基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立

目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。     

乳腺癌国际指南与中国临床实践

<正>随着乳腺癌相关研究的深入以及基因检测技术在临床应用水平的发展,肿瘤综合诊治理念已经在把握宏观肿瘤负荷,细化解剖学分期的基础上进步到分析微观肿瘤负荷,确定肿瘤生物学特性,研发靶向治疗药物的新阶段。尤其是近半个世纪以来,在世界范围内有关乳腺癌诊治相关的临床实践指南不断更新,推动了乳腺癌临床诊治进程从经验医学和群体治疗到分子病理诊断和分类治疗的巨大飞跃。2017年,中国抗癌协会临床肿瘤学协作中心(CSCO)乳腺癌专业委员会参照国际最新专业数据     

医疗机构灾害识别存在的问题及建议

分析医疗机构在灾害识别过程中存在的问题，并据此提出相应改进建议。检索国内外期刊网站及文献数据库中关于医疗机构灾害识别的相关研究资料，采用文献分析法明确医疗机构灾害脆弱性、灾害事件和灾害识别等相关概念，并以此来分析医疗机构在灾害识别中存在的问题，并提出改进建议。结果发现，由于医疗机构在灾害识别过程中对灾害脆弱性分析的认识不够，导致医疗机构在灾害识别过程中存在明显不足，主要包括对灾害事件的识别不够全面、收集的部分灾害事件不符合自身实际，从而难以识别灾难事件。因此，卫生行政部门应加强对医疗机构灾害事件的相关知识宣教，同时各医疗机构应完善灾害事件的分类框架、建立医疗机构灾害事件库，并邀请多学科专家参与灾害事件识别过程，从而高效防控。     

唇腭裂术后牙颌畸形的早期防治

采用活动矫正器对完全性唇腭裂修复术后10例患儿进行牙颌畸形的早期预防和矫治。用扩大簧、改良唇挡、上颌前牵引装置等不同设计的矫正器矫治不同牙颌畸形。矫治结果:保持了患者上、下牙弓宽度的协调关系;上牙弓、牙槽及颌骨宽度均有不同程度增长;上颌及上牙弓前移,上前牙前倾,反(牙合)改正,面中份凹陷明显改善。提出了唇腭裂术后牙颌畸形早期矫治的注意事项。     

不同胰岛素抵抗水平的多囊卵巢综合征患者体外受精-胚胎移植临床结果的分析

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)时,其胰岛素抵抗水平与临床结果的关系。方法选择PCOS患者60例为实验组,月经周期规则的输卵管性不孕患者50例为对照组。PCOS组内,以稳态模型评价指数(HOMA-IR)的中位数(3.37)为标准,将PCOS患者分为高HOMA-IR组(30例)和低HOMA-IR组(30例)。三组患者均采用口服避孕药(OC)处理后的黄体期长方案进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET),比较各组间体重指数、基础窦卵泡数、基础性激素水平、Gn的用量、获卵率、受精率、优质胚胎率、着床率、妊娠率、流产率及继续妊娠率与胰岛素抵抗水平的关系。结果三组患者获卵率、优质胚胎率、着床率和妊娠率差异均无统计学意义(P0.05)。PCOS组基础窦状卵泡数、获卵数多于对照组、Gn的用量少于对照组,受精率和继续妊娠率低于对照组,流产率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。高HOMA-IR组基础窦状卵泡数多于低HOMA-IR组、Gn的用量少于低HOMA-IR组,受精率低于低HOMA-IR组,流产率高于低HOMA-IR组,继续妊娠率低于低HOMA-IR组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论胰岛素抵抗水平是PCOS患者进行IVF-ET后妊娠结局产生的重要因素。     

自拟健脾渗湿安胎汤治疗羊水过多20例

羊水过多中医称为“子满”。现代医学对羊水过多的治疗,无特殊治疗方法,严重者穿刺放水、休息、酌用镇静剂,但有引起感染、诱发早产的弊端,患者不易接受。本人在临床,自拟健脾渗湿安胎汤治疗数例,近2年,总结20例病人,效果显著。现简介如下:1一般资料20例均为2003￣2005年的门诊患者。B超提示:羊水过多,深度超过7cm以上,无畸形。孕妇子宫过度膨胀,胸膈满闷,呼吸迫促,不能平卧,下肢及阴部浮肿,舌淡胖,苔白腻,脉沉滑无力。恐惧穿刺放水,要求中药治疗。2治疗方法基本组成:白茯苓15g、苡米仁15g、白茅根15g、西党参15g、白术12g、淮山30g、桑寄…     

游戏在脑性瘫痪康复训练中的作用

根据小儿对游戏的喜好和脑性瘫痪(简称脑瘫)患儿肢体、智力、语言、行为及心理障碍的特点，编制了—套音乐儿歌游戏。将游戏应用于脑瘫患儿的训练中，以探讨游戏在脑瘫患儿康复训练中的作用。     

金牛咽炎胶囊处方中的药材提取工艺的考察

目的:优选金牛咽炎胶囊的提取工艺.方法:以浸膏率、绿原酸转移率为综合指标,采用L9(34)正交试验,以乙醇体积分数、加醇量、提取时间、提取次数为考察因素.对提取工艺条件进行优选.结果:最佳提取工艺条件为70％乙醇8倍量,回流提取3次,每次1h.结论:优选的提取工艺条件稳定可行.