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河北省虫媒病毒分离鉴定 总被引:12,自引:0,他引:12
目的 研究河北省蚊虫携带虫媒病毒情况。方法 在蚊虫孳生地采集标本液氯保存,按照20—30只/组经无菌处理后研磨,研磨液离心后接种C6/36细胞,连续三代观察致细胞病变情况;对细胞病变阳性的分离物,进行血清学和分子生物学鉴定。结果 在河北省涉县两个村共采集蚊虫1310只,分46组进行处理,共获得13株阳性分离物,其中两株分离物经间接免疫荧光检测提示为甲病毒属成员,用甲病毒属特异性引物RT-PCR扩增阳性,经核酸序列测定证实该序列与Getah病毒(AY702913.1)同源性最高(98%),初步鉴定为Getah病毒,其他病毒分离物尚在鉴定。结论 本研究从河北省蚊虫标本中分离到Getah病毒,这是我国内陆地区首次分离到该病毒。 相似文献
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狂犬病毒TaqMan PCR检测方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
目的建立检测狂犬病毒(RV)核蛋白(N)基因片段的TaqMan PCR检测方法。方法针对RVN基因保守区域设计特异性引物与探针;优化检测体系中引物与探针的浓度;以体外转录的RV完整的N基因RNA作为定量分析模型;考核检测体系灵敏性、特异性、稳定性;初步用于RV的检测。结果引物和探针具有良好的特异性,使用浓度分别为0.6μmol/L和0.2μmol/L,可检测到2700个RNA拷贝数,较传统RT-PCR检测方法敏感性提高了10倍;同一样品Ct值重复检测5次,变异系数均〈5%,表明检测体系具有较好的稳定性;通过所建立的检测体系,绘制了以模板拷贝数为分析指标的RV定量检测标准曲线,对实验室内保存毒株的检测结果显示TaqMan PCR检测比普通PCR检测更快捷、敏感。结论所建立的RV TaqMan PCR可以用于RV的实验室检测,并且比普通PCR检测方法更灵敏、特异。 相似文献
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在临床疾病的发生、发展、转归过程中 ,心理因素占有重要地位 ,起着不容忽视的中介作用。《灵枢·口问篇》提出 :“悲哀忧愁则心动 ,心动则五脏六腑皆摇。”由此可见 ,疾病的变化与人的心态和心理活动息息相关。若在保健康复环节上创造条件 ,运用心理护理手段 ,引导患者积极的美感心理发生和发展 ,不仅能帮助患者战胜消极心理 ,而且对于建立新型的医患关系 ,顺利实施诊疗手段 ,提高医疗护理质量具有积极作用 ,从而好地促进病人身心康复。1 重视心理活动规律 ,巩固前期医疗效果由于人的机体素质不同 ,性格差异 ,疾病阶段不同 ,患者的心态也… 相似文献
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中医临床基础学科的建立 ,标志着中医学又向前迈进了一步。然从其所设定的学科内容来看 ,还须有一个质的飞跃 ,才能符合今天所建立的中医临床基础学科的要求。而当务之急是本学科的教材建设和人材培养。故就此两方面问题谈谈自己的看法。1 中医临床基础学科的特性及教材建设中医临床基础学科的建立 ,其本身就具有既不同于中医基础理论学科 ,又区别于临床学科的特殊性。这一特殊性体现在教材方面 ,应是基础理论与临床技能的紧密联系 ,是基础理论直接应用于临床 ,指导临床辨证施治的具体体现。从其学科所设定的教学内容来看 ,虽然伤寒、温病… 相似文献
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辛德毕斯病毒荧光PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立辛德毕斯病毒核酸的SYBRGREENΙ荧光PCR检测方法。方法根据辛德毕斯病毒基因组核苷酸序列特性设计引物。病毒在BHK21细胞上繁殖扩增后提取RNA和逆转录。以病毒cDNA为模板分别进行SYBRGREENΙ荧光PCR和常规RTPCR扩增,并对SYBRGREENΙPCR法的灵敏性、特异性、重复性等进行分析。结果最适退火温度为55℃,最适引物浓度为0.5μmol/L。用该方法检测2株SIN病毒株YN87448和XJ160结果均为阳性,而对其他虫媒病毒如甲病毒属Geta病毒、乙脑病毒、Batai病毒、Banna病毒、环状病毒及西方马脑炎病毒合成模板检测时结果均为阴性。根据病毒空斑形成实验结果,将YN87448病毒悬液进行连续10倍稀释后分别用常规PCR和SYBRGREENΙ荧光PCR方法进行检测。结果SYBRGREENΙ荧光PCR检测敏感性比常规PCR方法要高近100倍,检出下限可达0.1PFU/ml。对模拟感染的人血清标本检测结果表明人血清中成分对检测体系无明显影响。对151份不明原因发热和病毒性脑炎患者的血清或脑脊液标本进行检测,结果检测到6份标本阳性。结论本实验建立了辛德毕斯病毒特异性核酸的SYBRGREENΙ荧光PCR检测方法,实验结果显示了较好的特异性、广谱性,初步证实可应用于临床标本的检测,为将来用于临床和调查辛德毕斯病毒在我国的流行情况提供了新的技术手段。 相似文献
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云南省虫媒病毒的分离鉴定 总被引:10,自引:0,他引:10
目的了解云南省部分地区虫媒病毒的存在及流行情况。方法2002年和2004年从云南省5个县市采集蚊虫,经研磨、细胞接种分离病毒,通过实时荧光PCR、免疫荧光试验等方法进行鉴定,并对病毒的分子生物学特性进行分析。结果采集到4810只蚊虫,分离到12株致BHK细胞病变的病毒,经实时荧光PCR、免疫荧光试验等鉴定为乙脑病毒。新分离病毒DL0437属于基因Ⅲ型乙脑病毒。结论2002年和2004年在云南5个县市采集4810只蚊虫中分离到12株乙脑病毒,是近年来在云南省首次分离到基因Ⅲ型乙脑病毒。 相似文献
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