超声引导下Vacora旋切术在乳腺多发良性疾病中的应用

目的探讨超声引导下真空辅助旋切系统(Vacora旋切系统)在乳腺多发(一侧乳腺病灶≥3个)良性病灶治疗中的应用价值。方法 2009年2月~2010年6月应用真空辅助旋切系统(美国巴德公司Vacora系统)对17例经B超检查发现直径≤3 cm的79个良性乳房肿瘤进行实时超声引导旋切,术后2 d,2个月及6个月对患者行超声随访,并将手术区超声图像与术前病灶图像进行对比分析,观察有无血肿,肿瘤残留及美容效果。结果所有乳腺多发病灶均准确并完整切除,经病理诊断均为良性。17例随访1~16个月,平均7.6月,1例术后14 d复查可见血肿形成,术后2个月血肿完全消失;1例术后3个月复查发现残留,继续跟踪随访;所有患者皮肤切口愈合良好,无明显切口瘢痕。结论超声引导下Vacora旋切系统对乳腺多发良性病灶切除效果好,具有美观、微创、安全、并发症少等优点。     

中山大学孙逸仙纪念医院国家自然科学基金立项特点分析

国家自然科学基金是目前国内最具权威性、公正性的科学基金,本文综合分析我院获资助立项基金数的特点,归纳出科研立项的重要基础:审慎的科研作风,良好的研究背景,对以往国家自然科学基金项目的完成情况,有长期固定的研究方向,强大研究团队支撑以及创新性强的课题设计。     

胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植对宿主肝功能的影响及安全性评估**☆

背景：体外诱导胚胎干细胞分化为肝细胞已有不少成功的报道，但其体内移植后能否有效整合入宿主肝板、在肝内能否进一步生长分化并表达肝细胞功能以及成瘤的风险等情况目前还不清楚。 目的：应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植, 观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性情况。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学附属第二医院小儿外科。 材料：选用BALB/c小鼠24只为受体，鼠龄6~8周，体质量20~ 35 g，雌雄不拘购自广州市实验动物中心。实验所用胚胎干细胞源性肝干细胞由作者所在课题组诱导胚胎干细胞分化而成。小鼠胚胎干细胞株E14由本院干细胞中心提供。 方法：实验于2006-07/2007-06在中山大学附属第二医院干细胞研究中心完成。将24只小鼠随机分为2组：肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组，每组12只。前组分两次按50 mg/kg剂量腹腔内注射倒千里光碱(retrorsine) ，间隔2周，第2次注射4周后行70%肝部分切除制造肝损伤；然后经门静脉分别移植1×105羟基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）荧光标记的细胞入小鼠肝内进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。后组在行70%肝部分切除制造肝损伤模型后进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。 主要观察指标：荧光显微镜下观察移植细胞组受体鼠肝脏内分布、整合与体内生长分化情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况。将胚胎干细胞源性肝干细胞注入治疗性肝再生小鼠肝内，将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下作为对照，观察胚胎干细胞源性肝干细胞体内成瘤情况。 结果：①肝干细胞在受体鼠肝内生长情况：CFDA SE标记的胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植1周，受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布。2周后，肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大，且可见类似肝索样结构排列。②肝功能：共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明，受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号（呈黄色荧光），肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组血清白蛋白水平则无明显差异（P > 0.05）。③肝干细胞移植安全性：6周内未见畸胎瘤形成，而将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成。 结论：胚胎干细胞源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能；且此移植安全性较好。     

肝外胆管癌组织中Bcl-2的表达及意义

目的 了解抗凋亡基因Bcl-2在肝外胆管癌和良性胆管疾病组织中的表达及其与胆管癌分化程度的关系.方法 利用免疫组织化学方法检测了46 例肝外胆管癌,10例胆总智囊肿,5例慢性胆管炎胆管壁组织Bcl-2蛋白的表达.结果胆管癌Bcl-2蛋白表达阳性率为(43.3%).其中高分化腺癌Bcl-2蛋白阳性率为(64.3%).中分化腺癌Bcl-2蛋白阳性率为(42,8%),低分化腺癌BCl-2蛋白阳性率为(18.1%).10例胆总管囊肿及5例慢性胆管炎的胆管壁组织均无表达.结论1 Bcl-2蛋白在胆管癌与良性胆管疾病中表达有显著差异,它的过度表达与肝外胆管癌的发生有关.2 胆管癌分化程度越高,其Bcl-2表达越高,而分化程度越低,其Bcl-2表达越低.提示Bcl-2蛋白在肝外胆管癌表达与细胞分化程度有关.     

胚胎干细胞源性肝干细胞在治疗性肝再生中的应用

目的： 应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞(ESC)源性肝干细胞肝内移植, 观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性等情况，为ESC移植在难治性肝病治疗中的临床应用提供实验依据。方法： 倒千里光碱+70%肝部分切除建立BALB/c小鼠的治疗性肝再生模型。用荧光示踪剂CFDA SE 标记移植细胞，将经淤胆血清“病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞经门静脉移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内。然后荧光显微镜下观察，检测移植细胞体内分布、整合与肝细胞替代、体内生长分化等情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况。并通过观察其体内成瘤性对筛选出的ESC源性肝干细胞的安全性进行评估。结果： CFDA SE标记的ESC源性肝干细胞肝内移植1周，受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布。2周后，肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大，且可见类似肝索样结构排列。共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明，受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号（呈黄色荧光），血清白蛋白水平则无明显差异（P>0.05）。6周内未见畸胎瘤形成，而将未分化的ESC移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成。结论： 经淤胆血清“病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效整合入宿主肝板、在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能。其安全性较好，6周内未见畸胎瘤形成。     

变异型CD_(44)v6和Rasp21在胰腺癌及其转移灶中的表达

目的:胰腺癌细胞株的研究证明变异型CD_(44)v6和p21蛋白的表达与胰腺癌细胞的转移特性有关。我们用针对CD_(44)v6变异体的鼠抗人单克隆抗体和p21蛋白单克隆抗体,对46例胰腺癌原发灶,18例胰腺癌淋巴结转移灶,5例肝转移灶和8例胃窦十二指肠转移灶进行免疫组化染色。结果表明:胰腺癌转移灶CD_(44)v6和p21蛋白的阳性染色率显著高于原发灶;有转移的胰腺癌组织CD_(44)v6和p21的表达均高于无转移的病例,前者有显著差异,后者则无。说明CD_(44)v6或p21表达阳性的胰腺癌组织较易发生转移。另外,胰腺癌淋巴结转移灶的CD_(44)v6表达高于其它转移灶,提示CD_(44)v6可能在介导胰腺癌淋巴结转移中起作用较大。相关性检验显示CD_(44)v6阳性组和p21阳性组间有显著的相关性,这与文献提出p21蛋白通过引起变异型CD_(44)(CD_(44)v)表达升高来促进转移的结论一致。     

TGFα在胰腺癌中的表达及其与癌细胞DNA倍型的关系

目的 研究胰腺癌中TGFα的表达及其与癌细胞DNA倍型的关系。方法 分别采用TGFα单抗免疫染色及FeuIgen染色法对67例胰腺导管腺癌和16例正常胰腺进行染色,并分析TGFα表达与癌细胞DNA倍型的关系。结果 胰腺癌组织TGFα染色阳性率为41.8%,正常胰腺组织中未见阳性染色。TGFα阳性胰腺癌癌细胞异倍体率为89.3%,明显高于阴性组。结论 TGFα表达与胰腺癌发生及癌细胞核增殖活性有关。     

BCL-2基因表达与乳腺癌抗凋亡及免疫耐受的关系

目的观察乳腺癌细胞株BCL-2基因表达与其耐受肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)免疫攻击的关系,探索应用BCL-2硫代反义寡核苷酸(BCL-2SON)治疗乳腺癌的途径.方法BCL-2硫代反义寡核苷酸处理乳腺癌细胞株MCF-7,Western印迹法观察其对BCL-2表达的抑制;并将MCF-7细胞与乳腺癌标本分离出来的TIL共同培养,通过JAM试验观察TIL诱导MCF-7细胞凋亡的情况.结果BCL-2SON处理的MCF-7细胞无BCL-2表达,并在JAM试验中随着TIL浓度增加,凋亡细胞也增加;未经处理的对照组可见BCL-2表达,JAM试验中随着TIL浓度增加,凋亡细胞的量无明显变化.结论BCL-2表达的乳腺癌细胞可对抗肿瘤浸润淋巴细胞的免疫攻击,BCL-2SON可作为治疗乳腺癌的新途径.     

实体瘤中肿瘤干细胞研究进展

 自肿瘤干细胞(CSC)学说提出以来,受到了科学界的广泛关注,也是争论的焦点问题&;#65377;正确认识肿瘤干细胞的生物学特性和调控机制,寻找治愈肿瘤的新途径新方法,是目前最重要研究方向之一&;#65377;本文就实体瘤中CSC的起源&;#65380;分离鉴定方法,以及信号通路&;#65380;微环境,小分子RNA与CSC的作用和肿瘤的靶向治疗等方面展开论述&;#65377;     

单核巨噬细胞的选择性激活及其与疾病的关系

单核巨噬细胞存在两种激活途径,即经典激活和选择性激活.既往对单核巨噬细胞在炎症过程中的作用研究侧重于其经典激活后的促炎效应,包括抗原处理、呈递、T细胞激活和促炎因子的分泌.近年愈来愈多的研究揭示了单核巨噬细胞选择性激活的重要性,如参于组织的修复、组织纤维化和血管形成.本文从单核巨噬细胞平衡调节入手,阐述选择性激活的单核巨噬细胞的表型和分子特征,及其在多种疾病发生和发展中的作用.