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2.
目的 基于核酸试纸条技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因的方法。 方法 煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物并通过克隆转化鉴定PCR产物,建立并组装核酸试纸条,评价核酸试纸条的特异性、灵敏度和稳定性。 结果 蜡样芽胞杆菌DNA浓度为300 mg?L-1,纯度约为1.60。PCR产物阳性条带经切胶回收、克隆转化和测序比对,与GenBank数据库中已登记的entFM相似性为100%。在pH值7.0条件下,每100 μL 胶体金溶液加入3.3 μg链霉亲和素浓度标记,质控线浓度为1.8 g?L-1,检测线浓度为1 g?L-1时,硝酸纤维素膜上质控线与检测线均可与PCR产物反应出现清晰的红色条带。按照最适条件组装成核酸试纸条,PCR产物6 μL,样品展开液100 μL,检测10 min后可观察结果。核酸试纸条特异性与电泳结果一致,仅蜡样芽胞杆菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌和沙门氏菌皆无交叉反应,为阴性结果;灵敏度检测,核酸试纸条DNA质量浓度同时降至10-3 mg?L-1仍可准确检测,普通PCR电泳结果显示DNA质量浓度同时降至10-1 mg?L-1出现目的条带,核酸试纸条比普通PCR灵敏度提高100倍;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测稳定性一致。 结论 建立的核酸试纸条检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因灵敏度高、特异性强且具有良好稳定性,适用于快速鉴别蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因。 相似文献
3.
4.
目目的的:观察电针耳迷走神经对断奶前母本隔离(PMS)小鼠焦虑、抑郁样行为的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选择3只成年C57BL/6雄鼠与9只成年C57BL/6雌鼠按1雄3雌随机合笼,待雌鼠受孕后采用随机数字表法分为对照组和母本隔离组。在造模成功后,母本隔离组子代采用随机数字表法分为模型组和电针组,每组10只。电针组麻醉后进行电针干预,穴位选择双侧耳甲区,连续波,频率为2 Hz,强度为1 mA,1次/d,10 min/次,6 d/疗程,共干预2个疗程。对照组、模型组参照电针组进行麻醉束缚,但不进行电针干预。干预完成后,分别采用旷场测试、高架十字迷宫测试和悬尾测试对3组小鼠进行行为学检测;采用免疫荧光方法检测小鼠前额叶皮层(PFC)、中缝背核(DRN)脑区原癌基因蛋白(c-fos)表达水平和DRN脑区5-羟色胺(5-HT)神经元数量。结果:(1)行为学指标:与对照组比较,模型组总移动距离、中心区域时间百分比、开臂花费时间、开臂总移动距离、进入开臂次数均明显降低,悬尾静止时间明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,电针组总移动距离、中心区域时间百分比、开臂花费时间、开臂总移动距离、进入开臂次数均明显增加,悬尾静止时间明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)c-fos表达水平和5-HT神经元数量:与对照组比较,模型组DRN、PFC脑区c-fos神经元数量均明显降低,模型组DRN脑区5-HT神经元数量明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,电针组DRN、PFC脑区c-fos神经元数量均明显更高,电针组DRN脑区5-HT神经元数量明显更高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:电针耳迷走神经可改善PMS小鼠焦虑、抑郁样行为,其具体机制可能与调节DRN、PFC脑区c-fos表达和DRN脑区5-HT神经元数量有关。 相似文献
5.
6.
目的研究独活凝胶贴膏穴位贴敷治疗类风湿关节炎(RA)模型家兔的药物代谢动力学(PK)与药物效应动力学(PD)。方法取10只健康新西兰雌性家兔,2只作为正常对照组;其余8只家兔肩胛区注射卵清蛋白佐剂构建RA模型,随机分为模型组(空白凝胶贴膏)和穴位给药组(独活凝胶贴膏),各4只。采用微透析取样技术对模型家兔的关节腔液取样,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定关节腔液中独活有效成分二氢欧山芹醇当归酸酯和蛇床子素的含量,并建立PK参数;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,并计算抑制率,作为PD指标;采用WinNonlin ExamplesGuide 5.2.1软件拟合PK-PD模型。结果穴位给药组家兔关节腔液中蛇床子素一级吸收速率常数(k01)为0.22 h-1,一级消除速率常数(k10)为0.10 h-1,0~14 h的血药浓度-时间曲线下面积(AUC_(0~14 h))为6584.18(ng?h)/mL,吸收相半衰期(k01_LH)为2.54 h,消除相半衰期(k10_LH)为5.89 h,达峰时间(tmax)为5.70 h,达峰浓度(Cmax)为454.31 ng/mL;关节腔液中二氢欧山芹醇当归酸酯k01为0.20 h-1,k10为0.12 h-1,AUC_(0~14 h)为2185.67(ng?h)/mL,k01_HL为2.69 h,k10_HL为5.94 h,tmax为6.52 h,Cmax为150.53 ng/mL。穴位给药组家兔血清中IL-1β和TNF-α水平建立的抑制百分数(EIR)与药效中效应室浓度(Ce)的PK-PD模型方程分别为EIR=91.72Ce/598.35+Ce,EIR=95.72 Ce/568.08+Ce。结论蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯在RA模型家兔体内的PK行为与药效紧密联系,独活凝胶贴膏经穴位给药可达到预期疗效。 相似文献
7.
目的对来源于西沙群岛的海绵(Agelas sp.)共附生微生物Aspergillus alabamensis(18-xs-01-zp-3)进行菌种鉴定及次级代谢产物的研究。方法通过分子生物学方法鉴定菌株种属;综合运用硅胶柱层析、薄层色谱和半制备高效液相色谱(HPLC)等色谱学方法对次级代谢产物进行分离纯化,通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱学方法并结合文献对所得化合物进行结构鉴定。结果从中分离得到7个单体化合物,分别是ardeemin型生物碱3个:5-N-acetyl-15bβ-hydroxyardeemin(1)、5-N-acetylardeemin(2)、5-N-acetyl-15b-didehydroardeemin(3);二酮哌嗪生物碱2个:3-benzylidene-3,4-dihydro-4-methyl-lH-l,4-benzodiazepine-2,5-dione(4)、benzodiazepinedione(5);吲哚类生物碱2个:luteoride E(6)、14-hydroxyterezine D(7)。结论从该菌株共分离得到7个生物碱类化合物,化合物1对H69AR具有抗肿瘤活性,化合物4为首次从曲霉属真菌中分离得到。 相似文献
8.
肝细胞癌相关蛋白1(HCRP-1)被认为是一种抑癌基因,是人ESCRT-I复合体中的一个重要组成亚基,又被称作为hVps37A。ESCRT 1复合体主要参与人体内很多受体的降解过程。HCRP-1在ESCRT-I复合体的受体胞吞、下调作用以及调节增殖过程中起重要作用,从分子水平参与和调控了肿瘤细胞的发生发展。多项临床研究表明,HCRP-1在多种癌组织标本中低表达或者缺失表达。HCRP-1的存在与否和放疗、化疗、免疫治疗的疗效有明显关系。HCRP-1的表达量与多种肿瘤患者的预后显著相关。HCRP-1在泌尿系常见肿瘤(肾癌、前列腺癌)的发生发展中也起到重要作用。本文就HCRP-1在泌尿系肿瘤中的研究进展作一综述。 相似文献
9.
目的应用原位缝合及原位缝合联合单束重建技术治疗前交叉韧带(ACL)损伤,并研究短期随访的临床结果。 方法选择2016年1月至2018年6月福建医科大学附属第一医院ACL损伤患者作为观察组。纳入标准:确诊为前交叉韧带股骨端损伤的男性患者;排除标准:多发韧带损伤或受伤时间大于3月的患者。根据Sherman分型分为两个亚组并选择不同手术方式,Sherman-Ⅰ型亚组选择原位缝合(原位缝合组),Sherman-Ⅱ/Ⅲ型选择原位缝合联合单束重建(联合重建组)。选择2015年1月至12月在同单位行ACL重建手术(单束重建)的患者数据作为对照组,同样根据Sherman分型分为Sherman-Ⅰ型亚组和Sherman-Ⅱ/Ⅲ型亚组。原位缝合及原位缝合联合单束重建患者进行1年临床随访。观测指标包括:膝关节评分(IKDC);信噪比(SNQ);Opti Knee三维膝关节运动测试;Lachman试验,前抽屉试验及轴移试验,GNRB膝关节稳定度测量仪检测关节稳定度。结果进行亚组间比较。连续性变量使用t检验,计数变量使用卡方检验。 结果原位缝合及原位缝合联合单束重建17例患者获得随访,韧带重建对照组回顾性资料共获得28例完整数据。其中Sherman-Ⅰ型共19例,8例行原位缝合,11例为ACL重建(对照); Sherman-Ⅱ/Ⅲ型共26例,9例为联合重建组,17例为ACL重建(对照)。在IKDC评分,GNRB膝关节稳定度测试,Lachman试验,前抽屉试验及轴移试验等方面,各组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后MRI提示原位缝合组的SNQ值(9.8±3.2)高于联合重建组(6.4±1.9)(t=2.6,P<0.05)。Opti Knee三维运动测试显示原位缝合组无论步行还是慢跑状态下,外旋角度均较健侧减小[步行状态健侧(22.3±1.2)°,患侧(15.0°±2.0)°,(t=3.2,P<0.05);慢跑状态健侧(23.0±1.3)°,患侧(14.1±1.8)°,(t=4.0,P<0.05)]。股骨近端位移均较健侧减少[步行状态健侧(1.2±0.2) mm,患侧(0.5±0.1)mm,(t=2.9,P<0.05);慢跑状态健侧(1.1±0.3)mm,患侧(0.5±0.2)mm,(t=3.1,P<0.05)]。而联合重建组无论是步行还是慢跑状态下健侧与术侧在各个方向的位移无明显差异。 结论Sherman-Ⅰ型急性ACL损伤进行单纯原位缝合可以获得相当于韧带重建的临床疗效,针对Sherman-Ⅱ、Ⅲ型损伤,原位缝合联合单束重建术后1年的运动学评估可以完全恢复到健侧相同水平。 相似文献
10.