阿米卡星与利福霉素钠注射液联合作为经验性治疗院外细菌性肺部感染首选方案的临床研究

目的　观察阿米卡星与利福霉素钠联合治疗院外细菌性肺部感染的疗效。方法　经临床确诊并有细菌性感染征象的院外肺部感染 3 0 0例 ,分为 3组 :治疗组 12 0例 ,予阿米卡星与利福霉素钠静脉滴注 ,每天 1次 ;对照 1组 80例 ,予青霉素与左氧氟沙星联合静脉滴注 ,每日 1次 ;对照 2组 10 0例 ,予青霉素与氨苄西林联合静脉滴注 ,每日 1次。观察有效率、显效所需时间及细菌清除率。结果　有效率治疗组为 98.3 3 % ,与对照 1组的88 75 %和对照 2组的 70 .0 0 %比较差异显著 (P均 <0 .0 1) ;显效时间治疗组为 (4.5± 2 .0 )天 ,对照 1组为 (6.5±3 .0 )天 ,对照 2组为 (8.0± 3 .0 )天 ,治疗组与后 2组相比差异显著 (P <0 .0 1) ;细菌清除率治疗组为 97.2 % ,对照 1组为 80 .0 % ,对照 2组为 72 .0 % ,治疗组与后 2组比较差异显著 (P <0 .0 1)。各组副作用均较小。结论　阿米卡星与利福霉素钠治疗院外细菌性肺部感染疗效好、疗程短、细菌清除率高、副作用小 ,可作为治疗院外细菌性肺部感染的首选经验方案     

支气管哮喘小鼠肺组织T-bet mRNA与Muc5ac蛋白的表达

目的 探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织T-bet mRNA与黏蛋白基因Muc5ac蛋白的表达及两者的相关性.方法 制作小鼠哮喘模型,应用RT-PCR法测定哮喘组及对照组肺组织T-bet mRNA的表达,分别用免疫组织化学法和阿辛蓝过碘酸雪夫染色法测定两组气道Muc5ac蛋白和黏蛋白的表达.结果 哮喘组小鼠肺组织T-bet mRNA的表达较止常组明显减低[(0.954±0.07)vs.(0.48±0.10),(P＜0.01)].哮喘组小鼠气道黏蛋白基因Muc5ac蛋门的表达较对照组明显增高[(43.24±5.82)VS.(89.12±5.56),(P＜0.01)].哮喘组小鼠肺组织T-bet mRNA与气道Muc5ac蛋白呈线性负相关(P＜0.05).结论 哮喘小鼠肺组织T-bet mRNA表达减少是可能促进了气道Muc5ac蛋白的表达.从而促进了气道黏液过度分泌.     

瘦素促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞的转分化

目的探讨瘦素对肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化的影响及其作用机制。方法体外培养HFL-1人胚肺成纤维细胞,用(0~200)ng/m L重组人瘦素(r HL)干预或联合转化生长因子β1(TGF-β1)处理HFL-1细胞,Western blot法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)的表达。CCK-8法测定细胞增殖,ELISA测定细胞上清液1型胶原蛋白含量。结果 (50、100、200)ng/m L的r HL处理HFL-1细胞48 h,α-SMA的蛋白表达水平均较对照组明显上调;与200 ng/m L r HL或5 ng/m L TGF-β1单独处理的细胞相比,200 ng/m L r HL和5 ng/m L TGF-β1联合处理HFL-1细胞48 h,HFL-1细胞α-SMA蛋白表达水平显著上调。r HL能够上调HFL-1细胞p-AKT的表达,LY294002可抑制r HL对HFL-1细胞α-SMA表达的诱导作用。与对照组相比,(12.5、25、50、100、200)ng/m L作用72 h,细胞存活率无显著性差异。(50~200)ng/m L r HL作用48 h,细胞上清液中1型胶原蛋白含量明显升高。结论瘦素能够促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路有关。     

瘦素促进低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞增殖及HIF-1α、NF-κB表达

目的研究瘦素对低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法分常氧、低氧2种状态体外培养大鼠ASMC,按随机数字表法将低氧组细胞分为低氧组、50μg/L瘦素联合低氧组(L50组)、100μg/L瘦素联合低氧组(L100组)、200μg/L瘦素联合低氧组(L200组)、200μg/L瘦素联合低氧和瘦素受体抗体组(ob-R抗体组)。各组均孵育24 h,CCK-8法检测细胞增殖率,反转录PCR检测HIF-1α、NF-κB的mRNA的表达,Western blot法检测HIF-1α、NF-κB的蛋白表达。结果与常氧组相比,各低氧组细胞增殖活性明显增强;与低氧组相比,L50、L100、L200组细胞增殖活性增强,并与浓度呈正相关(r=0.992);与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组细胞增殖明显降低。与常氧组相比,各低氧组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加;与低氧组相比,L50、L100、L200组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加,并与浓度呈正相关;与L50、L100、L200组相比,ob-R抗体组HIF-1α、NF-κB的mRNA及蛋白表达降低。结论瘦素能促进低氧状态下ASMC增殖,并且能够促进HIF-1α、NF-κB的表达。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-17、IL-23水平变化及意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清IL-17、IL-23水平变化,并探讨二者在COPD发病中的作用。方法 COPD急性加重期住院患者80例(急性期组),缓解期患者40例(缓解期组),另选同期健康体检者40例做对照(对照组)。采用ELISA法检测各组血清IL-17、IL-23,并测定三组外周血中性粒细胞百分比(NE%)、C-反应蛋白(CRP)水平及肺功能第一秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)。结果急性期组血清IL-17、IL-23水平分别为(61.68±17.37)、(1 265.74±266.70)ng/L,缓解期组分别为(43.20±11.47)、(646.58±106.03)ng/L,对照组分别为(32.40±4.26)、(492.34±50.08)ng/L,三组相比,P均<0.05。急性期组NE%、CRP高于缓解期组及对照组,FEV1%急性期组<缓解期组<对照组(P均<0.05)。急性期组、缓解期组COPD患者血清IL-17与IL-23水平呈正相关(r=0.688、0.399,P均<0.05),且这两个因子与NE%、CRP均呈正相关,与FEV1%呈负相关(r分别为0.382、0.625、-0.584和0.355、0.313、-0.345,P均<0.05)。结论 COPD患者血清IL-17、IL-23水平升高,二者可能与COPD的发病及疾病严重程度有关。     

瘦素对肥胖哮喘大鼠气道平滑肌细胞干扰素调节因子1表达的影响

目的观察体外培养肥胖哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)表达瘦素受体(OB-R)及干扰素调节因子1(IRF-1)情况,及给予瘦素干预后IRF-1的变化。方法 60只雄性SD大鼠随机分为4组,即正常体质量对照组(A组)、正常体质量哮喘组(B组)、肥胖对照组(C组)、肥胖哮喘组(D组),肥胖及哮喘模型建立后取各组大鼠气道,体外培养ASMC,逆转录酶PCR(RT-PCR)测各组OB-R mRNA的表达,然后分别用生理盐水(NS)和瘦素干预A、B、C、D组细胞48 h,Western blot法检测各组IRF-1蛋白表达。结果 RT-PCR电泳结果示在500 bp处有明显条带,其大小与OB-R目的基因片段大小相符,说明AMSC上有OB-R表达。Western blot检测显示,细胞IRF-1蛋白表达量在NS干预的情况下,B、C组均较A组细胞IRF-1蛋白表达量增加(P<0.05),但均比D组减弱(P<0.05),而B、C两组蛋白表达量之间无明显差异(P>0.05)。在瘦素干预的情况下,各组细胞IRF-1蛋白表达量均分别较相应的NS干预组的蛋白表达量增加(P<0.01),且B、C组细胞GRβ蛋白表达量均较A组增加(P<0.05),较D组减弱(P<0.05),而B、C组蛋白表达量之间仍无明显差异(P>0.05)。结论瘦素通过OB-R促进IRF-1在肥胖哮喘大鼠ASMC中的表达可能是导致肥胖哮喘发生激素抵抗的重要原因。     

地塞米松抑制哮喘小鼠肺RANTES的表达

目的 研究地塞米松对哮喘小鼠调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(RANTES)蛋白和mRNA表达的影响.方法 将30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组(每组10只):对照组、哮喘组、激素干预组,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),行白细胞和嗜酸粒细胞(EOS)计数;酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF和血清中RANTES含量;肺组织切片HE染色,光镜下计数细胞总数和EOS百分比;部分行免疫组化染色检测肺组织RANTES蛋白;用原位杂交法检测肺组织RANTES mRNA表达.结果 哮喘组白细胞总数、EOS百分比、RANTES浓度明显升高(P＜0.01),干预组明显低于哮喘组(P＜0.01);哮喘组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著高于对照组(P＜0.01),主要表达于上皮细胞;干预组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著低于哮喘组(P＜0.01).结论 地塞米松可抑制RANTES表达和活性而发挥抗EOS炎症作用,这可能是其控制哮喘发病的重要机制之一.     

阿奇霉素抑制大鼠气道平滑肌增殖及PI3K的表达

目的 观察不同浓度阿奇霉素对于体外培养大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的增殖以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的影响,探讨大环内酯类药物抑制气道平滑肌增殖的途径.方法 将ASMC传代培养,取第4代细胞加入各种浓度的阿奇霉素刺激48 h,CCK-8法检测光密度(OD)值,计算ASMC的抑制率,免疫印记(Western-bl0t)法检测PI3K的蛋白含量.结果 3×10-6mol/L、6×10-6mol/L以及1×10-5mol/L阿奇霉素组细胞的OD值较正常对照组降低,PI3K蛋白表达减少,差异有显著性(P＜0.05),PI3K的表达与气道平滑肌细胞的抑制率呈线性负相关(P＜0.05).结论 阿奇霉素能够减少PI3K的表达,抑制大鼠气道平滑肌的增殖.