SAMHD1通过调控p27表达抑制肝细胞癌细胞增殖的研究

背景与目的：不育α基序结构域和组氨酸/天冬氨酸残基双联体结构域包涵蛋白1（sterile alpha motif and histidine/aspartic acid domain-containing protein 1，SAMHD1）具有抑制多种肿瘤细胞生长的作用，但其调节肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）细胞增殖的作用及机制尚未见报道。探究SAMHD1调控p27的表达对HCC细胞Huh7的增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法：首先通过蛋白质印迹法（Western blot）检测正常肝细胞和不同类型HCC细胞中SAMHD1的表达情况。利用基因修饰技术构建过表达SAMHD1、dNTP酶活性位点突变体（SAMHD1-D207N）和磷酸化位点突变体（SAMHD1-T592E）的重组质粒，然后利用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测过表达SAMHD1及其突变体或siRNA干扰沉默SAMHD1对HCC细胞增殖的影响，采用流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡情况。在癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库中分析SAMHD1和p27表达的相关性。结果：HCC细胞中SAMHD1表达上调，过表达SAMHD1、SAMHD1-D207N和SAMHD1-T592E可以抑制Huh7细胞增殖，细胞周期停滞在G ₁ /G ₀ 期；相反，干扰SAMHD1后细胞增殖加快，细胞周期停滞在G ₂ /M期。机制研究表明，SAMHD1上调细胞周期蛋白激酶抑制因子p27的表达。在HCC组织中，p27的表达与SAMHD1表达呈正相关。结论：过表达SAMHD1可以上调p27的表达，导致细胞周期停滞在G ₁ /G ₀ 期，从而抑制HCC细胞增殖，这种抑制作用不依赖于其dNTP酶活性和磷酸化修饰。     

孕期膳食模式与妊娠期糖尿病发生风险的关系研究

目的研究孕期膳食模式与妊娠期糖尿病发生风险的相关性。方法 600例进行常规体检的孕妇为研究对象,结合孕妇在孕期膳食以及食物摄入率问卷调查的结果 ,分析孕期膳食模式与妊娠期糖尿病发生风险的关系。结果 600例孕妇中诊断为妊娠期糖尿病孕妇140例,其中初产91例(65.00%),不良孕产史79例(56.43%),家族糖尿病史28例(20.00%),血红蛋白(117.59±9.01)g/L,体质量指数(28.54±2.41)kg/m^2;非妊娠期糖尿病孕妇460例,其中初产391例(85.00%),不良孕产史181例(39.35%),家族糖尿病史45例(9.78%),血红蛋白(105.79±7.82)g/L,体质量指数(23.05±3.06)kg/m^2。妊娠期糖尿病孕妇的初产率低于非妊娠期糖尿病孕妇,不良孕产史率、家族糖尿病史率、血红蛋白、体质量指数均高于非妊娠期糖尿病孕妇,差异均具有统计学意义(χ^2=27.175、12.753、10.485, t=15.070、19.466, P=0.000、0.000、0.001、0.000、0.000<0.05)。妊娠期糖尿病孕妇的膳食模式1有11例(7.86%),膳食模式2有25例(17.86%),膳食模式3有23例(16.43%),膳食模式4有26例(18.57%);非妊娠期糖尿病孕妇的膳食模式1有68例(14.78%),膳食模式2有36例(7.83%),膳食模式3有35例(7.61%),膳食模式4有38例(8.26%)。妊娠期糖尿病孕妇的膳食模式1比例低于非妊娠期糖尿病孕妇,膳食模式2、3、4比例高于非妊娠期糖尿病孕妇,差异均具有统计学意义(χ^2=4.503、11.825、9.561、11.974, P=0.034、0.001、0.002、0.001<0.05)。结论孕妇的孕期膳食模式中的鱼-肉-蛋类、奶制品-豆制品类以及零食-薯类-甜食类为主时,会加大出现妊娠期糖尿病的危险性,可以建议孕妇多食用谷物-水果-蔬菜类,已达到营养平衡。     

PTPN6通过抑制SP1/p38 MAPK信号通路促进前列腺癌细胞的化疗敏感性

目的:研究PTPN6对前列腺癌细胞PC3的作用及其作用机制。方法:RT-PCR和Western blot实验检测前列腺癌组织和细胞以及癌旁组织和人前列腺上皮细胞中PTPN6的表达量；CCK-8和EDU染色实验检测PTPN6对前列腺癌细胞PC3增殖的影响；Western blot实验检测耐药相关蛋白P-gp和MRP-1的蛋白表达水平。结果:RT-PCR和Western blot结果显示，PTPN6在前列腺癌组织和细胞中的表达量显著低于癌旁组织和人前列腺上皮细胞中的表达量；过表达PTPN6显著抑制前列腺癌PC3细胞的增殖，并降低PC3细胞的耐药性；进一步的研究结果表明PTPN6可通过抑制SP1，并抑制p38 MAPK通路抑制PC3细胞的增殖和耐药。结论:PTPN6能够抑制前列腺癌细胞PC3的增殖和耐药，提高其化疗敏感性，作用机制是通过调控SP1/p38 MAPK信号通路来实现的，这一结果能够为临床上前列腺癌的诊断和治疗提供分子基础。     

同型半胱氨酸对高血压患者脑卒中复发风险的影响

目的探讨高血压合并脑卒中患者的血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平与其他危险因素对于脑卒中复发的影响。 方法分析徐州市中心医院心内科和徐州医科大学附属医院神经外科自2012年5月至2013年12月收治的1623例高血压脑卒中患者的基线资料，中位随访4.9年，根据随访事件中是否发生脑卒中分为复发组（312例）与未复发组（1311例）。Kaplan-Meier生存分析比较不同危险因素脑卒中复发率的差异，单因素与多因素Cox回归模型分析影响脑卒中复发的独立危险因素，以及危险因素之间的交互作用。 结果复发组年龄、空腹血糖、Lg Hcy的水平，以及糖尿病、房颤的患病率均高于未复发组（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，糖尿病、房颤、年龄≥60岁、空腹血糖≥7.0 mmol/L、Hcy≥15 μmol/L的脑卒中复发率明显升高（Log-rank检验，P<0.05）。多因素Cox回归模型分析显示，高龄、Lg Hcy水平升高，以及房颤、糖尿病是脑卒中复发的独立危险因素。Lg Hcy分别与糖尿病、空腹血糖、年龄存在交互作用。 结论血浆Hcy水平升高既是高血压合并脑卒中患者卒中复发的独立危险因素，又通过与糖尿病、高龄、空腹血糖水平升高的交互作用显著增加脑卒中复发风险。