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1.
目的研究2009甲型H1N1流感疫情全球大流行期间珠海口岸入境发热旅客流感病毒的分子流行病学特征。方法选择2009年5月至2010年4月经珠海各口岸入境的976例发热旅客(体温≥37.5℃)为研究对象,采集咽拭子样本并提取病毒核酸,采用3个多重RT-PCR实验进行甲型、乙型和2009新甲型H1N1流感病毒的筛查以及甲型流感病毒的分子分型检测。此外,随机选择8株2009甲型H1N1流感病毒进行HA和NA基因全长RT-PCR扩增和序列分析。采用SPSS17.0软件对流行病学和实验数据进行统计学分析。结果976例发热旅客中检出流感病毒阳性病例331例,其中甲型流感占96.98%(321/331),乙型流感占3.02%(10/331);321例甲型流感病毒分子分型结果为新甲型H1N1流感92例,占28.66%,人季节性H1N1流感65例,占20.25%,人季节性H3N2流感164例,占51.09%。序列分析显示珠海口岸输入性新甲型H1N1流感病毒的HA和NA基因与甲型流感典型毒株A/California/04/2009(H1N1)的同源性分别达到99.86%和99.89%。结论本研究所阐明的珠海口岸流感病毒的分子流行病学特征对于指导国境口岸流感的防控具有重要参考价值。  相似文献   
2.
目的 建立能同时筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒的多重RT-PCR技术.方法 针对A型流感病毒的M基因、B型流感病毒的NS基因设计通用扩增引物,针对新型甲型H1N1流感病毒的HA基因设计特异性扩增引物,采用一步法建立多重RT-PCR反应体系.通过盲法实验与实时荧光RT-PCR进行比对来评价方法的准确性,并应用于临床评价方法的实用性和有效性.结果 琼脂糖凝胶电泳分析多重RT-PCR产物,结果显示目的扩增片段条带清晰明亮,没有非特异性产物出现,可见该方法扩增效率高,特异性强.50份样本的盲法实验结果显示两种方法检测结果完全一致,符合率为100%.结论 建立的多重RT-PCR方法能通过一次实验快速、准确地同时筛检A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒,是一项成本低廉、对流感的疫情监测和早期诊断具有实用价值的筛检技术.
Abstract:
Objective To developed a multiplex RT-PCR assay for simultaneous screening of type A, B and novel A (H1N1)influenza viruses. Methods Two pairs of universal primers in were designed for amplifying the M gene and NS gene of type A and B influenza viruses, respectively. A pair of specific primers of HA gene was designed to detect novel A (H1N1) influenza virus. A one-step method was used to establish the multiplex RT-PCR system. A blinded experiment was carried out to validate the accuracy of this assay in comparison with the results of real-time fluorescence RT-PCR. The clinical practicability and efficacy of this assay was also evaluated. Results The RT-PCR products were analyzed using agarose gel electrophoresis,which yielded distinct bands of the target fragments without non-specific reactions, suggesting the high efficiency and specificity of the multiplex RT-PCR. Blinded study of 50 samples demonstrated a concordance rate of 100%. Conclusion This multiplex RT-PCR assay allows one-step simultaneous detection of type A, B and novel A (H1N1) influenza viruses rapidly and accurately, and provides a valuable low-cost screening technique for influenza epidemic monitoring and early diagnosis.  相似文献   
3.
目的研制能同时检测9种常见食源致病菌的96微孔板DNA诊断芯片。方法针对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7(Stx1和Stx2)、志贺氏菌、产单核细胞李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌等9种最常见的食源性致病菌,首先选择合适的保守基因,设计种特异性的PCR引物(5'端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立一管多重PCR扩增体系;然后按5×5的阵列格式将探针点制到96微孔板的微孔内,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的微孔杂交体系;采用链霉抗生物素蛋白碱性磷酸酶和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。结果20株标准菌株验证已建立的食源致病菌微孔板DNA诊断芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。在一起食物中毒事件中,该芯片在采样后12h内检出金黄色葡萄球菌,与传统的细菌分离培养和生化鉴定的结果相符。结论本研究建立的新型食源致病菌96微孔板DNA诊断芯片具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对食物中毒等突发公共卫生事件提供了非常有价值的检测技术。  相似文献   
4.
目的 了解其致病性弧菌的存在情况以及其与船舶卫生控制措施和卫生状况间的关系,为传染病监测及制定防制措施提供科学依据。方法采集珠海港入出境船舶压舱水、饮用水和珠海港海域海水,对水样进行弧菌科的分离鉴定,并对调查资料进行统计和分析。结果压舱水致病性弧菌检出率为86.20%,海水致病性弧菌检出率为78.13%,入境船舶上的饮用水致病性弧菌检出率为26.47%:入境船舶上饮用水致病性弧菌检出率大大高于管道饮用水中检出率;船舶卫生状况不同时,其饮用水中致病性弧菌检出率差异显著。结论致病性弧菌广泛分布于压舱水和海水中,压舱水排放对当地人民身体健康构成更大的威胁,对公共卫生的潜在危害性更大。制定规范的压舱水卫生管理措施乃当务之急。  相似文献   
5.
禽类养殖场人员禽流感病毒抗体水平调查   总被引:4,自引:1,他引:4  
目的 调查珠海地区养殖场人员中禽流感H5和H9二种亚型血清中抗体水平,以了解上述2种禽类甲型流感病毒亚型以往的接触感染情况,为防治人问禽流感提供科学依据。方法 珠海地区养殖场人员血清277份,正常出入境人员血清270份,通过血凝抑制试验HI实验进行抗体检测。结果 养殖场人群中H9亚型抗体阳性率为2.17%,同时发现有1份血清H5抗体阳性,H5抗体阳性率为0.36%。而正常出入境人群H9亚型抗体阳性率为2.96%;未见H5亚型抗体的存在。结论 H9亚型在养殖场人群和出入境人群中的存在隐性感染,但感染率不高;养殖场人群H5亚型抗体的存在也应值得注意。  相似文献   
6.
珠海口岸出入境人员人间禽流感病毒抗体水平调查   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的] 调查珠海口岸出入境人员中H5和H92种亚型禽流感病毒血清抗体水平,以了解上述2种禽类甲型流感病毒亚型以往隐性感染情况,为防治人间禽流感提供科学依据。[方法] 采集珠海口岸出入境健康体检人员血清508份,通过血凝抑制试验(HI)进行H5和H9型禽流感病毒抗体检测。[结果] 出入境人员中H9亚型抗体阳性率为9.65%,同时发现有1份血清H5抗体阳性,H5抗体阳性率为0.20%。[结论] H9亚型在出入境健康人群中存在隐性感染;出入境健康人员中H5亚型抗体的存在也应值得注意。  相似文献   
7.
目的调查出口澳门的水产养殖场的鲜活淡水鱼和塘水中致病性弧菌的分布情况,分析两者间致病性弧菌的检出情况以及与季节的关系,探讨致病性弧菌与人类相关疾患的关系.方法采用增菌分离后生化试验及VITEK全自动生化分析仪,对30份淡水鱼和26份塘水进行致病性弧菌的鉴定.结果在样品中检出15种致病性弧菌,它们是副溶血弧菌、溶藻弧菌、类志贺邻单胞菌、温和气单胞菌、霍乱弧菌、拟态弧菌、豚鼠气单胞菌、沙鱼弧菌、创伤弧菌等,其中类志贺邻单胞菌、副溶血弧菌、温和气单胞菌、非01群/非O139群霍乱弧菌、溶藻弧菌、拟态弧菌检出率最高.结论鲜活淡水鱼和塘水中普遍存在致病性弧菌,淡水鱼中致病性弧菌的分布与其在塘水中分布是密切相关的,生食或进食未加工熟透的鲜活淡水鱼有可能感染食源性疾病.  相似文献   
8.
目的:了解珠海口岸入境船舶上饮用水中致病性弧菌污染状况,以及其与船舶卫生管理和卫生处理措施等方面的关系,为检验检疫执法工作和政策的制定提供依据。方法:采集珠海港入境船舶饮用水,对水样进行弧菌科的分离鉴定,并对调查资料进行统计和分析。结果:入境船舶上的饮用水34份,9份检出致病性弧菌,检出率26.47%;检出6种致病性弧菌;船舶卫生状况不同时,其饮用水中致病性弧菌检出率差异有显著性。结论:入境船舶上的饮用水被致病性弧菌污染较严重。有“海水化淡”设备的船舶,可能对降低其饮用水中致病性弧菌检出率有一定作用。建议对入境船舶饮用水的排放加强管理,制定有效的检疫监管措施。  相似文献   
9.
进出境船舶压舱水致病性弧菌的调查   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的:了解致病性弧菌的存在情况以及其与船舶卫生控制措施和卫生状况间的关系,为传染病监测及制定措施提供科学依据。方法:对珠海港入出境船舶压舱水和饮用水中致病性孤菌进行流行病学调查,采集入出境船舶压舱水、饮用水和珠海港海域海水,对水样进行弧菌的分离鉴定及统计分析。结果:压舱水致病性弧菌检出率为86.20%,海水致病性弧菌检出率为78.13%,入境船舶上的饮用水致病性弧菌检出率为26.47%;入境船舶上饮用水致病性弧菌检出率大大高于管道饮水中检出率;船舶卫生状况不同时,其饮用水中致病性弧菌检出率差异有显著性;在压舱水中检出12种致病性弧菌,其中以深藻弧菌、副溶血弧菌、沙鱼弧菌、创伤弧菌为主要优势菌;分离自压舱水的2株溶血性弧菌中检测到耐热溶血素基因。结论:致病性弧菌广泛分布于压舱水和海水中,制定规范的压舱水卫生管理措施乃当务之急。  相似文献   
10.
目的探讨胰十二指肠切除术后不同胰肠吻合方式的安全性和可行性,为临床胰肠吻合方式的选择提供依据。方法纳入我院2010年1月~2014年11月行胰十二指肠切除术的患者50例,根据胰肠吻合方式不同分为两组组:捆绑式吻合组(25例)、常规吻合组(25例)。分析不同胰肠吻合方式对患者术后并发症发生情况及严重程度,以及患者手术出血量、手术时间、吻合时间、术后排气时间、进食流质时间、住院天数、吻合口大小及并发症情况。结果术后死亡1例,术后并发症的情况参照国际胰瘘研究小组(ISGPF)标准,捆绑式吻合组和常规吻合组的术后并发症发生率无明显不同;并发症中发生率最高的是胰漏。两组患者手术出血量、手术时间、吻合时间、术后排气时间、进食流质时间、住院天数等指标比较差异无统计学意义。结论胰十二指肠切除术后采用捆绑式吻合方式并不能显著减低术后发生胰漏的风险。  相似文献   
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