甲氧基聚乙二醇体外修饰移植物细胞对单倍体相合小鼠造血干细胞移植后GVHD的影响

本研究探讨甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰移植物细胞对小鼠单倍体相合干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的影响.取经mPEG修饰及未修饰的成年CB6小鼠脾细胞悬液注入BALB/c新生幼鼠的腹腔(5×106脾细胞/只),以脾增大指标判断新生BALB/c小鼠注射单倍体相合供鼠脾细胞后的GVHD反应;取经mPEG修饰及未修饰的成年BALB/c小鼠骨髓及脾细胞混合悬液(BMS)尾静脉注入接受致死量γ射线照射后的成年BALB/c小鼠(2×105个BMS/只),注射后第8天取受鼠脾脏,计数脾结节数.结果表明修饰组脾指数1(SI1)较未修饰组减低,修饰组脾指数2(SI2)值＜1.3,未修饰组SI2值＞1.3,提示接受mPEG修饰的单倍体相合脾细胞输注后,修饰组GVHD程度较未修饰组轻;未修饰组与修饰组相比较,脾结节形成的数量差异无显著性意义(p＞0.05),说明mPEG修饰不影响造血干祖细胞的活性.结论mPEG修饰移植物可减轻小鼠单倍体相合干细胞移植后的GVHD,而不影响干祖细胞活性.     

以皮肤损害和骨髓增生异常综合征首发的双表型急性白血病

本研究通过实例分析双表型急性白血病的临床、病理和生物学特征,用骨髓细胞涂片观察肿瘤细胞的形态,流式细胞术和免疫组织化学检测肿瘤细胞的免疫表型,常规染色体分析和多重巢式RT-PCR检测染色体畸变。结果表明:本例以皮肤损伤和骨髓增生异常综合征为首发表现,诊断时骨髓原始细胞超过30%,合并脑膜浸润;肿瘤细胞体积大,同时表达髓系标记(cMPO、CD33和CD117)和T淋系标记(cCD3、CD5、CD7、CD4和CD8双表达),并强烈表达最早期造血祖细胞标记CD43和CD99,染色体核型正常,检测到MLL基因的部分串联重复。最后诊断为双表型急性白血病。结论:双表型白血病的前期可表现为骨髓病态造血,其临床和生物学行为具有高度侵袭性,应用免疫表型、细胞遗传学和分子特征分析有助于这类疾病的早期诊断和预后评估。     

神经母细胞瘤脂类提取物对患者NKT细胞的激活作用

背景：微小残留病的长期存在是神经母细胞瘤(neuroblastoma，NB)易复发的主要原因。NKT细胞是一类有效的抗NB的免疫效应细胞，但是数量少，活性低。目的：探讨：NB脂类提取物对患者外周血NKT细胞是否有激活作用。设计：以诊断为依据的自身对照研究。地点和对象：实验地点为解放军总医院儿内科，对象为5例神经母细胞瘤患者，男3例，女2例；年龄1．5～7．5岁。干预：实验组用NB脂类提取物作为刺激物刺激患者的外周血NKT细胞，对照组选择生理盐水。主要观察指标：两组NKT细胞的增殖程度(T细胞增殖程度和NKT／T比例)和：NKT细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。结果：实验组和对照组增殖A值分别为O．213&;#177;O．033和O．171&;#177;O．023，NKT／T比例分别为7．39&;#177;1．48和2．18&;#177;1．50，NKT细胞毒作用为(64．3&;#177;15．2)％和(44．4&;#177;11．6)％。实验组增殖程度是对照组的1．3倍(t=2．33，P=O．048)，NKT／T比例是对照组的3．3倍(t=5．53，P=O．001)，NKT细胞毒作用高于对照组19．84％(t=2．36，P=O．046)。结论：NB脂类提取物可以有效激活NKT细胞。利用肿瘤自身脂类抗原诱导出有效的抗自身肿瘤免疫的研究有望找到一条有效的清除微小残留病变，减少复发的免疫治疗途径。     

α-半乳糖神经鞘氨醇对自然杀伤T细胞的激活作用

目的　研究α 半乳糖神经鞘氨醇KRN70 0 0与白细胞介素 15 (IL 15 )、粒 单核细胞集落刺激因子(GM CSF)对自然杀伤T细胞的激活作用。方法　采集健康儿童外周血T细胞 ,与同一个体外周血树突细胞共同培养。在培养体系中分别加入KRN70 0 0和 (或 )细胞因子 (IL 15 GM CSF)。并检测各组T细胞增殖程度变化 ,NKT/T比例 ;并分选出非杀伤T细胞 ,分别测定各组NKT细胞对肿瘤细胞系的杀伤作用。结果　KRN70 0 0刺激组、细胞因子刺激组和共刺激组T细胞增殖程度 ,NKT/T比例高于其他各组 ;各组NKT细胞对多个肿瘤细胞系均有杀伤作用 (效∶靶为 2 0∶ 1和 10∶ 1) ,共剌激NKT细胞细胞毒作用高于其他组。结论　KRN70 0 0可有效促进NKT细胞增殖 ,激活NKT细胞发挥抗肿瘤作用。IL 15、GM CSF与KRN70 0 0有协同作用     

高压氧综合治疗新生儿缺氧缺血性脑病

高压氧综合治疗新生儿缺氧缺血性脑病濮海平，姜红，李红，刘立真新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）是造成新生儿早期死亡及小儿智力发育障碍的重要原因，以往治疗本病的常规疗法，疗效不十分满意。我们试用高压氧（ＨＢＯ）综合治疗本病２０例，取得了较为良好的疗效，现报...     

肿瘤标志物联合检测在神经母细胞瘤诊治中的应用

目的探讨24h尿香草扁桃酸（VMA）、血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血清铁蛋白（SF）、血清乳酸脱氢酶（LDH）肿瘤标志物联合检测在神经母细胞瘤（NB）诊断、分期和评价疗效中的作用。方法采用高效液相色谱仪,应用化学比色法测定24h尿VMA,采用放射免疫法检测血清NSE和SF,应用全自动生化分析仪,采用速率法测定血清LDH。分析46例NB初诊时4种肿瘤标志物阳性率、不同分期阳性率及化疗前后肿瘤标志物水平变化。结果首次入院时4种肿瘤标志物阳性率均在50%以上。其中24h尿VMA阳性率最高,达82.6%;其次为血清NSE,阳性率亦达76.1%。Ⅳ期NB血清NSE及尿VMA均较Ⅱ、Ⅲ期患儿增高。经2个疗程强化疗,4种肿瘤标志物水平均明显下降,化疗有效组与无效组比较肿瘤标志物水平下降更明显（Pa〈0.01）。结论采用VMA、NSE、SF、LDH4种肿瘤标志物联合检测对NB早期诊断、分期及评价疗效有一定价值。     

荧光定量RT-PCR 检测神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA的表达

目的：MYCN基因表达对神经母细胞瘤的治疗及预后评估有指导意义，目前国内对于MYCN基因mRNA的定量检测未见报道，该研究拟采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREEN Ⅰ) 实时检测的逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞 MYCN基因mRNA的表达，并对其可行性及实用性进行研究，力争探索出微量瘤标本的MYCN基因mRNA定量检测的可行方法。方法：提取神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 细胞总RNA，采用SYBR GREEN I 实时检测的RT-PCR检测其MYCN基因mRNA的表达，并用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照，将MYCN基因的mRNA拷贝数与GAPDH的拷贝数相除，结果为单细胞MYCN基因mRNA的表达水平。结果：反应标准曲线有良好的相关性( R2>0.99), PCR 产物特异, 神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达水平为17.4±1.2。结论：只要严格控制PCR 反应条件，SYBR GREEN Ⅰ定量RT-PCR 法可以作为一种良好的定量PCR方法对神经母细胞瘤细胞系LA-N-5 MYCN基因mRNA的表达进行检测，此方法为临床微量神经母细胞瘤瘤组织的MYCN基因mRNA的定量检测提供了可能。［中国当代儿科杂志，2007，9（1）：47-50］     

氨磷汀在儿童肿瘤化疗中的应用

目的研究氨磷汀在儿童肿瘤化疗中的作用及不良反应。方法随机选择肿瘤32例患儿,采用自身对照,观察患儿在同一化疗方案中使用氨磷汀辅助治疗后黏膜损伤、骨髓抑制时间、发热持续时间、抗生素及刺激因子应用时间及氨磷汀的不良反应。结果氨磷汀辅助治疗组发生黏膜溃疡4例,明显低于对照组9例;中性粒细胞<0.5×109/L持续时间缩短,血小板<5×109/L持续时间缩短;发热持续时间、抗生素和刺激因子应用时间缩短。两组化疗过程中均未出现低体温、皮疹、低血压等情况,化疗后肾功能、心电图均正常;对肝功能影响程度相似;氨磷汀组低钙血症尤其是低钙性抽搐发生率高。结论氨磷汀能够有效保护正常组织细胞,不良反应较低,可在儿童肿瘤患者化疗中应用。     

神经母细胞瘤脂类提取物对患者NKT细胞的激活作用

背景微小残留病的长期存在是神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)易复发的主要原因.NKT细胞是一类有效的抗NB的免疫效应细胞,但是数量少,活性低.目的探讨NB脂类提取物对患者外周血NKT细胞是否有激活作用.设计以诊断为依据的自身对照研究.地点和对象实验地点为解放军总医院儿内科,对象为5例神经母细胞瘤患者,男3例,女2例;年龄1.5～7.5岁.干预实验组用NB脂类提取物作为刺激物刺激患者的外周血NKT细胞,对照组选择生理盐水.主要观察指标两组NKT细胞的增殖程度(T细胞增殖程度和NKT/T比例)和NKT细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.结果实验组和对照组增殖A值分别为0.213±0.033和0.171±0.023,NKT/T比例分别为7.39±1.48和2.18±1.50,NKT细胞毒作用为(64.3±15.2)%和(44.4±11.6)%.实验组增殖程度是对照组的1.3倍(t=2.33,P=0.048),NKT/T比例是对照组的3.3倍(t=5.53,P=0.001),NKT细胞毒作用高于对照组19.84%(t=2.36,P=0.046).结论NB脂类提取物可以有效激活NKT细胞.利用肿瘤自身脂类抗原诱导出有效的抗自身肿瘤免疫的研究有望找到一条有效的清除微小残留病变,减少复发的免疫治疗途径.     

以CDV和CiE持续静脉滴注为诱导方案治疗晚期神经母细胞瘤

目的研究CDV和CiE方案治疗晚期神经母细胞瘤的短期疗效及患儿耐受性。方法选择IV期神经母细胞瘤6例,年龄4～7岁。诱导方案CDV4疗程,CiE2疗程。用药:Ⅴ:长春新碱0.67mg/(m2·24h),第1、2、3天,持续滴注72h;D:柔红霉素:25mg/(m2·24h),第1、2、3天,持续72h;C:环磷酰胺2.1g/(m2·24h),第1、2天,持续滴注48h;Ci:顺铂50mg/(m2·24h),持续1h,第1、2、3天;E:足叶乙甙200mg/(m2·24h),持续2h,第1、2、3天。结果6例转移病灶全部消失,包括骨髓、骨组织、眼球后。化疗后白细胞降低明显,至(0.1～0.2)×109/L,3～4周恢复至3×109/L,每例患儿在化疗不同疗程中出现38°C～39°C的发热1～2次,持续3～8d。2例血培养大肠杆菌阳性各1次,CRP升高分别为25mg/L、32mg/L,其余血培养阴性,用亚胺培等感染控制。结论晚期神经母细胞瘤可较好的耐受CDV和CiE强烈诱导化疗,近期疗效较好。