治伤巴布剂对大鼠急性软组织损伤模型P38MAPK、AKT信号通路的影响＊

目的 观察治伤巴布剂对急性软组织损伤（acute soft tissue injury， ASTI）模型p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、丝/苏氨酸蛋白激酶（AKT）信号通路的影响，探讨治伤巴布剂干预ASTI的可能作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、治伤巴布剂组、p38MAPK信号通路抑制剂组、AKT信号通路抑制剂组，每组8只。除正常对照组外，其余四组均予以左侧后肢小腿ASTI造模。造模成功后，治伤巴布剂组于标记部位立即予治伤巴布剂（修剪成1.5x3cm大小）外敷，并用胶布固定；其余四组均予等剂量赋形剂（修剪成1.5×3 cm大小）外敷处理，胶布固定；持续外敷，共持续24 h。p38MAPK信号通路抑制剂组在造模前30 min予腹腔注射p38MAPK信号通路抑制剂SB203580（400 μg/kg/天）1次；AKT信号通路抑制剂组在造模前30 min予腹腔注射AKT信号通路抑制剂perifosine（20 mg/kg/天）1次。分别于0（造模前）、2h、4h、8h、12h、24h测量受伤小腿肌肉处的周长，并计算肌肉肿胀率（muscle swelling rate，MSR）。24 h药物干预结束后，采用颈椎脱臼法处死大鼠。后将左侧后肢小腿损伤中心部位进行取材，分成三份。一部分用于观察组织病理学形态变化；一部分用于逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测核因子-κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）p65 mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA、白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA表达水平；剩下部分用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平及蛋白质免疫印迹（Western-blot）法测定p38MAPK、AKT、NF-κB p65、核因子抑制蛋白α（inhibitor kappa B alpha， IκBα）表达水平。结果 与正常对照组相比，模型对照组MSR显著增加（P<0.01）；病理形态学上，骨骼肌组织可见大面积肌细胞排列紊乱，肌细胞变性坏死，间质内可见红细胞聚集及大量炎症细胞浸润；骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平显著升高（P<0.01）；磷酸化p38MAPK（p-p38）/总p38MAPK（t-p38），磷酸化-AKT（p-AKT）/总-AKT（t-AKT）明显升高（P<0.01），NF-κB p65及NF-κB p65mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。与模型对照组相比，治伤巴布剂组MSR在治疗第8 h、12 h、24 h显著下降（P<0.01），且在治疗第24 h，其MSR较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更明显（P<0.05）；病理学评分显著下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更显著（P<0.05）；骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平明显下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组更显著（P<0.05）；p-p38/t-p38及p-AKT/t-AKT明显下降（P<0.01），NF-κB p65及NF-κB p65 mRNA表达水平显著下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组在降低NF-κB p65及NF-κB p65 mRNA相对表达值方面更显著（P<0.01）。结论 治伤巴布剂可能同时对p38MAPK、AKT信号通路产生了一定的抑制作用，引起NF-κB活性下调，NF-κB p65蛋白的表达下调，进而引起骨骼肌组织TNF-α、IL-1β炎性细胞因子含量水平下调，减轻ASTI炎症反应，从而改善ASTI。     

HPLC法同时测定枣仁安神胶囊中6种成分

目的建立同时测定枣仁安神胶囊中五味子醇甲、五味子醇乙、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A、五味子乙素的方法,为枣仁安神胶囊的质量控制提供科学的方法。方法采用HPLC法,选用Thermo 120?-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,对枣仁安神胶囊中6种主要指标性成分的含量进行同时分析测定;检测波长:五味子醇甲、五味子醇乙、五味子乙素为250 nm,隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A为270 nm;体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。结果五味子醇甲在4.7～3 153.6 ng(r=0.999 9)、五味子醇乙在7.864～314.500 ng(r=0.999 9),隐丹参酮在14.4～1 256.9 ng(r=0.999 9)、丹参酮I在15.1～1 103.8 ng(r=0.999 9)、丹参酮Ⅱ_A 在15.3～1 532.0 ng(r=0.999 9)、五味子乙素在6.134～204.500 ng(r=0.999 9)内呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为五味子醇甲为100.4%、五味子醇乙为98.7%、隐丹参酮为99.4%、丹参酮I为100.0%、丹参酮Ⅱ_A为99.3%、五味子乙素100.2%,RSD分别为1.4%、2.7%、2.2%、2.2%、2.5%、2.1%;8批样品中各指标成分的质量分数分别为五味子醇甲1.545 7～1.909 9 mg/g、五味子醇乙0.129 8～0.235 1 mg/g、隐丹参酮0.508 4～0.523 4 mg/g、丹参酮Ⅰ0.111 7～0.122 3 mg/g、丹参酮Ⅱ_A 0.755 8～0.874 4 mg/g、五味子乙素0.120 2～0.190 1 mg/g。结论建立的含量测定分析方法灵敏度高、专属性强,可很好地控制枣仁安神胶囊质量。     

髌骨纵形骨折漏诊8例分析

髌骨纵形骨折是髌骨骨折中的一种特殊类型,无移位或移位很小的纵形骨折,在临床上容易漏诊。2005-2008年我院门诊发现8例髌骨纵形骨折被漏诊,现就其原因进行分析如下。     

微波消解-ICP-OES法测定舒肝丸中朱砂的含量

目的:建立舒肝丸中朱砂的ICP-OES含量测定方法。方法:采用硝酸-盐酸(3∶1)对舒肝丸进行微波消解,用ICP-OES法测定舒肝丸中朱砂的含量。结果:汞元素线性范围为0.05~40 mg/L,r=0.9999,大蜜丸回收率为101.9%,RSD%为1.6%(n=9),浓缩丸回收率为101.7%,RSD%为1.4%(n=9)。结论:该方法快速准确,操作简便,可用于舒肝丸中朱砂的含量控制。     

紫榆膏的质量标准研究

目的:研究紫榆膏的质量标准。方法:用薄层色谱(TLC)法对紫草、当归进行定性鉴别;用高效液相色谱法对紫草中左旋紫草素进行含量测定。结果:TLC斑点圆整,分离度好,易于区别;左旋紫草素进样量在0.02032～10.29μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率为99.69%,RSD=1.18%(n=6)。结论:所建标准可用于紫榆膏的质量控制。     

创新技术监督模式 加强质量监督检查

目的创新药品技术监督模式,提高药品生产企业质量检验能力,保证辖区公众用药安全。方法对药品生产企业质检人员进行持续培训,加强对质检部门的现场检查与实践能力考核。结果与结论提高了药品生产企业质检部门的整体检验检测能力和水平,同时也提高了省、市药检系统专业技术人员的能力素质。     

RNA干扰对子宫内膜癌HEC-1A细胞PTTG影响的研究

目的 建立靶向垂体瘤转化基因(PTTG)干扰RNA质粒表达载体,观察对子宫内膜癌HEC-1A细胞PTTG的影响.方法 根据PTTG基因设计3对干扰序列,合成特异性干扰PTTG的siRNA片段,并与pSilencer3.0-Hl载体连接,构建3个PTTG干扰载体(pSilencer3.0-Hl-PTTG-siRNA),分别命名为PTTG siRNA-1、PTTG siRNA-2、PTTG siRNA-3.利用脂质体将其转染子宫内膜癌系HEC-1A细胞,以带有绿色荧光蛋白的真核表达质粒pSilencer3.0-Hl作为转染效率测定组,免疫荧光技术检测转染效率;应用RT-PCR 及Western blot分别检测PTTG mRNA和蛋白表达水平.结果 序列分析法证明构建pSilencer3.0-Hl-PTTG-siRNA质粒成功;RT-PCR和Western-blot分析表明PTTG siRNA-2在mRNA水平和蛋白水平特异性抑制PTTG基因的表达最强.结果 显示HEC-1A细胞阴性对照组荧光表达百分率约为5.3%,转染组荧光表达百分率为74.9%,瞬时转染效率约为69.6%,已经可以满足实验需要.结论 成功构建了靶向抑制PTTG基因的siRNA干扰载体,筛选了干扰效果最强的序列,为进一步实验打下了基础.     

妊娠合并肺结核的合理治疗

肺结核是由结核杆菌引起的呼吸系统慢性传染病，其病理特点是结核结节、干酪样坏死和空洞形成，其临床表现有盗汗、乏力、咳嗽、咯血等症状。妊娠合并肺结核属高危妊娠范畴，尤其是妊娠合并活动性肺结核，如未给予及时合并治疗，可导致流产、胎儿感染、胎死宫内，甚至引起孕产妇死亡。     

X线诊断胃癌患者的临床应用价值研究

目的:对胃癌患者应用X线进行诊断的临床价值展开观察与研究.方法:选取54例来该院接受诊治的胃癌患者为例,对其展开X线检查,并将检查结果与手术病理学诊断结果进行对比.结果:相比于手术病理学诊断结果,应用X线检查患者时,2例发生漏诊,1例误诊,诊断准确率为94.4％ (51/54).此外,在经X线确诊的51例胃癌患者中,肿块型胃癌有7例,蕈伞型胃癌有9例,溃疡型胃癌有35例.结论:通过应用X线检查方法,可有效促进胃癌诊断准确率的提高,为临床治疗提供可靠参考.     

当归拈痛汤对湿热痹阻型膝骨性关节炎临床疗效及TNF-α、IL-1、NO的影响

目的:观察与评估当归拈痛汤治疗湿热痹阻型膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的疗效及对关节液肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)及一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响.方法:将106例湿热痹阻型KOA患者按随机、对照的原则分为观察组和对照组,每组53例.观察组给予当归拈痛汤治疗,对照组给予盐酸氨基葡萄糖片治疗,两组均持续治疗4周.比较两组临床疗效、视觉模拟疼痛评分(visual analogue scales,VAS)、西安大略和麦克马斯特大学(Western Ontario and McMaster universities,WOMAC)骨关节炎指数评分量表评分,ELISA法检测关节液中TNF-α、IL-1、NO的含量.结果:观察组总有效率[88.79％(46/52)]与对照组总有效率[88.70％(45/52)]比较,差异无统计学意义(P>0.05).治疗后,两组VAS、WOMAC评分,TNF-α、IL-1、NO水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且上述指标观察组低于照组(P<0.05).结论:当归拈痛汤可缓解湿热痹阻型KOA患者疼痛症状,改善膝关节活动功能,且可干预炎症反应,下调关节液中TNF-α、IL-1、NO含量,从而提高综合疗效,可能是治疗KOA的潜在作用机制.