论新形势下医学检验专业数学课的教学

结合笔者的工作实际及教学现状,提出了适合检验医学专业数学课程教学的方法。     

痰标本分离革兰阴性杆菌整合子分布及分型研究

目的研究临床痰标本分离革兰阴性杆菌中整合子的分布与分型。方法用Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类3种整合酶基因通用引物扩增398株痰标本分离革兰阴性杆菌的相应基因;用琼脂对倍稀释法检测临床菌株的MIC。结果Ⅰ类整合酶基因总阳性率为48.7%,Ⅱ类整合酶基因总阳性率为2.3%,未检出Ⅲ类整合酶基因阳性菌株,Ⅰ类和Ⅱ类整合子同时阳性率为1.5%。肠杆菌科细菌Ⅰ类整合酶基因阳性率为69%,Ⅱ类整合子阳性率为2.7%;非发酵菌中Ⅰ类整合子阳性率为34%,Ⅱ类整合子阳性率为1.8%。在肠杆菌科细菌中,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株对多种抗菌药物的耐药率均明显高于阴性菌株。结论在痰标本分离的革兰阴性杆菌中,肠杆菌科细菌Ⅰ类整合子的携带率高于非发酵菌,Ⅱ类整合子则无明显区别。     

739株革兰阴性杆菌中I类整合子的分布及其基因盒结构分析

目的 了解I类整合子在合肥地区革兰阴性杆菌中的分布状况,研究其整合的基因盒结构。 方法 PCR扩增I类整合子整合酶基因及其基因盒可变区和3′保守区,可变区产物进行测序分析。 结果 739株临床分离革兰阴性杆菌中,I类整合酶基因（IntI1）阳性菌株为399株（54.0%）;随机抽取的80株IntI1阳性菌中64株扩增出长度不等的9种基因盒产物,它们在所测的细菌中大致有17种不同的组合模式;77株扩增出3′保守区预期产物。出现频率较高的2种I类整合子基因盒可变区产物分别为dfrA15和aadA2,片段最长的基因盒可变区产物为aadB、aadA1和cmlA6。 结论 I类整合子在合肥地区临床分离革兰阴性杆菌中广泛分布,其整合的基因盒种类多样且在不同菌株中呈多种组合模式。     

XE-2100血细胞分析仪异常细胞报警信息的可信性分析

目的 探讨Sysmex XE-2100血细胞分析仪在白细胞分类时对异常细胞报警信息的可信性。方法通过对200例XE-2100血细胞分析仪报警有原始细胞（Blasts）、未成熟粒细胞（Imm Gran）、异形淋巴细胞（Atypical Ly）、有核红细胞（NRBC）的全血标本作手工血涂片，经瑞特-姬姆萨染色后用显微镜目测法分类（金标准）比较。以无异常报警的200例标本为对照组。分析仪器对异常细胞报警的可信性。结果 仪器Blasts、Imm Gran、Atypical Ly和NRBC报警的阳性预测值分别为70．3％、63．7％、62．0％和60．0％。结论 XE-2100血细胞分析仪对异常细胞的检出性能较高，检测结果有异常细胞报警的标本均应该进行手工涂片染色、显微镜复检。     

血培养阳性分离菌的分布和耐药性分析

目的了解血培养主要病原菌的分布及其耐药性。方法采用MicroScan WalkAway 96 PLUS及VITEK2 compact全自动微生物鉴定及药敏系统对阳性分离菌进行鉴定及药敏试验。按CLSI 2013标准采用WHONET5.6软件进行耐药性分析,IBM SPSS 20.0进行耐药率的比较。结果 503株非重复分离菌中,革兰阳性菌占57.8%,革兰阴性菌占36.0%,真菌占6.2%。凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）、大肠埃希菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌（金葡菌）和肺炎克雷伯菌是主要分离菌。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为32.3%和71.7%。分离自ICU患者的CNS对多种抗菌药物的耐药率高于非ICU患者分离株（P〈0.05）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用头孢菌素类抗生素耐药率较高,但对哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南和阿米卡星耐药率低。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率高。念珠菌属对抗真菌药物耐药率低。结论血培养阳性分离菌分布广泛,不同病原菌间耐药性亦不相同。应加强对血培养病原菌分布和耐药性的监测。     

皖南地区大肠埃希菌与克雷伯菌属ESBLs表型及基因型的检测

目的研究安徽省南部地区3所医院临床分离株中大肠埃希菌和克雷伯菌属超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产生情况、耐药性及其基因型分布。方法平皿琼脂对倍稀释法测定79株大肠埃希菌和克雷伯菌属对13种抗菌药物的耐药性;采用2005年CLSI推荐方法对收集菌株进行ESBLs确证试验;用PCR方法对产ESBLs菌株使用8对引物进行β-内酰胺酶基因的扩增,扩增产物回收纯化后测序。结果皖南地区3所医院临床分离大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs株的检出率分别为61.5%和45.0%,ESBLs产生株对CRO、CTX、CAZ、CIP、LEV的耐药率分别为81.0%、81.0%、47.6%、71.4%、50.0%,对亚胺培南和美罗培南100%敏感;PCR及测序结果显示产ESBLs菌株中,大肠埃希菌CTX-M1型12株（50.0%）,CTX-M13型11株（45.8%）,OXA1型11株（45.8%）,TEM型19株（79.2%）;克雷伯菌属CTX-M1型4株（22.2%）,CTX-M13型10株（55.6%）,OXA1型、OXA2型、TOHO1型各1株,TEM型9株（50.0%）。结论皖南地区3所医院临床分离大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs株的检出率和对头孢菌素类及喹诺酮类的耐药率均达到相当高水平,应加强对产ESBLs株的临床监测,同时要加强临床对抗菌药物的合理使用。     

多重耐药柠檬酸杆菌β内酰胺酶的基因型分布

柠檬酸杆菌是较常见的革兰阴性杆菌，常引起免疫力低下宿主的严重的医院内感染。近年来，随着第三、四代头孢菌素在临床上的广泛使用，许多医院柠檬酸杆菌的分离率在逐年上升；同时，多重耐药的柠檬酸杆菌已成为医院感染的重要病原菌。迄今研究显示，柠檬酸杆菌对这些抗菌药物的耐药机制除涉及外膜通透性降低、药物靶位修饰和主动外排外，主要是高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（extendedspectrum β—lactamases，ESBLs），另外也有对碳青霉烯类抗生素耐药的报道，给临床治疗带来很大困难。因此加强对其耐药性监测及β内酰胺酶耐药基因的研究，了解基因类型分布及流行情况很有必要。鉴于国内有关柠檬酸杆菌耐药机制的研究文献报道不多，笔者对从临床感染患者分离到的51株柠檬酸杆菌的敏感性以及β内酰胺酶的表型和基因型进行了研究，以期为临床合理应用抗菌药物、控制产β内酰胺酶菌株的产生及流行制订有效的防治措施提供依据。     

金黄杆菌临床分离株β-内酰胺酶及耐药性分析

目的了解临床分离的金黄杆菌耐药特性和β-内酰胺酶产生情况。方法琼脂稀释法检测50株金黄杆菌对18种抗生素的MIC,改良的三纸片增效法和四槽、五槽三维试验法检测金黄杆菌金属β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)和AmpC酶。结果50株金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为92%、88%,氨曲南为92%,阿米卡星和β-内酰胺抗生素的耐药率均大于40%,显示具有高度耐药性。加替沙星、左氧氟沙星和利福平的MIC90分别为4、8、8μg/ml,表现出很强的抗菌活性。环丙沙星、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也具有良好的抗菌活性。50株金黄杆菌MBL、ES-BL、AmpC酶产酶率分别为68.0%、26.0%、0.0%。脑膜败血性金黄杆菌中产MBL73.7%,同时产MBL和ESBL42.1%,单产ESBL5.3%。产吲哚金黄杆菌MBL产酶率80.0%。结论金黄杆菌具有高度的多重耐药现象和MBL、ESBL高检出率,应该合理使用抗生素,保护易感人群,准确、及时地做好病原学诊断和耐药性监测并给予正确的治疗。     

肺炎克雷伯菌Ⅱ类整合子的分布及结构分析

目的 研究肺炎克雷伯菌中Ⅱ类整合子携带率,分析Ⅱ类整合子基因盒结构.方法 采用PCR法检测98株临床分离肺炎克雷伯菌中的Ⅱ类整合酶基因,检测Ⅱ类整合酶基因阳性菌株中的intI1、sat、ereA、aadA1、orfX、dfrA1、tnsE、tnsD、tnsC、tnsB、tnsA基因.结果 在1株肺炎克雷伯菌中检出Ⅱ类整合酶基因,阳性率为1%;该菌株同时携带intI1、sat、aadA1、orfX、dfrA1、tnsE、tnsD、tnsC、tnsB、tnsA基因;Ⅱ类整合子的结构与公布的AY639870.1、DQ176869.1、DQ275532.1、DQ268533.1序列中的Ⅱ类整合子结构完全相同.结论 肺炎克雷伯菌中Ⅱ类整合子的携带率较低,Ⅱ类整合子结构无新的变化.