KPNA2表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞生长的影响

目的:通过分子克隆构建KPNA2过表达载体，探究其对骨肉瘤细胞143B生长的影响。方法:利用Trizol法提取Hela细胞总RNA，而后通过PCR反应扩增KPNA2基因，将扩增产物克隆至表达载体pcDNA3.1+构建KPNA2过表达质粒。通过qPCR实验和Western blot实验检测KPNA2过表达载体转染143B细胞后的表达效率。利用CCK-8、平板克隆形成实验检测143B细胞的增殖状况，利用流式细胞术检测143B细胞的周期分布。结果:qPCR实验和Western blot实验均表明KPNA2过表达质粒转染后，143B细胞内KPNA2表达水平显著上调。CCK-8、平板克隆形成实验结果证实KPNA2上调能够促进143B细胞增殖。流式细胞术结果表明过表达KPNA2能够加快143B细胞周期进程。结论:KPNA2能够促进骨肉瘤细胞系143B生长，为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供实验依据和理论基础。     

腹横肌平面阻滞联合舒芬太尼静脉自控镇痛在卵巢癌根治术后镇痛中的作用研究

目的探讨腹横肌平面阻滞(TAPB)联合舒芬太尼静脉自控镇痛(PCIA)在卵巢癌根治术后镇痛中的作用。方法随机将70例接受卵巢根治术的患者分为2组,各35例。对照组采用舒芬太尼2μg/kg+托烷司琼10 mg+0.9%氯化钠注射液稀释至100 mL实施PCIA。TAPB组缝皮结束后,于超声引导下行双侧TAPB,并联合PCIA。比较2组的镇痛效果。结果 TAPB组舒芬太尼的使用量、PCIA按压次数、镇痛补救率,以及术后苏醒时间、首次下床时间、住院时间和麻醉相关并发症发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。TAPB组术后各时间点的血浆IL-6浓度低于对照组,IL-10的浓度高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TAPB联合PCIA能有效提升卵巢癌根治术后的镇痛效果,降低患者的炎症反应及麻醉相关并发症的发生率,效果显著。     

多层螺旋CT诊断脾脏淋巴瘤14例分析

目的 探讨脾脏淋巴瘤的CT表现特征。方法 回顾性分析经病理证实的14例脾脏淋巴瘤的CT资料,探讨其影像表现特征。结果 13例继发,1例原发。弥漫粟粒型5例,增强扫描见脾脏弥漫或粟粒状低密度影;多发肿块型7例,表现为脾内多发结节状低密度灶,直径1.6~6.5 cm;单发肿块型2例,表现为脾脏内单发肿块,轻度强化,其中1例可见钙化及坏死。12例伴有脾外淋巴瘤。结论 脾脏淋巴瘤的CT表现具有一定特征性,腹腔内脾外病变的CT表现有助于诊断。     

假鼻疽伯克霍尔德菌致双髋慢性化脓性关节炎1例并文献回顾

58岁的老年男性患者,因"反复双髋疼痛20 d"入院。于当地医院多次行"双髋切开引流术"后转诊某院,于该院行分泌物、关节液培养结果示假鼻疽伯克霍尔德菌,先后采取抗菌药物治疗、换药、置管冲洗引流术等保守治疗均失败,复查双髋X线片示双髋关节已严重破坏,行双侧髋关节切除旷置与二期全髋关节置换术,同时予以敏感抗菌药物治疗。术后随访2年,关节功能恢复,未见感染复发。因此,在临床慢性化脓性关节炎治疗中,首先需要积极行细菌培养鉴定,选用敏感抗菌药物,其次需要严格把握手术适应证,针对骨与关节感染,应及时彻底清创灌洗引流,关节严重破坏或功能丧失者可行一二期关节置换。     

甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定

目的：从大容量甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma,MTC）人源噬菌体单链抗体（single chain variable fragments,scFv）库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法：分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性scFv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450 nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度svFv反应并读取A490 nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率。结果：5轮筛选后,抗体得到了明显富集。随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA 和scFv ELISA阳性率分别为65%和50%。SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 kD左右。ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度（0.41±0.12）较SW 480细胞组（0.20±0.03）、TEC细胞组（0.13±0.01）、PBS空白对照组（0.07±0.01）明显增加（P=0.000）。MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在scFv浓度为0.1、1、10 μmol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=0.006;t=7.324,P=0.000,且在scFv浓度为10 μmol /L时,对TT细胞的抑制率最高（0.59±0.15）％。结论：利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体。     

双侧延髓内侧梗死1例及文献复习

<正>1病例资料患者女,54岁,以"进行性四肢麻木无力、饮水呛咳3d"为主诉于2016-08-15入我院神经内科。患者3d前腹泻后出现全身酸痛,随之四肢麻木,远端为重,伴四肢无力,饮水呛咳、吞咽困难、颈部发硬、气短,至县医院住院治疗,查头颅CT未见明显异常,以"吉兰-巴雷综合征"为诊断,予以营养神经等对症治疗,患者自觉症状进行性加重,遂来我院。行磁共振示双侧延髓内侧急性梗死。既往高血压史8a,冠心     

Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞的提取与鉴别

背景：树突状细胞在未成熟阶段表现出极强的抗原吞噬功能，它可以在免疫耐受、癌症的免疫治疗等方面都表现出极大的优越性。但由于未成熟树突状细胞在生物体内含量极微，这就严重限制了它在临床、科研方面的应用。目的：提取鉴别Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞。方法：从Lewis大鼠骨髓中分离骨髓前体细胞，应用20 ng/m L粒细胞集落刺激因子、10 ng/m L白细胞介素4培养7 d诱导为未成熟树突状细胞，然后在未成熟树突状细胞中加入1μg/m L脂多糖继续培养2 d诱导为成熟树突状细胞。采用荧光倒置显微镜观察树突状细胞形态，流式细胞仪鉴定成熟和未成熟树突状细胞表面特异性分子，ELISA检测成熟和未成熟树突状细胞培养上清白细胞介素10、白细胞介素12和白细胞介素17A因子的分泌水平，混合淋巴细胞反应检测成熟和未成熟树突状细胞对T淋巴细胞的刺激反应。结果与结论：(1)普通荧光倒置显微镜下观察树突状细胞具有明显的突起结构；(2)流式细胞仪可见未成熟树突状细胞低表达CD40、CD86等共刺激分子；相反，成熟树突状细胞高表达上述共刺激分子；(3)未成熟树突状细胞的白细胞介素10、白细胞介素17A...     

大样本前瞻性研究共聚焦激光显微内镜对胃黏膜表浅性病变的诊断价值

普通内镜对胃黏膜表浅性肿瘤的诊断存在困难,往往发现病变后需要进行活组织病理检查最终获得诊断.共聚焦激光显微内镜(confocal laser endomicroscopy,CLE)是近年出现的新型内镜技术,主要包括探针式CLE (probe-based CLE,pCLE)和整合型CLE(integrated CLE,iCLE),可以在普通内镜检查的同时观察组织的显微结构,无需活检即可做出组织学诊断.本研究拟建立iCLE对胃黏膜浅表性病变的诊断标准,并评价iCLE的诊断价值.