose,SMBG)与单独进行SMBG的临床有效性差异,结果显示CGM对采用腺岛素泵和每日多次胰岛素注射(multiple daily injections,MDI)孕妇的血糖控制及减少新生儿并发症都有积极作用。     

miR －7对乳腺癌细胞骨转移的影响

目的：探讨miR－7抑制乳腺癌细胞骨转移的分子机制。方法转染含miR－7基因序列的GFP表达质粒进入MDA－MB－231乳腺癌细胞，荧光显微镜下检测外源基因的整合效率，Western blot方法检测PI3K、AKT－2、CXCR－4和MMP－9的蛋白表达量，Transwell体系检测乳腺癌细胞的迁移能力；建立乳腺癌骨转移模型，病理检查分析骨转移情况；miRNA靶基因预测软件分析miR－7潜在治疗靶点。结果荧光显示含GFP／miR－7基因的质粒被高效转入乳腺癌细胞，转染后癌细胞PI3K、AKT－2和CXCR－4的蛋白量均有明显降低（ P＜0.05， P＜0.01），MMP－9无明显变化（P＞0.05）；体内外模型均显示miR－7可抑制乳腺癌细胞的远位转移；miRNA靶基因预测软件分析显示PI3K是miR－7的潜在沉默靶点之一。结论 miR－7可能通过靶向沉默PI3K／AKT－2通路途径间接影响CXCR－4／SDF－1轴进而抑制乳腺癌细胞的骨转移。     

α-突触核蛋白聚集及传播模型的构建

目的 建立α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集及传播的细胞和动物模型,为帕金森病的发病机制研究提供基础。方法 亲和层析法纯化α-syn蛋白,体外诱导其聚集成为α-syn纤维(Preformed fibrils,PFFs); 培养稳定表达GFP-α-syn的HEK293细胞系及原代神经元,转导α-synPFFs后免疫荧光染色法观察细胞内α-syn聚集情况; 小鼠立体定位注射α-syn PFFs,免疫组织化学法检测内源性α-syn的聚集及传播情况。结果 纯化的α-syn可在体外聚集形成聚集体; 在细胞及动物水平观察到α-syn PFFs可诱导内源性蛋白的聚集和传播。结论 本研究建立了α-syn聚集及传播的细胞和动物模型,为帕金森病的相关研究打下了基础。