应用FISH技术检测原发性肺癌P^53抑癌基因异常及其临床意义

目的　探讨原发性肺癌 P53缺失 /异常表达及临床意义。方法　应用 FISH和免疫组化技术检测 6 5例肺癌间期核中 P53基因异常。结果　 P53缺失率为 18.4 % (12 / 6 5 ) ,分化好比分化差者缺失率增高 (P=0 .0 0 7)。 P53蛋白阳性率随着肺癌临床分期增高呈上升趋势 (P=0 .0 4 6 ) ,与年龄、性别、肿瘤大小及分化程度等无相关性 (P>0 .0 5 )。结论　 P53基因缺失和蛋白表达与肺癌分化程度、临床分期密切相关 ,检测 P53基因缺失和蛋白表达可作为肺癌病理分级和判断预后的重要指标     

microRNA-21调节宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4的表达研究

目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染。Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达。结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P<0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高。Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。     

结直肠癌MDM2基因表达与生物学行为的关系

目的 :探讨结直肠癌MDM2癌基因异常表达与肿瘤生物学行为间的关系 ,为判断预后提供客观依据 .方法 :应用免疫组化技术检测MDM2 ,p5 3和PCNA在 72例结直肠癌的表达特点 .结果 :伴有肝转移的结直肠癌组MDM2和p5 3蛋白表达阳性率 (5 9.3%和 78.0 % )与非肝转移组 (30 .0 %和5 5 .0 % )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) .结直肠癌伴淋巴结转移组MDM2和 p5 3蛋白表达阳性率 (5 8.8%和 79.4 % )明显高于与无淋巴结转移组 (2 8.9%和 5 2 .6 % ,) ,两者间有显著的统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;有静脉侵袭组MDM2表达阳性率 (6 0 .7% )高于无静脉侵袭组 (31 .8% ) ,MDM2基因异常表达同静脉侵袭有关 (P <0 .0 5 ) .结论 :MDM 2和p5 3基因蛋白阳性率与淋巴结转移、肝转移有明显相关性 ,MDM2和p5 3联合检测对评估结直肠癌预后有重要的临床价值     

CD44s在肺癌中的表达及其意义

目的:探讨CD44s在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测117例原发性肺癌的CD44s异常表达。结果:CD44s在小细胞肺癌(SCLC)不表达,而表达于非小细胞肺癌(NSCLC)中,并且鳞癌的CD44s表达强度明显强于腺癌(P＜0.05);未发生淋巴结转移的肺癌病例中CD44s的表达明显高于已经发生转移的病例(P＜0.01);按照临床肿瘤TNM分期,早期肺癌的CD44s表达显著高于进展期肺癌(P＜0.05)。结论:CD44s对肺癌组织的病理类型、淋巴结转移、临床分期以及预后的判断是一个较好的评价指标。     

HPV多重感染在宫颈病变中的流行分布及意义

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）多重感染与宫颈病变发生、发展关系。方法应用HPV基因芯片检测技术,对287例宫颈病变患者（CINⅠ130例、CINⅡ69例、CINⅢ48例、宫颈癌40例）的宫颈液基细胞残余标本进行HPV感染基因型检测,并与组织学检测结果比较。结果287例宫颈病变中HPV感染率为89．9％（258／287）,在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌多重感染率分别为48．6％、40．3％、31．1％、27．5％,CINI与CINⅢ及宫颈癌比较,P均〈0．05;HPV最常见亚型为HPV16、HPV58及HPV52;多重感染中以二重感染常见（51／105,48．6％）,偶有五重感染（3／105,2．9％）。40岁以下者HPV多重感染率高于40岁以上者。结论宫颈HPV多重感染率有随宫颈病变程度增加有降低趋势,宫颈病变严重程度可能与HPV基因型多寡无关,而与感染HPV亚型的致病能力密切相关;40岁以下者HPV多重感染发生率高。     

肺肿瘤演进中cyclin D1、p53基因表达的实验研究

目的　探讨乙酰胆蒽 ( 2 0 MC)诱导小鼠肺肿瘤发生、发展过程中cyclinD1 和p5 3基因表达特点及其意义。方法　小鼠腹腔内注射 2 0 MC ,在不同时间段处死小鼠 ,得到肺部病变共 2 92个 ,其中上皮增生(HP) 31个 ,肺泡细胞腺瘤 (AA) 14 5个 ,乳头状腺瘤 (PA) 6 1个 ,乳头状腺癌 (PC) 5 5个及其复合性病变。应用免疫组化法检测各型病变中cyclinD1 、p5 3基因蛋白表达情况。结果　cyclinD1 癌基因蛋白在HP、AA、PA及PC中均有表达 ,分别为 86 % ( 6 /7)、87% ( 89/10 2 )、73% ( 4 1/5 6 )及 6 8% ( 17/2 5 ) ,cyclinD1 癌基因蛋白在良性病变的表达强于恶性病变 ( χ2 =5 .5 31,P =0 .0 33)。p5 3抑癌基因蛋白表达于腺癌组织、有明显异型性的细胞、肿瘤进展较晚期 ,PC、PA和AA阳性率分别为 40 % ( 16 /40 )、9% ( 6 /6 9)和 3% ( 4 /12 1) ,且分布方式不同 ,HP无表达。癌组织中p5 3基因表达明显强于各良性病变 ( χ2 =41.77,P =0 .0 0 0 ) ,各型病变中以PC的cyclinD1 、p5 3基因均阳性的比率较高 ,为 2 6 % ,HP和AA中两基因无共同表达。结论　cyclinD1 基因可能参与调控肺肿瘤发生过程 ,而p5 3抑癌基因突变则与细胞增恶、肿瘤进展等有密切关系。     

中药脐疗法治疗儿童泛发性过敏性皮肤病临床观察

近年来,笔者采用中药敷脐疗法治疗小儿泛发性过敏性皮肤病,疗效满意,现报告如下. 1 临床资料 1.1 一般资料     

c-kit与p27蛋白在胃肠道间质瘤诊治中的临床意义

目的研究c-kit和p27蛋白在胃肠道间质瘤中的表达及其与间质瘤临床病理特征的关系,为GIST诊断、预后评估提供客观指标。方法收集54例手术切除的胃肠道间质瘤标本,同时取距瘤灶>5cm的正常组织,应用免疫组织化学S-P检测肿瘤组织及正常组织中c-kit和p27蛋白的表达。结果54例胃肠道间质瘤中,c-kit和p27蛋白阳性表达率分别为94.44%和59.26%。c-kit蛋白表达水平在GIST不同分化程度、有无复发及远处转移的差异无显著性意义(P>0.05),p27蛋白表达水平在GIST不同分化程度、有无局部复发间差异有显著性(P<0.01)。结论c-kit作为特异敏感的标志物,对GIST的诊断及鉴别诊断有重要意义,而检测p27蛋白可作为评估GIST恶性程度和判断预后的重要指标。     

归脾汤加减治疗崩漏的临床体会

崩漏，又名崩中漏下《诸病源候论》，是指经血非时暴下不止或淋沥不断，前者谓之崩中，后者谓之漏下。也有称，血量多如水注之势者为崩，来势缓淋沥不断者为漏。崩与漏可以相互转化，即崩势渐缓可致漏。久漏不止也可转为崩，故统称崩漏。崩漏多发生于青春期和更年期妇女，现代医学的“功能性子宫出血”和女性生殖器炎症、肿瘤所出现的阴道出血，均属崩漏范畴。中医根据临床症状，将崩漏分为：脾虚、肾虚（包括肾阴虚）、血热、血瘀四个症型，当崩漏出现失眠健忘、心跳气短、善太息等症状时，说明患者已至心脾两虚，此时应用“归脾汤”（原方：白术、茯苓、黄芪、龙眼肉、人参、酸枣仁、当归、远志、广木香、甘草、生姜、大枣、共十二味）加减治疗，往往会收到满意的疗效。以下是笔者近十年来治疗崩漏的临床体会。     

反义miR-21抑制宫颈鳞状细胞癌CaSki细胞系生长体外研究

目的探讨敲低miR-21表达对宫颈鳞状细胞癌细胞系CaSki增殖活性与凋亡的影响。方法实时荧光定量RT-PCR法检测正常宫颈组织、CaSki细胞转染前后miR-21的表达水平,采用MTT法、流式细胞术等技术检测转染后CaSki细胞增殖活性与凋亡的变化。结果 miR-21在CaSki细胞中表达水平为正常宫颈组织的3.25倍。CaSki细胞中转染反义miR-21(AS-miR-21)可显著抑制其表达。转染后24h、48h、72h、96h,MTT检测提示10nmol与20nmolAS-miR-21转染组中细胞增殖率较对照组明显降低(P<0.05),自48h抑制作用显现,且随着转染浓度增加,抑制作用增强,呈现剂量依赖性。细胞周期检测结果显示AS-miR-21转染组的G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少(P<0.05)。AnnexinⅤ联合PI技术检测细胞凋亡,结果显示AS-miR-21转染组早期凋亡细胞率[(23.40±2.16)%]明显高于空白对照组[(5.1±2.16)%]、阴性对照组[(6.87±0.55)%](P=0.000)。结论 AS-miR-21转染可敲低CaSki细胞中miR-21表达,并有效抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡。