蟾毒灵对肝细胞生长因子诱导阿法替尼耐药的逆转作用

目的：探讨蟾毒灵对肝细胞生长因子（ HGF）诱导的阿法替尼耐药肺癌细胞H1975生长的影响,并分析其可能的作用机制。方法采用外源性HGF和重组HGF腺病毒转染内源性HGF诱导的方法建立阿法替尼耐药的肺癌细胞H1975,应用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测蟾毒灵、阿法替尼及联合用药对阿法替尼耐药细胞H1975增殖的抑制作用,Transwell实验检测药物对阿法替尼耐药细胞H1975侵袭能力的影响,酶联免疫吸附试验（ ELISA）法检测转染后H1975细胞分泌的HGF水平以及药物对HGF分泌水平的影响,Western blot检测药物干预后EGFR、cMet信号通路及上皮细胞?间质转化（ EMT）相关蛋白的表达。结果 MTT结果显示,在外源性和内源性HGF刺激下,阿法替尼对H1975细胞生长无抑制作用,经蟾毒灵与阿法替尼联合处理后,可明显抑制肿瘤细胞的生长。Transwell实验结果显示,在外源性HGF作用下,阿法替尼组的穿膜细胞数为（118．92±37．29）个;蟾毒灵组的穿膜细胞数为（88．84±19．53）个;阿法替尼与蟾毒灵联合组的穿膜细胞数为（48．98±11．43）个,与阿法替尼组和蟾毒灵组比较,差异均有统计学意义（均P＜0．05）。 ELISA结果显示,H1975／HGF细胞（转染重组HGF腺病毒的H1975细胞）分泌高水平的HGF,蟾毒灵和阿法替尼干预后,H1975／HGF细胞分泌HGF水平差异无统计学意义（P＞0．05）。 Western blot结果显示,蟾毒灵联合阿法替尼能明显下调阿法替尼耐药细胞中 p?EGFR、p?cMet、p?AKT、p?ERK、vimentin 和 snail 蛋白的表达,上调E?cadherin蛋白的表达。结论蟾毒灵联合阿法替尼可显著抑制阿法替尼耐药细胞H1975的增殖,阻止H1975肺癌细胞侵袭;蟾毒灵逆转 HGF 诱导的 H1975肺癌细胞对阿法替尼耐药,可能与阻断cMet／PI3K／AKT、cMet／MAPK／ERK信号通路以及阻止EMT进程有关。     

青蒿素诱导非小细胞肺癌细胞凋亡及其可能的机制

目的：研究青蒿素（Artemisinin）对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer cell,NSCLC）细胞（ASTC-a-1和A549细胞）凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法：CCK-8法检测0~150 μg/ml的青蒿素处理24 h和100 μg/ml青蒿素处理0、6、12、24、48 h对ASTC-a-1和A549细胞活性的影响;激光共聚焦显微镜观察1 μmol/L STS、100 μg/ml青蒿素单独或联合5 mmol/L 活性氧簇（reactive oxygen species,ROS)清除剂NAC（N-乙酰半胱氨酸）处理细胞24 h对细胞核形态的影响,并用流式细胞术检测青蒿素单独或联合NAC对细胞凋亡的影响;通过RNA干扰技术沉默Bax和Bak基因后,观察青蒿素对细胞活性的影响。结果：青蒿素能够以浓度和时间依赖的方式抑制ASTC-a-1和A549细胞的活性,IC50值约为100 μg/ml;经NAC预处理后,青蒿素导致的细胞活性下降程度明显低于未经预处理的细胞,差异有统计学意义（均P<0.01）。STS、青蒿素单独或联合NAC均能引起ASTC-a-1和A549细胞核固缩及细胞凋亡。经NAC预处理后,青蒿素诱导的ASTC-a-1和A549细胞凋亡率分别为（20.4±2.1）%和（17.9±3.8）%,明显低于STS组\[（48.2±2.6）%,（39.8±4.9）%\]和细胞未经预处理组\[（59.6±3.4）%,（50.7±3.8）%\]青蒿素引起的凋亡率（均P<0.01）。青蒿素只能引起Bak沉默细胞活性的上升（P<0.01）,而对Bax沉默细胞活性没有明显影响（P>0.05）。结论：青蒿素能诱导两种非小细胞肺癌细胞（ASTC-a-1和A549细胞）ROS介导的细胞凋亡,促凋亡因子Bak而不是Bax参与了凋亡过程。     

肺癌患者并发肺部感染的病原菌谱及耐药基因检测

目的 了解肺癌患者合并肺部感染的病原菌谱及主要病原菌的耐药基因,以指导临床合理应用抗菌药物.方法 对220例肺癌并发肺部感染患者进行痰培养,其中100例培养阳性,对培养阳性的细菌进行鉴定;应用纸片扩散法对主要细菌进行药敏试验,并应用PCR法检测主要细菌的耐药基因.结果 肺癌并肺部感染的病原菌以革兰阴性菌为主占62.0％、革兰阳性菌占31.0％,真菌占7.0％,革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌及肺炎链球菌为主,革兰阴性菌及阳性菌对多种抗菌药物耐药;部分大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌携带TEM型及SHV型耐药基因.结论 肺癌并肺部感染以革兰阴性菌最为常见,多药耐药严重,部分携带有耐药基因.     

子宫肌瘤300例病理分析

子宫平滑肌肿瘤Ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｔｕｍｏｒ(ＳＭＴ)是一种常见的女性生殖器官肿瘤 ,又称平滑肌瘤Ｌｅｉｏｍｙｏｍａ(ＬＭ) ,通过本文分析 ,以提高临床及病理医师对本病的认识和基层医院的临床及病理诊断。1　资料与方法1 1　临床资料　系统回顾我院病理科 1995～ 2 0 0 1年病理外检临床诊断为子宫肌瘤的 30 0例女性患者 ,年龄在 2 6～72岁之间 ,以 30～ 5 5岁居多 ,从症状出现到就诊时间为 1个月～ 10年不等 ,就诊症状为下腹部隐痛或痛经 ,阴道不规则出血 ,月经量多 ,甚至伴有贫血 ,体检发现盆腔子宫部位有肿块 ,Ｂ超示子宫肌瘤 ,…     

奥沙利铂联合替吉奥治疗晚期胰腺癌疗效观察

目的评价奥沙利铂联合替吉奥治疗晚期胰腺癌的临床疗效。方法选取50例晚期胰腺癌患者随机分为奥沙利铂联合替吉奥组(观察组)和吉西他滨单药组(对照组),每组25例。观察组患者化学治疗方案为奥沙利铂130 mg·m-2,静脉滴注,第1天,替吉奥40 mg·m-2,口服,每日2次,第1天至第14天,21 d为1个周期;对照组患者化学治疗方案为吉西他滨1 000 mg·m-2,静脉滴注,第1天,第8天,21 d为1个周期。观察2组患者的无进展生存期、客观缓解率、总生存期及药物安全性。结果观察组患者中位无进展生存期明显长于对照组(6.2个月vs 3.6个月,RR=0.64,P=0.036);观察组患者的客观缓解率为28.0%,高于对照组的8.0%(P=0.035);观察组患者的中位总生存期长于对照组(13.0个月vs 8.5个月,RR=0.72,P=0.104),但差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者3/4级不良反应相似。结论奥沙利铂联合替吉奥治疗晚期胰腺癌与吉西他滨单药相比,疗效更优,且不良反应相似,联合用药未增加药物毒性,值得进一步开展大规模的Ⅲ期临床研究。     

移植骨髓间充质干细胞肝癌大鼠细胞凋亡及炎症因子的动态变化

BACKGROUND:Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation has not been thoroughly reported on its effects on apoptosis in hepatoma carcinoma cells and inflammatory factor level. OBJECTIVE:To investigate the effect of rat bone marrow mesenchymal stem cells on dynamic change of inflammatory factors and cell apoptosis during hepatocarcinogenesis. METHODS:Sixty healthy Sprague-Dawley rats were divided randomly into healthy group (n=30), control group (n=30) and transplantation group (n=30). Healthy group was given ordinary feed and normal water, while other groups were given diethylnitrosamine solution in drinking water to induce liver cancer models. Then, rats in the transplantation group were subjected to bone marrow mesenchymal stem cell transplantation via the tail vein. Two weeks after cell transplantation, CXCL5, interleukin-8 and interleukin-6 levels were tested by ELISA, mRNA level of hepatocyte nuclear factor 1α detected by RT-PCR, expression of Bcl-2 and Bax in liver tissue measured by immunohistochemical method, and liver cancer cell apoptosis index detected by TUNEL technique. RESULTS AND CONCLUSION:After modeling, the expressions of CXCL5, interleukin-8 and interleukin-6 in the control group were significantly higher than those in the healthy group (P < 0.05), while these indexes were reduced significantly after bone marrow mesenchymal stem cell transplantation (P < 0.05) and close to the normal levels (P > 0.05). Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation significantly up-regulated the mRNA level of hepatocyte nuclear factor 1α in the liver tissue that was decreased obviously after modeling (P < 0.05). In addition, the expression of Bcl-2 was reduced, while the expression of Bax and the apoptosis index increased significantly in the transplantation group compared with the control group (P < 0.05). These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation contributes to hepatocyte differentiation and regeneration in liver cancer rats by reducing serum inflammatory factor levels and promoting apoptosis in hepatoma carcinoma cells.     

银杏内酯B通过MMP9/STAT3信号通路对肺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的:探究银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对肺癌细胞A549恶性生物学行为的影响.方法:将A549细胞随机分为对照组、银杏内酯B低剂量组、银杏内酯B中剂量组和银杏内酯B高剂量组,除对照组外,分别采用25、50、100μmol/L剂量的银杏内酯B处理银杏内酯B低、中、高剂量组的A549细胞.MTT法检测细胞增...     

三氧化二砷联合热疗对人食管癌细胞株EC-1增值和细胞周期的影响

摘要：目的 探讨三氧化二砷(AS203) 联合热疗对人食管癌细胞株EC-1增殖的抑制作用及机制。方法 经AS203注射液联合热疗处理EC-1细胞后采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应; 应用流式细胞术检测细胞周期变化,TUNEL法观察细胞凋亡。结果:与AS203单药或单用热疗相比, AS203与热疗联合应用后可显著抑制EC-1细胞增殖和诱导细胞凋亡, 并使细胞S期和G0/G1期比例明显降低, G2 /M 期明显升高。结论:AS203联合热疗具有协同抗食管癌作用,其机制可能与联合应用后增强诱导食管癌细胞凋亡、细胞周期特异性治疗与细胞周期调控剂联合增效有关。     

奥沙利铂联合卡培他滨治疗晚期肝细胞癌的疗效及安全性

目的探讨奥沙利铂联合卡培他滨治疗无法手术切除的晚期肝细胞癌患者的疗效及安全性。方法经病理组织学检查确诊的局部晚期、无法手术或已有远处转移的晚期肝细胞癌患者18例,给予奥沙利铂和卡培他滨进行全身化学治疗,奥沙利铂130 mg.m-2,静脉滴注,第1天;卡培他滨每日1 800 mg.m-2,分2次口服,第1～14天,21 d为1个周期;直至疾病进展或最多不超过6个周期停止用药。每2个周期评价客观疗效,观察至病情进展时间(TTP)和生存期(OS),并动态监测血清甲胎蛋白(AFP)的变化,评定药物的毒副作用。结果 18例患者全部可以评估疗效,获得完全缓解1例,部分缓解3例,稳定6例,进展8例,客观缓解率为22.2%(4/18),疾病控制率为55.6%(10/18);中位TTP为3.1个月,中位OS为12.6个月,AFP反应率为53.3%。常见的毒副作用为中性粒细胞减少、轻度的周围神经毒性和手足综合征。结论以奥沙利铂联合卡培他滨治疗晚期肝细胞癌患者具有良好的客观疗效和一定的生存获益,不良反应较轻,易于耐受。     

葛根素下调基质金属蛋白酶-16表达影响乳腺癌细胞的生物学行为

目的：探讨葛根素通过下调基质金属蛋白酶-16（matrix metalloproteinase-16,MMP-16）表达抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖并促进细胞凋亡行为的调控及其机制。方法：qPCR检测不同浓度的葛根素对乳腺癌细胞的活性影响情况;分析葛根素对乳腺癌细胞增殖行为的影响情况;流式细胞术实验检测葛根素对乳腺癌细胞周期的影响;Western blotting实验检测葛根素对乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-16表达情况的影响。结果：1 μmol·L^-1的葛根素对乳腺癌细胞的活力的抑制作用最佳;随着时间的进展,葛根素对乳腺癌细胞的增殖能力的直接抑制作用,可以在一定程度上干扰乳腺癌细胞的生长进程;葛根素对乳腺癌细胞的凋亡行为有一定的促进作用;合适浓度葛根素对乳腺癌细胞中MMP-16蛋白有直接的干扰作用。结论：葛根素通过下调基质金属蛋白酶-16表达抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖并促进细胞凋亡行为。