沉默VEGF对人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R侵袭迁移的影响

目的 探讨沉默血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）对人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R迁移和侵袭能力的影响。方法 制备含VEGF-shRNA的慢病毒载体（VEGF-LV1、VEGF-LV2、VEGF-LV3）和对照shRNA重组慢病毒（VEGF-NC），并转染人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R，建立稳定沉默VEGF细胞（CNE-LV1、CNE-LV2和CNE-LV3）和阴性对照细胞（CNE-NC）。采用RT-qPCR和Western blot法检测细胞转染效果，划痕实验和Transwell小室实验检测VEGF沉默后细胞的迁移和侵袭能力。结果 成功构建VEGF-shRNA重组慢病毒并建立了稳定沉默VEGF细胞CNE-LV3。划痕实验和Transwell小室迁移实验显示，与空白对照组和CNE-NC组相比，CNE-LV3组细胞迁移率明显降低［（50.17±1.76）% vs （37.97±1.56）%，P＝0.001；（50.63±1.52）% vs （37.97±1.56）%，P＝0.001］，穿膜细胞数亦明显下降［（95.3±3.8） 个 vs （41.3±1.5） 个，P＜0.001；（94.3±4.0） 个 vs （41.3±1.5） 个，P＜0.001］；Transwell小室侵袭实验结果亦显示，CNE-LV3组细胞穿膜细胞数较空白对照组和CNE-NC组明显下降［（46.3±2.1） 个 vs（105.3±1.5） 个，P＜1.001；（46.3±2.1） 个 vs （93.3±2.5） 个，P＜0.001］。结论 沉默VEGF表达可抑制人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R的迁移和侵袭能力。     

LncRNA MEG3靶向miR-181a-5p调控宫颈癌细胞放射敏感性

目的 研究LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测放射抗性和放射敏感性宫颈癌细胞中LncRNA MEG3的表达;将过表达对照组(转染pcDNA 3.1)、过表达LncRNA MEG3组(转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3)、抑制miR-NC组(转染anti-miR-NC)、抑制miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-NC组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-NC)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-181a-5p组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-181a-5p),均用脂质体法转染至SiHa细胞;克隆形成实验检测细胞的存活分数;流式细胞术检测细胞的凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;Western blot检测细胞中PTEN、p-Akt、Akt的蛋白表达。结果 与放射敏感组相比,放射抗性宫颈癌组织中LncRNA MEG3的表达明显降低(P<0.05),其表达量与宫颈癌细胞的放射敏感性呈正相关;过表达LncRNA MEG3、抑制miR-181a-5p均可显著增强宫颈癌细胞SiHa放射敏感性,促进凋亡(P<0.05);野生型LncRNA MEG3细胞的荧光活性受miR-181a-5p的抑制。过表达miR-181a-5p逆转了LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射增敏和促凋亡作用及对PTEN/Akt信号通路的调控。结论 长链非编码RNA LncRNA MEG3可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-181a-5p调控PTEN/Akt 信号通路有关,可为提高宫颈癌的预后提供新方向。     

纯合型家族性高胆固醇血症家系基因型与表型分析

目的对1个纯合型家族性高胆固醇血症(HoFH)家系进行遗传学分析.方法前瞻性研究.选择西安市儿童医院心内科2018年10月确诊的1个HoFH家系先证者及家系成员共20人为研究对象,收集临床资料,提取基因组DNA,对先证者进行全外显子靶向捕获二代测序,并在家系内进行Sanger测序验证.对家系成员杂合突变携带者和未携带者的基因型与表型进行分析.结果先证者为7岁10月龄男性患儿,生后尾骨处皮肤可见圆形绿豆大小黄色皮肤突起,3~4岁起双侧肘关节、膝关节及跟腱处皮肤逐渐出现直径0.5~1.5 cm的黄色瘤样结节,患儿身高、体重、智力发育与同龄儿相同.家族其他成员无类似皮肤黄瘤.患儿总胆固醇(TC)18.16~21.24 mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)14.08~15.51 mmol/L,颈部超声提示双侧颈动脉及椎动脉弥漫性硬化斑块,心脏彩超提示主动脉瓣增厚、钙化.基因检测确定了先证者LDLR基因携带c.418G>A(p.E140K)纯合突变,分别遗传自患儿父母,二人为近亲结婚,均携带LDLR-E140K基因杂合突变.家系中携带LDLR-E140K基因杂合突变成员TC、LDL-C和载脂蛋白B分别为(8.40±0.13)、(6.79±0.01)、(1.95±0.05)mmol/L,明显高于未携带者[(4.59±0.28)、(3.35±0.39)、(0.86±0.10)mmol/L,t=7.269、4.595、6.311,P均<0.05].结论LDLR-E140K基因纯合突变致儿童HoFH,携带纯合突变的先证者临床表型最严重,携带杂合突变的家系成员均有高胆固醇血症表型,LDLR-E 140K是家族性高胆固醇血症的致病性变异.     

高通量透析与血液透析滤过对慢性肾衰竭患者IL-17、CD16 表达影响

目的:探讨高通量透析(HFD)与血液透析滤过(HDF)对慢性肾衰竭(CRF)患者IL-17、CD16表达影响。方法:收集2017年10月至2018年12月在本院进行治疗的CRF患者131例,采用HFD治疗的67例患者为HFD组,64例采用HDF治疗的患者为HDF组,另收集同期在我院体检的健康志愿者56例作为对照组,比较HFD组、HDF组治疗前后及对照组IL-17与CD16水平,并比较治疗后2组疗效和不良反应,利用受试者工作特征曲线(ROC)分析IL-17与CD16在CRF中的诊断价值,使用多因素Logistic回归分析患者并发高血压危险因素。结果:治疗前HFD组与HDF组的IL-17表达差异无统计学意义(P0.05),HFD组与HDF组的IL-17水平显著高于对照组(P0.05),治疗后HFD组与HDF组的IL-17均显著降低(P0.05),且两组治疗后的IL-17均显著高于对照组(P0.05),HFD组IL-17高于HDF组(P0.05)。治疗前HFD组与HDF组的CD16比较差异无统计学意义(P0.05),HFD组与HDF组的CD16水平显著低于对照组(P0.05),治疗后HFD组与HDF组的CD16均治疗前显著升高(P0.05),且两组治疗后的CD16均显著低于对照组(P0.05),HFD组CD16低于HDF组(P0.05)。ROC曲线显示IL-17曲线下面积为0.914,CD16曲线下面积为0.889,联合检测曲线下面积为0.964,HFD组与HDF组疗效比较差异无统计学意义(P0.05),在心率失常和低血压上HFD组的发生率显著低于HDF组(P0.05),多因素Logstic回归分析发现高水平血磷,IL-17,低水平CD16是CRF患者并发高血压的独立危险因素。结论:HFD与HDF均会降低患者的IL-17,提高CD16,且HDF改善程度更好,两种方式疗效无明显区别。HFD可以降低患者治疗后并发心律不齐以及低血压的概率,高水平血磷,IL-17,低水平CD16是CRF患者并发高血压的独立危险因素。     

自体内瘘瘤样扩张缩窄术临床疗效观察

目的观察自体动静脉内瘘瘤样扩张缩窄术的临床疗效。方法选择2016年1月至2017年10月因自体动静脉内瘘瘤样扩张就诊于海南省人民医院血液净化中心的患者,回顾性分析患者临床特点、手术方法、成功率、手术治疗的适应症,术后随访及内瘘使用情况。结果 28例患者,男性16例,女性12例,平均年龄(47.0±12.2)岁,平均透析龄(73.8±33.7)月,自体动静脉内瘘自建立至发展为瘤样扩张时间为(51±22)个月。其中23例,术中采用导尿管作为支撑对瘤样扩张行缩窄手术,3例行瘤样扩张切除+近心端重建,2例行结扎内瘘+对侧重建术。手术成功率100%。术后随访6～12个月,临床症状改善明显,内瘘直径由术前的(3.22±0.77) cm缩小至(1.49±0.26) cm,差异具有统计学意义(t=13.686,P0.01);肱动脉血流量由术前的(2.9±0.9) L/min下降至术后(1.3±0.4) L/min,差异具有统计学意义(t=13.372,P0.01)。术后1～14 d重新使用内瘘透析。结论缩窄术治疗自体动静脉内瘘瘤样扩张效果显著。     

妊娠合并症及羊水污染与新生儿窒息的关联性及早期预防措施

目的 探讨妊娠合并症、羊水污染与新生儿窒息的关联性分析及早期预防措施.方法 选取(2018年4月至2021年3月)我院发生新生儿窒息的200例作为研究组,同期健康新生儿112例作为对照组,统计比较两组1 min Apgar评分,并对可能影响新生儿窒息的相关因素进行单因素及Logistic多因素回归分析.结果 研究组1min Apgar评分低于对照组(P<0.05);研究组妊娠期合并症、羊水污染、胎盘早剥、胎位异常、宫内窘迫、产程异常发生率较对照组高(P<0.05);胎位异常、羊水污染、产程异常、妊娠期合并症、宫内窘迫、胎盘早剥均为新生儿窒息危险因素(P<0.05).结论 娠期合并症、胎盘早剥、胎位异常、产程异常、羊水污染、宫内窘迫为新生儿窒息危险因素,临床应尽早明确上述因素,并结合上述因素实施科学合理防治措施,以降低新生儿窒息发生率.     

半夏泻心汤及其类方不同配伍对正常大鼠胃液成分的影响

目的为类方的配伍研究提供可参考的试验设计方法.方法用均匀设计法对半夏泻心汤及其类方进行组方药量变化研究,以胃液分析为药理学指标,对所得的药理实验数据进行逐步回归分析.结果在半夏泻心汤、甘草泻心汤方中,各药味对胃液成分的影响其变化趋势类似,但影响程度不尽相同,生姜泻心汤与其他两方出入较大.不同药味之间存在交互作用.结论本方法对类方配伍研究有一定参考价值.     

南通市青少年非故意伤害行为现状分析

目的了解南通市青少年非故意伤害行为现状,为相关部门制定政策和合理的干预措施提供科学依据。方法采取多阶段分层整群抽样的方法,于2015年对南通市41所学校的8 928名青少年学生进行网络问卷调查。结果步行违规发生率男生显著高于女生(P0.000 1),高中生、大学生高于初中生(P0.000 1),城市学生高于农村学生(P0.000 1);到没有安全措施的地方游泳的发生率男生高于女生,差异有统计学意义(P0.000 1);到没有安全措施的地方滑冰的发生率男生高于女生,初中生、高中生高于大学生,家庭人均月收入越低的学生去没有安全措施的地方滑冰的比率越高,差异有统计学意义(均P0.05);骑车违规行为发生率最高的是骑车带人,高中生和大学生显著高于初中生(P0.001),其次是骑车双手离把现象,男生比女生、高中生比初中生和大学生更容易双手离把骑车(均P0.01)。结论南通市青少年非故意伤害危险行为发生率较高,相关部门应给予充分重视,采取针对性的措施,共同预防和控制非故意伤害危险行为的发生,从而最大限度地减少青少年非故意伤害的发生,促进青少年健康成长。