三维试验法检测鲍曼不动杆菌产超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

为了解我院鲍曼不动杆菌对β 内酰胺类抗生素耐药原因,我们采用三维试验法对临床分离的菌株进行超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶检测。一、材料和方法1.菌株来源及鉴定　 60株菌株均分离自我院 2000年 6月~2002年 12月住院患者临床标本,分别为痰液 33份、创伤伤口分泌物 13份、烧伤创面分泌物 10份、气管切开口分泌物 2份、中段尿和血液各 1份,采用法国生物梅里埃公司API20NE鉴定菌种。标准菌株为大肠埃希菌(ATCC25922)和铜绿假单胞菌 (ATCC27853);肺炎克雷伯菌(ATCC700603) (产SHV 18型ESBLs)和阴沟肠杆菌(029M) (去阻…     

糖尿病酮症酸中毒抢救的护理体会

目的:总结并探讨糖尿病酮症酸中毒患者的抢救与护理方法。方法:回顾性分析增城市中医医院ICU 2011年12月至2013年11月收治的43例糖尿病酮症酸中毒患者的临床资料,统计分析治疗效果,总结抢救护理的经验。结果:经过积极的抢救治疗和精心的护理,好转出院41例,家属放弃抢救2例,抢救成功率96.3%;41例抢救成功的患者血糖、pH值、血钾、尿酮等指标较抢救前明显好转,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:积极有效的护理措施能提高糖尿病酮症酸中毒患者抢救成功率。     

三种方法检测梅毒的比较

梅毒是一种由梅毒螺旋体(Treponema pallidum)感染引起的性传播疾病,在临床上较为常见.目前检测梅毒较常用的方法有TRUST法、ELISA法和TPPA法三种,为了降低临床检测中的漏诊率,避免产生医疗纠纷,我们对这三种方法做了测定比较.     

20株阴沟肠杆菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因分析

目的明确临床分离的20株阴沟肠杆菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的20株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析氨基糖苷类修饰酶基因型。结果该20株菌呈现多重耐药，对亚胺培南和美罗培南均敏感，对阿莫西林、阿莫西林／克拉维酸、头孢噻吩和头孢西丁完全耐药，对头孢吡肟及4种氨基糖苷类抗生素阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为25．0％、60．0％、85．0％、90．0％和90．0％，其余9种的耐药率在80．0％～95．0％之间。19株(95．0％)检出氨基糖苷类修饰酶基因；aac(6′)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅵ基因的阳性率分别为80．0％、50．0％、40．0％、5．0％和5．0％；而aog2(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ和aac(6′)-Ⅱ基因均阴性。结论临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重，氨基糖苷类修饰酶基因携带率很高。     

烧伤病房鲍曼不动杆菌分离株耐药性及β-内酰胺酶基因型检测

目的 :分析烧伤病房鲍曼不动杆菌分离株的耐药情况及其 β 内酰胺酶 (BLA)耐药基因类型。 方法 :采用微量稀释法测定临床分离的 14 1株鲍曼不动杆菌对 2 4种抗菌药物的敏感性 ,并对其中 11株采用聚合酶链反应 (PCR)及序列分析的方法分析BLA基因型TEM、SHV、CTX -M - 1、CTX -M - 2、CTX -M - 9、OXA、PER及VEB。结果 :所有菌株均对头孢哌酮 /舒巴坦敏感 ,亚胺培南、美洛培南、多粘菌素E和哌拉西林 /他唑巴坦的耐药率分别为 3.5 %、3.8%、5 .4 %和 4 1.1% ,头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟和头孢哌酮的耐药率在 5 5 .2 %～ 73.2 %之间 ,其余抗生素的耐药率在 5 1.4 %～ 10 0 .0 %之间。 11株TEM型基因扩增全部阳性 ,任选 6株测序结果均为TEM - 1型。有 2株菌株扩增到SHV型基因 ,经测序均为SHV - 12型ESBLs。结论 :烧伤病房鲍曼不动杆菌分离株多重耐药状况极其严重 ,至少存在 2种不同类型的BLA基因 ,基因型分别为TEM - 1、SHV - 12。对其感染的治疗 ,应以抗生素敏感性试验资料为依据 ,可选用碳青霉烯类、头孢哌酮 /舒巴坦、多粘菌素E及其它敏感的抗生素。     

医院感染革兰阴性杆菌耐消毒剂基因研究

目的了解浙江湖州解放军第98医院临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1存在状况.方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法,分析147株革兰阴性杆菌(分别为鲍氏不动杆菌63株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽寡养单胞菌19株、黄杆菌属细菌15株)中qacE△1基因.结果147株革兰阴性杆菌qacE△1基因阳性96株,总阳性率为65.3%;阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌和黄杆菌属细菌qacE△1基因阳性株数分别为17(85.0%)、25(83.3%)、52(82.5%)、2(10.5%)、0.结论临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1携带率比较高,应引起我国医院消毒界的重视.     

gyrA、parC及mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌

目的 探讨gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌的必要性.方法 采用gyrA、parC和mdfA基因测序方法对经法国生物梅里埃公司API 20 E系统(API LAB plus)和MicroScan WalkAway 96 Plus全自动细菌鉴定系统鉴定为克雷伯菌属或产气肠杆菌的19株临床分离株进行分子鉴定.结果 19株菌gyrA、parC、mdfA基因PCR扩增均阳性,基因序列经GenBank中的BLASTn程序进行同源性比较分析,表明与2株完成全基因组测序的肺炎克雷伯菌肺炎亚种NTUH-K2044(Accession:AP006725.1)和MGH 78578(Accession:CP000647.1)最为接近,均为99.0％同源,证实19株均为肺炎克雷伯菌.结论 采用gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌结果准确.     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶表型及β-内酰胺酶基因型的检测

目的了解临床分离的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及β-内酰胺酶(BLA)基因型存在状况。方法在2005年9月至2006年4月间从住院病人中分离25株Kpn,采用表型确证试验方法检测ESBLs,采用PCR及序列分析的方法分析21种(群、簇)BLA基因。结果25株Kpn中,ESBLs阳性14株(56.0%)、阴性5株(20.0%)、"不确定"6株(24.0%)。共检出6种基因,分别是blaTEM20株(80.0%)、blaSHV1株(4.0%)、blaCTX-M-1群1株(4.0%)、blaOXA-10群20株(80.0%)、blaLAP1株(4.0%)和blaDHA8株(32.0%)、BLA基因阳性菌23侏,阳性率92.0%,其余15种(群)基因均阴性。其中HZ12593号菌株blaLAP-2基因序列已登录GenBank,注册号为EU529981。结论临床分离的Kpn产ESBLs比例较高,至少存在6种BLA基因,BLA基因型以blaTEM和blaOXA-10群为主,Kpn携带blaDHA基因可以影响ESBLs表型确证试验结果。     

阴沟肠杆菌Ⅰ类整合酶基因及质粒AmpC酶基因检测

目的明确我院临床分离的阴沟肠杆菌中Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1)、qacE△1-sulⅠ基因和质粒Am鄄pC酶基因(AmpCMIR、AmpCDHA)存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的20株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测耐药基因。结果该20株菌呈现多重耐药,对亚胺培南和美罗培南均敏感,对阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩和头孢西丁完全耐药,头孢吡肟和复方新诺明的耐药率分别为25.0%和85.0%,对氨基糖苷类抗生素的耐药率在60.0%～90.0%之间,其余的耐药率在80.0%～95.0%之间。intⅠ1、qacE△1-sulⅠ、MIR和DHA基因的阳性株数(%)分别为19株(95.0%)、17株(85.0%)、17株(85.0%)、1株(5.0%)。结论我院临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重,intⅠ1、qacE△1-sulⅠ和MIR基因携带率很高。在阴沟肠杆菌中检出intⅠ1、qacE△1-sulⅠ以及质粒型AmpCMIR基因在我国大陆均属首次报道。     

常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子标志物检测

目的了解浙江省湖州解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子存在状况。方法从临床分离鲍曼不动杆菌60株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽窄食单胞菌19株和黄杆菌属15株(脑膜败血性黄杆菌12株、产吲哚金黄杆菌3株),采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子标志物 int Ⅰ 1及qacE△1 基因。结果鲍曼不动杆菌、铜绿似单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和黄杆菌属中 int Ⅰ 1基因阳性率分别为58.3%、0、95.0%、0和0,qacE△1基因阳性率分别为83.3%、83.3%、85.0%、10.5%和0。合计144株中 int Ⅰ 1和 qacE△1阳性株数(%)分别为54株(37.5%)、94株(65.3%),Ⅰ类整合子标志物总阳性率为68.1%(98/144)。结论解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子携带率相当高。