新型结核疫苗的研究进展

结核病(TB)仍然是世界上最致命的传染病之一,其发病率持续增高。如何对结核病进行有效的预防成了现在面临的主要问题。而目前广泛使用的卡介苗(BCG)疫苗仅对结核病提供有限的保护,特别是对成人型结核病起作用与否存有较大争议,因此新型的结核疫苗便成为抗结核的有利举措。本文把15个处于临床实验阶段的新型候选疫苗,按照免疫策略将其分为代替卡介苗的初选疫苗,BCG初免后的增强疫苗和预防感染者发病的治疗性疫苗加以综述,以期为防治结核病提供参考。     

血管内皮细胞在DHF／DSS中对凝血和纤溶系统的异常调控

登革热病毒(Dengue virus,DV)感染可以引起登革热(Dengue fever,DF)、登革出血热(Denguehaemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合症(Dengue shock syndrome,DSS)等多种疾病。出血和血管渗漏与DV感染密切相关,当出现血容量减少性休克时,如果不及时治疗可导致死亡。然而由DV感染所致的出血机制目前仍不清楚,不少学者提出了多种学说如抗体依赖的感染增强作用(anti-body dependent enhancement,ADE)等[1],但均不足以解释临床上DHF/DSS中最突出的特征—血管渗漏、出血[2]。由于内皮细胞在调控凝血和纤溶系统平衡方面起关键性作用,近年…     

结核分支杆菌LprG基因的克隆、表达及纯化

目的 在大肠杆菌中重组表达MTB LprG基因,纯化回收,为进一步研究其在结核病诊断中的价值奠定基础.方法 从MTB H37Pv基因组中PCR扩增出MTB LprG基因,克隆到pEASY T1载体中,经序列测定后,再亚克隆到表达载体pET28a( )中,转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,Western-blot分析鉴定,采用Ni-NTA柱纯代LprG蛋白.结果 扩增产物序列无突变,重组表达载体pET28a( )-LprG酶切鉴定正确,LprG蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达量约占菌体总蛋白的38%左右,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析在27 kDa处见到目的蛋白条带,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度较高的该蛋白.结论 构建了LprG基因的重组表达载体,获得了纯化的蛋白,为以后研究奠定了基础.     

淋病奈瑟氏菌的β-内酰胺酶测定和药敏实验分析

对从临床分离出的４００份淋球菌菌株进行β－内酰胺酶（β－ｌａｅｓ）测定和药敏实验，发现β－ｌａｓｅ阳性率高达６４．５％；β－ｌａｓｅ阳性比β－ｌａｓｅ阴性菌株对不同种类的抗生素的耐药率明显偏高；且β－ｌａｓｅ阳性菌株所占比率有逐年升高趋势，同时发现一些新的耐药株。提示对淋病患者进行细菌培养、药敏实验和β－ｌａｓｅ的检测应作为临床一项常规工作。     

野生型PTEN诱导卵巢癌SKOV3细胞生物特性改变

 【目的】 探索野生型PTEN基因对卵巢癌细胞生物学特性的影响?【方法】 将野生型PTEN基因克隆到pAdxsi腺病毒载体并感染SKOV3细胞?荧光镜下检测腺病毒载体对SKOV3细胞的感染效率;用CCK-8法检测细胞增殖的抑制效率;RT-PCR与WB分别检测PTEN mRNA与蛋白表达水平变化;免疫化学法与间接荧光法检测PTEN在细胞内的定位及细胞内NEDD4-1和RAD51等分子表达? 【结果】 稳定转染PTEN后,24 h内PTEN分布于细胞质与核内,而72 h后则主要集中于细胞核内;显著增加细胞质内NEDD4-1和细核RAD51等分子表达? 【结论】 野生型PTEN可影响SKOV3细胞增殖,并诱导细胞表达RAD51与NEDD4-1分子,有利于细胞DNA修复与细胞增殖抑制     

pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B重组质粒的表达与鉴定

目的 应用分子克隆技术获得纳米级Ag85B蛋白并对其进行鉴定和免疫学特性检测.方法 利用S-layer/Streptag I这一具有自我组装能力的纳米模式嵌合结核杆菌分泌的Ag85B蛋白基因,将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,并在大肠杆菌中表达Ag85B蛋白,表达后的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果 原核表达重组质粒pET28a-Streptag I-SbpA-Ag85B成功构建,并可在大肠杆菌中诱导表达,得到的Streptag I-Sbpa-Ag85B蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确,重组蛋白能被结核患者血清识别.结论 重组后的Ag85B蛋白具有较强的免疫反应性.所建立的原核表达体系为新型结核疫苗研制提供了一个新的思路.     

乙肝五项测定结果与HBV DNA的关系及其临床意义

目的探讨乙型肝炎(乙肝)五项结果和HBV DNA检出情况间的关系和临床意义。方法运用聚合酶链反应法检测300例乙肝血清的HBV DNA,并用酶联免疫吸附实验法进行乙肝五项的测定,对结果进行比较分析。结果 300例乙肝门诊的患者中乙肝五项的结果为110例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)(大三阳),其HBV DNA的阳性率为99.1%,85例HBsAg(+)、HBe-Ab(+)、HBcAb(+)(小三阳),其HBV DNA的阳性率为69.4%,39例HBsAg(+)、HBcAb(+),其HBV DNA的阳性率为53.8%,53例HBeAb(+)、HBcAb(+),其HBV DNA的阳性率为35.8%。大三阳和小三阳的HBV DNA阳性率比较差异有统计学意义(χ2=35.406,P<0.05)。结论乙肝五项的结果与HBV DNA的结果有着密切的联系,并且都具备各自的临床意义,因此两者必须结合才能正确地对乙肝患者的病情作出正确分析和判断。     

血液透析患者动静脉内瘘侧与对侧腋下体温测量的对比观察

目的：探讨慢性肾功能衰竭患者尿毒症期血液透析前动静脉内瘘（上臂）侧与对侧腋下体温的差异。方法：对165例慢性肾功能衰竭尿毒症期需血液透析的患者采用自身对照的方法，同时正确测量动静脉内瘘侧与对侧腋下体温并加以对比。结果：动静脉内瘘侧腋下体温明显高于对侧，具有统计学意义（P〈0．05）。结论：慢性肾功能衰竭患者尿毒症期有动静脉内瘘者测量体温时应避免测量瘘侧腋下体温，应以非瘘侧腋下体温值为准。     

安徽省学生隐孢子虫感染特征的研究

目的 调查安徽省学生隐孢子虫感染情况、流行特点及主要临床表现，为在学生中防治隐孢子虫病的感染提供依据。方法采集安徽省各地市不同教育层次学生粪便标本共4048份，采用金胺-酚染色法和改良抗酸染色法检查隐孢子虫卵囊。结果隐孢子虫感染率为1．33％（54／4048）。幼儿、小学生、中学生和大学生隐孢子虫的感染率分别为3．15％（28／889）、0．82％（9／1098）、0．82％（9／1092）和0．83％（8／969），幼儿与其他学生相比均有显著性差异（P〈0．01）。男生与女生隐孢子虫的感染率分别为1．49％（28／1880）和1．20％（26／2168），差异无显著性（P〉0．05）。城、乡学生隐孢子虫检出率分别为0．75％（13／1740）和1．78％（41／2308），差异有显著性（P〈0．01）。隐孢子虫感染以亚临床感染为主，主要临床表现为间断性轻度腹痛、轻度腹泻、稀便。结论安徽省学生隐孢子虫感染以幼儿多见，农村较城市多见；隐孢子虫病缺乏特异的临床表现，亚临床感染是其主要表现形式，易误诊和漏诊。     

细菌内毒素暴露对儿童特应性致敏的影响

[目的]了解居室内毒素含量对儿童特应性致敏的影响。[方法]向安庆、淮南地区2986名8或12岁在学儿童父母发放哮喘标准调查表,动态浊度法检测儿童床铺尘内毒素含量,RAST-FEIA（放射性变应原荧光酶免疫吸附实验）检测其血清中特异性IgE（sIgE）含量。[结果]最终具有完整资料为904人,居室内内毒素含量与特应性致敏呈负相关（OR=0.65,P﹤0.05）。[结论]居室内毒素的高水平暴露可能是预防儿童特应性致敏产生的重要保护因素之一。