海南省细菌耐药监测网点单位2013—2020年细菌耐药性变迁

目的分析2013—2020年海南医学院第二附属医院细菌耐药监测的数据,为临床合理选择抗生素提供参考依据。方法从痰液、中段尿、血液、肺泡灌洗液、腹腔积液、伤口脓液和胸腔积液等送检标本中分离、鉴定细菌和进行药敏试验,利用WHONET5.6软件进行统计分析。结果2013—2020年临床标本来源主要是痰液、中段尿和血液,共分离细菌65921株,其中革兰阴性杆菌占65.5%,革兰阳性球菌占23.5%。CTX/CRO-R-ECO、CTX/CRO-R-KPN、QN-R-ECO、CR-ECO和CR-KPN检出率均呈下降趋势,CR-ABA呈缓慢上升趋势。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药率高,但呈明显下降势头;肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物耐药率高且呈明显上升势头;大肠埃希菌对复方新诺明耐药率及肺炎克雷伯菌对庆大霉素和复方新诺明的耐药率高且基本保持平稳的态势;阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌、摩根摩根菌和普罗威登菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率低;铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的耐药率低;假鼻疽伯克霍尔德菌对常规抗菌药物的耐药率低于6.2%,MRSA、PRSP和VREM均呈缓慢下降的趋势;金黄色葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌对庆大霉素和红霉素耐药率均呈逐年下降趋势。结论2013—2020年临床分离菌株重要耐药菌检出率高,但呈现逐渐下降态势。应加强对重要耐药菌的检出率、多粘菌素B耐药率和假性耐药率等数据的监测和复核,为临床提供科学性和合理性的流行病学监测数据。     

携带人OCT4A基因的慢病毒载体的构建及其稳定转染K562白血病细胞株的建立

本研究旨在构建共表达人OCT4A与绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒载体pLVX-OCT4A-ZsGreen1,并通过感染获得稳定表达重组质粒的白血病K562细胞系,观察OCT4A在其中的表达。根据Gen Bank数据库提供的OCT4A mRNA序列,合成编码mRNA基因的特异性引物序列,通过RT-PCR技术扩增出OCT4A全长片段,克隆至pCR-Blunt载体。将OCT4A DNA片段酶切回收后克隆至经EcoR1酶切线性化的慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1,构建pLVX-OCT4A-ZsGreen1慢病毒重组质粒,利用测序鉴定所构建的重组载体是否正确。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒并感染人白血病细胞系K562,通过流式细胞仪分选获得稳定表达的白血病细胞系,应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测稳定转染细胞系的OCT4A mRNA和OCT4A蛋白表达。应用CCK-8法和平板细胞克隆形成试验测定OCT4A对K562细胞增殖能力的影响。结果表明,经限制性内切酶检测及基因测序证实成功构建了携带OCT4A基因的重组慢病毒;包装病毒颗粒超速离心后病毒滴度达（1.43±0.25）×10^8U/ml;病毒感染K562细胞后经流式细胞仪分选获得GFP＋细胞,实时定量PCR及Western blot证实病毒感染后OCT4A基因及蛋白的表达可有效上调;CCK-8法及平板集落形成试验显示病毒感染的K562细胞体外增殖活性明显升高,与对照组相比均有统计学差异（P〈0.05）。结论：成功构建了表达OCT4A基因的慢病毒载体,并且获得可稳定上调OCT4A表达的K562细胞株。     

突发重大公共卫生事件中的国家药品抽检工作分析与建议

摘要：新型冠状病毒肺炎（COVID-19）等突发重大公共卫生事件严重威胁人类生命健康。国家药品抽检是药品质量监管的重要手段,在打击假冒伪劣药品,保障公众用药安全方面发挥重要作用。通过梳理国家药品抽检情况,总结COVID-19疫情中的工作状况,分析下一步面临的形势,建议扬长避短,因势利导,加强工作防护,优先抽检防控用药,关注严重风险,严打假劣药品,及时信息公开,以便在突发重大公共卫生事件阻击战中更好发挥药品抽检的作用。     

急性脊髓损伤模型大鼠蛋白质组学研究：iTRAQ技术的验证

背景：同位素标记相对和绝对定量（Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）质谱分析技术依据串联质谱中信号离子表达质荷比峰值的不同来研究相关对应蛋白质的信息。目的：建立急性脊髓损大鼠模型,观察其脑脊液差异蛋白谱,从微观分子水平研究急性脊髓损伤后继发性损伤的机制及有效治疗方法。方法：建立SD大鼠急性脊髓损伤模型,取脑脊液应用iTRAQ技术鉴定SD大鼠急性脊髓损伤后脑脊液的差异蛋白质。结果与结论：共鉴定蛋白数722个,差异表达蛋白107个：下调的差异蛋白有63个,上调的差异蛋白数是44个。其中相关神经再生的差异蛋白19个：上调14个,下调5个;调节神经再生的差异蛋白7个。实验中检测到的多种差异蛋白及表达明显的神经再生因子可能作为急性脊髓损伤的生物标记物或可能作为临床管理监测急性脊髓损伤的损伤进程、靶向治疗及评估疗效的强有力证据。     

维持性血液透析患者炎症状态与血清热休克蛋白70的关系

目的探讨维持性血液透析（MHD）患者热休克蛋白70（HSP70）检测与炎症状态的关系。方法将MHD患者92例根据超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平分为2组：非炎症组（hs-CRP〈3mg／L）58例;炎症组（hs-CRP≥3mg／L）34例。检测2组患者血清前白蛋白（PA）、血白蛋白（Alb）、hs-CRP、血红蛋白（Hb）、HSP70、铁蛋白、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）等。结果尿毒症患者血清HSP70与hs-CRP、IL-6、TNF-α、铁蛋白等炎症指标无明显相关性;与Hb、Alb、总胆固醇等营养指标也无相关性。非炎症组透析前HSP70水平较低,透析后迅速升高（P=0．013）;而炎症组透析前后的HSP70水平差异无统计学意义（P=0．871）。结论炎症状态可能是导致炎症组HSP70升高的原因;但HSP70不能反映MHD患者是否存在慢性炎症状况,也不能反映其蛋白质营养状态。透析前、后HSP70水平检测可反映机体抗应激反应能力。     

脑动脉瘤患者基于偏好的生活质量研究

背景和目的:功能预后量表是评估脑动脉瘤患者生活质量(QO L)和预后的经典方法。然而,这种方法仅评估与Q OL有关的有限的几方面。另一种可供选择的测试方法为基于偏好的QOL评分,这种方法综合了所有对Q OL有影响的因素,为患者评价自身健康状况提供了综合性的个体化方法。基于偏好的Q OL的另一个优点在于它将决策分析和成本-效益分析合为一体。方法:对176例脑动脉瘤门诊患者采用4种基于偏好的Q OL分析方法测量其Q OL:①标准概率法;②时间交换法;③视觉模拟量表;④支付意愿。用格拉斯哥预后量表(G O S)、R akin量表和Barthel指数测量…     

来氟米特联合中药治疗慢性进展性IgA肾病的临床研究

目的观察自拟益肾化瘀方配合来氟米特治疗慢性进展性IgA肾病的临床疗效。方法将确诊为IgA肾病的患者45例随机分为中药组、西药组和中西医结合组各15例,中药组予以自拟益肾化瘀方治疗,西药组予以来氟米特治疗,中西医结合组在来氟米特治疗基础上联合自拟益肾化瘀方治疗,观察3组疗效。结果治疗6个月后总有效率中药组80%,西药组71%,中西医结合组93%。各组治疗后24 h尿蛋白均显著改善(P0.01或0.05),中西医结合组更明显(P0.05)。结论自拟益肾化瘀方配合来氟米特治疗IgA肾病,近期降尿蛋白疗效显著,具有较好的耐受性及安全性。     

对郭振荣、盛志勇等"四项抗感染错误实验"的科学剖析

本文所涉及的“四项抗感染实验研究”是发生在十年前的事件，其中心内容是部分烧伤医生和科研工作者试图通过几个非系列性的试验研究从烧伤创面感染来否定湿润烧伤膏的药效作用。事件至今虽有十年了，但湿润烧伤膏的疗效已被公认。据统计，每年全国各家医院成功应用湿润烧伤膏治疗大面积烧伤病人超过35万余例。大量严重烧伤病人治愈成功的事实以及大量临床和基础研究试验也都证明了这几项研究的片面性和错误结论。这四项研究从设计思路、研究目标等方面不仅带有主观意愿，而且其研究方法和结果明显存在主观控制实验结果的嫌疑，缺乏严谨的科学态度。为了避免继续在社会和学术界产生影响，现在对这四项错误实验进行剖析，其目的是提醒和教育广大医疗和研究人员，在今后的研究工作中不能像所剖析的作者那样，要严格按科学实验的基本原则和规律开展工作，避免给患者带来更大的伤害和遗憾。     

p，p＇-DDE对大鼠睾丸Sertoli细胞雄激素结合蛋白、转铁蛋白和抑制素B mRNA表达的影响

目的：研究p，p＇-DDE对大鼠睾丸Sertoli细胞雄激素结合蛋白（ABP）、转铁蛋白（Tf）和抑制素B（INH B）转录水平的影响。方法：建立Sertoli细胞体外培养模型，以不同浓度（10、30、50μmol／L）的p，p＇-DDE染毒细胞，RT—PCR方法检测ABP、Tf和INH B mRNA的表达水平。结果：①随着p，p＇-DDE染毒剂量的加大，引起ABP表达上调的同时Tf和INH B mRNA表达下调，且均呈剂量依赖性关系（P〈0．05）。②ABP、Tf和INH B的相关性分析表明，ABP与Tf、INHB均呈负相关（r=-0．3913，P=0．0325；r=-0．2352，P=0．0158），而Tf和INHB呈正相关（r=0．4516，P=0．0047）。结论：p，p＇-DDE对大鼠睾丸Sertoli细胞有生殖毒性作用，干扰ABP、Tf和INHB的转录水平，从而损伤支持细胞的功能，导致生殖障碍。     

α硫辛酸对骨质疏松的保护作用及研究进展

α硫辛酸是一种具有抗氧化作用的二硫醇活性化合物,能够保护骨细胞、成骨细胞,抑制破骨细胞生成和活性;同时,α硫辛酸可增加骨密度,提高骨质量。α硫辛酸抗骨质疏松的作用与抑制氧化应激、干扰NF-κB活化、下调RANKL和激活Wnt信号通路等有关。细胞和动物实验显示α硫辛酸能够促进骨形成和抑制骨吸收,具有治疗骨质疏松的作用,但是有关的临床研究很少,α硫辛酸最佳治疗剂量、疗程以及与其他抗骨质疏松药物联合治疗是否具有累加效应,需要进一步的研究证实。