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实验动物病原学感染实验在兽医科学和生物制品研究等方面发挥越来越大的作用。我们对从2009年1月1日至2014年4月正式发表在美国国家生物技术信息中心(NCBI)的以禽类进行感染试验的科研报告进行了文献汇总,重点关注动物福利,尤其是安乐死方面。通过对247项研究报告的调查,虽然几乎所有报告都声称通过其所在单位的动物实验和管理福利委员会的审核,但同类感染实验中采用的临终终点的判定和安乐术不尽相同,麻醉途径和剂量也缺乏标准。文章对目前国际上报道的安乐术的特点也做了比较。 相似文献
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40周HBK-SPF鸭胃肠道5-羟色胺细胞的免疫组织化学定位 总被引：1，自引：0，他引：1
目的应用5-HT抗血清研究40周HBK-SPF鸭胃肠道内的5-HT免疫活性细胞的分布密度及形态，并探讨其分布型的成因及细胞形态与功能的关系。方法免疫组织化学ABC法。结果5-HT细胞主要分布于十二指肠及其以下部位，腺胃偶见，分布密度近似呈波浪形，其中以直肠分布密度最高，小肠呈U形分布。5-HT细胞的形态多样，呈圆形、椭圆形、锥体形等，主要分布于胃肠粘膜上皮之间、上皮基部、固有膜以及腺泡上皮之间等。结论40周HBK—SPF鸭5-HT细胞分布型的形成与各部位消化功能有关；根据其形态，我们认为40周HBK—SPF鸭胃肠道内5-HT细胞具有内、外分泌两种功能。 相似文献
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目的制备能检测不同MHC-B单倍型MHC I类蛋白的多抗血清,并对马立克氏病(MD)抗性较强的BW/G3系鸡群(MHC B2单倍型)和敏感性较强的BW/G7系鸡群(B19单倍型)接种马立克氏病毒(MDV)后,利用Western blot技术半定量分析MHC I类蛋白表达量的差异。方法从BW/G3系鸡脾组织cDNA中PCR扩增BF基因的保守序列第4～8外显子,克隆入原核表达载体pET-30a,构建重组质粒。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达,经SDS-PAGE初步纯化,免疫新西兰兔,制备兔抗血清。以高效价的兔抗血清为一抗,对BW/G3和BW/G7系健康鸡和MDV攻毒后11周的脾组织进行Western blot,利用ImageQuant 5.2软件半定量分析其中MHC Ⅰ类蛋白含量的变化。结果含BF部分基因的重组质粒在大肠杆菌中表达,其特异性兔抗血清能检测到不同MHC-B单倍型鸡的MHC Ⅰ类蛋白。BW/G3和BW/G7系鸡群感染MDV后,MHC Ⅰ类蛋白含量全部上调,正常组和攻毒组中BW/G7系的表达量均极显著高于BW/G3系(P≤0.01,P≤0.001)。结论成功制备了能检测MHC B2、B6和B19单倍型鸡的MHC I类蛋白特异性多抗血清;MDV攻毒后期,抗性鸡BW/G3和敏感鸡BW/G7脾组织中MHC I类蛋白的表达量都发生上调,且易感鸡中的表达量高于抗性鸡,为进一步揭示病毒性肿瘤病的致病机理提供了思路。 相似文献
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目的分析不同周龄SJ5-SPF鸡脏器系数、肠道长度和体尺变化趋势及性别差异,为实验动物性别选择提供实验数据。方法选用4周、20周、25周和40周SJ5-SPF鸡,分别测定体重、15个主要脏器重量、5个主要肠道长度和6个主要体尺,计算脏器系数,并对各周龄雌、雄SJ5-SPF鸡体重、脏器系数、肠道长度和体尺进行比较。结果体重在不同周龄雌雄之间差异均有显著性(P0.01),所测得的脏器系数各周龄雌、雄之间均存在不同程度差异;在肠道长度中,空回肠和直肠在以上四个周龄中雌雄之间差异无显著性,其余肠道长度在部分周龄雌、雄之间有明显差异。在所测定的体尺中,体长、胫长、骨盆宽、胸深和胸宽雌、雄之间在上述四个周龄中有2个或3个周龄存在明显差异。结论周龄和性别对SJ5-SPF鸡的脏器系数、肠道长度和体尺都有影响。 相似文献
5.
马立克氏病(Marek's disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)引起的一种鸡淋巴组织增生性疾病,以免疫抑制、多发性神经炎、内脏和组织中形成T淋巴瘤为特征[1].根据血清学不同,MDV可分为致瘤性的Ⅰ型MDV、非致瘤性的血清Ⅱ型以及可作为疫苗用的火鸡疱疹病毒血清Ⅲ型(HVT)[2].MDV在体内感染可分为4个时期:早期溶细胞感染期,感染后3～7 d,病毒处于生产性感染,主要感染法氏囊;潜伏期,感染病毒7～10 d,病毒复制减退,主要存在于胸腺的CD4+T淋巴细胞内;第2次溶细胞感染期,感染后14～21 d,MDV复制活化;肿瘤细胞增生期,淋巴瘤生成与否取决于宿主的遗传易感性及病毒毒力[3].所有品系鸡均可感染MDV,但存在抗性差异,与主要组织相容性复合体(MHC)所在的免疫遗传基因[1]及机体的免疫系统密切相关[4].近年来随着禽免疫学的发展,MDV感染引起的细胞免疫反应及细胞因子在免疫调节中所起的作用已成为研究MD的热点. 相似文献
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目的 建立鸡生化标记检测方法 ,用于SPF鸡群的遗传学检测. 方法 参照国家标准<实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法 >,应用乙酸纤维素板,建立SPF鸡生化标记位点的检测方法 .结果 共有7种同工酶可以用于鸡的生化检测,其中血红蛋白-β链(Hbb)的检测组织为溶血素,转铁蛋白酶(Trf)的检测组织为肺脏,碳酸酐酶-2(Car2)的检测组织为肝脏或溶血素,异柠檬酸脱氢酶-1(Idh1)、苹果酸酶-1(Mod1)、碱性磷酸酶-1(Akp1)检测组织为肾脏,酯酶-1(Es1)检测组织为血清.结论 建立了鸡生化标记检测方法 ,并对BWEL-SPF鸡群和Line-22鸡群进行了分析,发现都存在多态性. 相似文献
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目的检测猪2型圆环病毒(PCV2)全基因组原核表达产物的免疫原性。方法根据PCV2JXL株序列(GenBank登录号AY491310),设计合成引物,利用多聚酶链式反应(PCR)从含有PCV2接种猪肾细胞PK15中扩增了Cap蛋白的氨基端片段(737-421nt),克隆入上游带有谷光苷肽-S-转移酶的原核表达载体pGEX-6p-1中,获得重组质粒pGEX-PCV737-421。PCV2Cap蛋白羧基端(426-37nt)和Rep蛋白已在过去的研究中分别融合表达。利用IPTG对3种重组大肠杆菌BL21进行诱导,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE)以及对PCV2阳性猪多抗血清的蛋白免疫印迹试验,在此基础上,将3种SDS-PAGE分离粗纯的重组表达产物碾碎后分别免疫BALB/c小鼠,用获得的抗鼠血清与PCV2病毒感染PK15细胞做间接免疫荧光抗体试验(IFA)。结果PCV2Cap蛋白的氨基端片段能在大肠杆菌中表达,且Cap蛋白羧基端和Rep蛋白的原核表达产物都能在免疫印迹试验中被PCV2阳性猪血清检测出特异性条带,重组蛋白免疫鼠血清可在IFA试验中观察到特异性的荧光分布,即检测到培养细胞中的病毒抗原。结论PCV2全基因组都可以用原核系统高效表达,且表达产物具有免疫原性。 相似文献
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目的利用大肠杆菌系统表达对多种禽病存在敏感性差异的B19和B21单倍型鸡NK细胞抑制性受体B-NK基因,并制备其多克隆抗体。方法分别提取B19和B21鸡外周血淋巴细胞总RNA,采用反转录PCR法扩增B-NK基因(分别命名为B-NK19和B-NK21),克隆至pET-30a原核表达载体中,经酶切和PCR鉴定构建重组质粒。转入到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析外源蛋白的表达。将含有与组氨酸(His)标签融合表达的外源蛋白胶条切下,多点皮下免疫新西兰兔,分别制备B-NK19和B-NK21特异性多克隆抗体。利用Western blot法鉴定其组织相容性复合体(MHC)单倍型特异性。结果成功构建了原核表达重组质粒pET-B-NK19和pET-B-NK21,利用IPTG在37℃诱导4 h后目的蛋白获得表达,免疫5次后收获兔多克隆抗体,Western blot表明B-NK19和B-NK21蛋白存在免疫学交叉反应和部分特异性。结论对多种禽病具有敏感性差异的MHC单倍体型B19和B21鸡的NK细胞抑制性受体B-NK蛋白存在抗原反应交叉性,其多克隆抗体具有部分特异性。 相似文献
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组织相容性复合体在实验鸡中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
鸡主要组织相容性复合体(MHC)基因位于鸡16号染色体上,具有高度的多态性。现已发现,不同MHC-B单倍体对各种疾病的抗性不同。本文主要介绍了鸡MHC的结构特点、鸡MHC与抗病性的关系、鸡MHC检测方法的研究进展以及其在鸡抗病育种中的应用前景。 相似文献
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