人参皂苷Rb1在Aβ损伤的PC12细胞中激活线粒体自噬的机制研究＊

目的 基于Aβ损伤的PC12模型，观察人参皂苷Rb1对线粒体自噬的调节作用。方法 用Aβ损伤PC12细胞建立体外AD模型，采用人参皂苷Rb1进行干预后，利用透射电镜观察自噬情况，Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、PINK1、parkin、NDP52和OPTN蛋白的表达，荧光实时定量PCR检测LC3、p62、PINK1、parkin、NDP52、OPTN mRNA水平。结果 人参皂苷Rb1高剂量促进细胞中自噬小体包裹受损线粒体，升高LC3Ⅱ/Ⅰ比值（P < 0.05），减少p62蛋白水平（P < 0.05）；同时，人参皂苷Rb1显著增加了PINK1蛋白表达（P < 0.01），同时减少OPTN及NDP52蛋白水平（P < 0.05）；此外，人参皂苷Rb1高剂量组parkin、OPTN mRNA表达显著上调（P < 0.01），低剂量组PINK1、NDP52 mRNA表达也显著上调（P < 0.05）。结论 人参皂苷Rb1神经保护作用与调节线粒体自噬相关，通过激活PINK1/parkin通路促进线粒体自噬而改善体外AD模型损伤情况。     

食管贲门癌伴糖尿病44例围术期处理

我院自 1 996年～ 2 0 0 0年 5年间共手术治疗合并糖尿病的食管贲门癌患者 44例 ,占同期同类手术2 4 5 0例的 1 .80 % ,取得了较好的效果 ,现就围术期处理总结如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 44例中 ,男 3 6例 ,女 8例。年龄 42～ 74岁 ,平均 5 8.5± 6 .2岁 ,入院时空     

成功救治一例罕见放线菌感染致全身转移性多发脓肿

放线菌病多为慢性肉芽肿性炎症,好发于颜面、颈项、舌和下颌等部位,然而由放线菌感染所致的全身转移性多发脓肿十分罕见,其致病菌的分离、鉴定颇不容易,病情严重复杂使临床治疗极为困难,现将我们成功治疗1例发病17年患者的经验报告如下。     

急性髓系白血病异基因骨髓移植后乳腺浸润1例

正急性髓系白血病是多能干细胞或已轻度分化的前体细胞核型发生突变所形成的一类疾病,属于造血系统的克隆性恶性疾病。目前治疗急性白血病最为有效的手段是异基因骨髓移植,而移植后复发是治疗失败的主要原因,并且也是预后不良的指征。同时白血病单纯乳腺浸润极为罕见[1-3],异基因骨髓移植后单纯乳腺浸润则更为罕见[4]。笔者对贵州医科大学附属医院2015年11月收治的1例急性髓系白血病M2型异基因     

预热诱导K_(562)细胞热应激蛋白70高表达对高温引起细胞凋亡的影响

为初步观察预热诱导的应激蛋白 70 (HSP70 )高表达对高温所致细胞凋亡影响 ,用 40℃预热诱导K5 6 2 细胞产生应激蛋白 70高表达 ,用 RT- PCR半定量法检测细胞应激蛋白表达情况 ,然后分别将预热细胞和对照细胞置于 43℃用高温诱导细胞凋亡 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡率 ,判断 HSP70高表达对细胞凋亡的影响。用 RT- PCR检测发现 ,随着细胞预热时间的延长 ,细胞 HSP70合成明显增加 ,到 12 0 min时达到最高 ,高水平可以维持数小时 ;43℃高温处理后 ,未预热组的细胞凋亡率明显高于预热细胞 ;预热时间长的细胞组细胞凋亡率明显低于预热时间短的细胞组。提示 HSP70高表达可以抑制高温所致的 K5 6 2 细胞凋亡。     

β-胡萝卜素抑制人肝癌细胞株SMMC-7721增殖的研究

为了探讨 β 胡萝卜素抑制肝癌细胞增殖的机制 ,在体外培养肝癌细胞株SMMC 772 1,培养基添加2 0、40及 80 μmol Lβ 胡萝卜素作用 12、2 4和 48h后 ,用四唑盐比色试验 (MTT)检测细胞的存活和生长 ;台盼蓝拒染法绘制生长曲线 ;DNA凝胶电泳检测肝癌细胞凋亡。MTT检测结果显示 2 0～ 80 μmol L的 β 胡萝卜素均对SMMC 772 1细胞株有显著的抑制作用 ,且呈剂量 效应关系。DNA凝胶电泳结果显示 β 胡萝卜素能够诱导SMMC 772 1细胞凋亡。结论认为 β 胡萝卜素对人肝癌细胞株SMMC 772 1的增殖具有显著的抑制作用 ,其机制可能是通过干扰肝癌细胞的DNA代谢和诱导肝癌细胞凋亡     

人参皂苷Rg1通过激活PINK1/parkin增强线粒体自噬保护Aβ损伤的PC12细胞

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)患者脑中的β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)沉积是造成神经元线粒体损伤的直接原因。线粒体自噬是清除受损线粒体,保护神经细胞的重要方式。人参皂苷Rg₁具有神经保护作用,在防治AD方面有广阔的应用前景,但人参皂苷Rg₁减轻Aβ造成神经损伤的机制尚未阐明。为探讨人参皂苷Rg₁通过影响自噬保护神经细胞的作用机制,该文利用Aβ_25-35诱导PC12细胞损伤模型,观察了人参皂苷Rg₁的保护作用及对细胞自噬的影响,运用自噬诱导剂雷帕霉素和自噬抑制剂氯喹验证Rg₁的神经保护作用与自噬的相关性。发现人参皂苷Rg₁能够增强Aβ损伤PC12细胞的活力,并提高线粒体膜电位,减轻Aβ引起的线粒体损伤,这种保护效果能被自噬抑制剂氯喹阻断;人参皂苷Rg₁还能增加LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白比例并促进p62蛋白消耗,同时增加PINK1及parkin蛋白,减少线粒体自噬接头蛋白OPTN的数量,表现出增强PC12细胞的自噬水平的作用。在运用PINK1 shRNA减低线粒体自噬调控位点PINK1的表达后,人参皂苷Rg₁不能再增加PINK1及其下游parkin的表达,并且不能显著影响线粒体自噬接头蛋白NDP52的数量,但其增强自噬的作用没有受到明显影响,仍能够显著增加LC3Ⅱ/Ⅰ比例,并且促进OPTN的消耗。该文研究表明人参皂苷Rg₁能促进Aβ损伤的PC12细胞的自噬水平,此外还可能通过促进PINK1介导的线粒体自噬,减轻线粒体受到的损伤,这可能是其改善Aβ造成的细胞损伤的作用机制之一。     

维生素D3受体mRNA在肝细胞增殖和肝癌发展中的作用

目的：探讨维生素D3受体mRNA在肝细胞增生和肝癌发展中的作用。方法：体外培养肝癌细胞株SMMC－7721和HCC－T细胞，培养时添加1000nmol/L、100nmol/L、10nmol/L 1，25-(OH)2D3作用1、3、6天后，用四唑盐比色试验（MTT）检测细胞的存活和生长；用反转录PCR（RT－PCR）检测维生素D3受体mRNA的表达。结果：1.25-(OH)2D3可以抑制维生素D3受体mRNA表达阳性的SMMC－7721细胞增生并且有剂量效应关系；对维生素D3受体mRNA表达阴性的HCC－T细胞没有抑制作用。9例肝癌组织标本维生素D3受体mRNA表达均为阳性。结论：1，25－（OH）2D3对于人肝癌细胞株SMMC－7721的增殖具有显著的抑制作用，其机械可能是通过维生素D3受体来实现的。     

A20基因缺失对弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征和预后的影响及相关分子机制研究

目的 检测弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中肿瘤坏死因子α诱导蛋白3基因(A20基因)缺失情况,探讨A20基因缺失对DLBCL临床过程及预后的影响及其与核因子-κB(NF-κB)通路活化的关系.方法 荧光原位杂交检测其A20基因缺失情况;免疫组织化学染色检测肿瘤中A20、Survivin、P65、Ki-67蛋白的表达,TUNEL技术检测肿瘤细胞凋亡水平,收集临床病理资料并随访,进行统计分析.结果 DLBCL病例A20基因缺失率为21.7％,活化后B细胞样型(ABC)-DLBCL的A20基因缺失率明显高于生发中心B细胞样型(GCB)-DLBCL(30.6％ vs.8.3％,P＜0.05),A20蛋白表达与A20基因缺失呈负相关(r=-0.259,P=0.023),P65蛋白和Survivin蛋白表达与A20基因缺失呈正相关(r=0.280、0.313,P=0.015、0.007);肿瘤细胞凋亡在A20基因缺失的DLBCL病例中较低,在A20蛋白表达阳性病例中明显高于表达阴性病例,在Survivin和P65蛋白阳性表达病例中明显低于阴性表达病例(P＜0.05),而在ABC-DLBCL和GCB-DLBCL病例间差异无统计学意义(P＞0.05);COX回归分析结果显示,年龄、A20基因的缺失、DLBCL类型和Ki67表达是DLBCL独立的生存相关因素;A20基因缺失者的生存状况明显较未缺失者差(P=0.015).结论 A20缺失可能影响A20蛋白表达,使其对NF-κB活化的负调节作用减弱,使Survivin表达上调而影响肿瘤细胞的增殖和凋亡;A20基因缺失对DLBCL的临床过程和预后有一定影响.     

大学生就业指导教学过程模式的初探

目前我国高校对大学生就业指导十分重视,进步也快.但就业指导的教学属于粗放型,没有形成一定的教学过程模式.本文对大学生就业指导教学过程属性、构建模式和模式的价值取向进行了探讨.