胸部撞击后肺组织细胞凋亡的变化及其意义

目的　探讨胸部撞击后肺损伤特点、肺组织细胞凋亡分布特征及其在肺损伤发生中的作用。方法　建立大鼠重度肺撞击伤模型 ,采用流式细胞术、免疫组化和形态学方法观察肺病理变化和细胞凋亡情况。结果　撞击侧肺 (右肺 )发生明显的出血、充血、水肿 ,光镜下可见肺组织较广泛的出血和结构破坏。对侧肺 (左肺 )伤情明显轻于右肺。伤后 2 4h双侧肺组织中细胞凋亡率均显著高于伤前水平 (P <0 .0 5 )。右肺伤后 48h迅速升高 ,72h达峰值 ,之后逐渐下降 ,伤后 1周接近伤前水平。左肺组织细胞凋亡率显著低于右肺 (P <0 .0 5 ) ,在伤后 48h达高峰 ,72h明显降低并接近伤前水平。右肺伤后 2 4h细胞凋亡以支气管、血管内皮和肺泡上皮为主 ,72h以炎性细胞为主。结论　支气管、血管内皮和肺泡上皮是应力波作用的主要部位 ,该区域发生的细胞凋亡是肺水肿及继发性肺损伤的发生的重要原因之一。     

创伤患者外周血单核细胞表型及趋化活性的研究

目的：探讨创伤病灶炎细胞积聚的分子机制,为控制创伤后炎症反应提供实验依据。方法：损伤程度评分（ＩＳＳ）≥１６分的创伤患者２０例,健康对照组１０例,用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测伤后不同时间外周血浆巨噬细胞炎症蛋白－１α（ＭＩＰ－１α）的表达水平,用Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｑａｐｕｅ梯度离心法和粘附法分离纯化单核细胞,用Ｂｏｙｄｅｎ小室法趋化实验,用流式细胞术分析单核细胞ＣＤ８６和ＣＤ６４的表达情况．     

大鼠内毒素血症时外周血及肺泡内PMN死亡方式及呼吸爆发的检测

目的 观察大鼠内毒素血症时肺组织中及外周血中性粒细胞（PMN）凋亡,坏死及功能改变的差异。方法 Wistar大鼠25只,腹腔注射内毒素（LPS）（O55：R5,5mg/kg)造成内毒素血症,分别在给予LPS前（对照）及给予LPS后2、4、8、12h（每组5只动物）取血及支气管肺泡灌洗,密度梯度法分离PMN,用流式细胞仪测定凋亡和坏死比例以及呼吸爆发功能的改变。结果 内毒素血症时,外周血和支气管肺泡灌洗液中PMN凋亡细胞比例相似,但与对照相比,外周血PMN坏死比例明显增加,呼吸爆发能力明显受抑,而支气管肺泡灌洗液PMN坏死比例显著减少,呼吸爆发能力显著增强。结论 在内毒素血症时,扣押于肺组织中的PMN在凋亡和坏死上表现出与外周血PMN不同的改变,其结果是组织中PMN存活PMN增加,并持续处于活化状态,这与PMN造成组织损伤有关。     

实验性创伤后脊髓凋亡细胞的流式细胞仪分选方法

目的：探讨创伤后脊髓凋亡细胞的流式细胞仪分选方法。方法：使用PI和Annexin V/PI检测法进行细胞凋亡的检测和分选。结果：Annexin V/PI检测法细胞凋亡的检出率显著高于PI法（P＜0．05）,并可区正常细胞,凋亡细胞和死亡细胞。结论：Annexin V/PI是目前较为理想的细胞凋亡检测和分选方法。     

促甲状腺素释放激素对失血致低血容量性休克大鼠心肺功能的影响

目的：探讨促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）抗失血致低血容量性休克的作用和对呼吸频率（ＲＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、血气参数及酸碱平衡紊乱的影响。方法：复制失血致低血容量性休克大鼠模型,观察ＴＲＨ治疗前、后及各组各时间点大鼠ＲＲ、ＭＡＰ、血气和酸碱平衡等各参数的变化。结果：ＴＲＨ组给药后ＭＡＰ即刻升高,５分钟ＭＡＰ达（１４．０±１．３）ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,较低血容量性休克（ＨＳ）组增高３２％（ｔ＝２．５３１,Ｐ＜０．０５）;休克组大鼠在伤后３６０分钟ＭＡＰ仍较低,ＴＲＨ治疗组ＭＡＰ还比休克组高４２％（ｔ＝３．０１４,Ｐ＜０．０５）。休克组和ＴＲＨ治疗组失血后ＲＲ明显减慢,ＴＲＨ给药后５分钟ＲＲ升为（８０±９）次／ｍｉｎ,较休克组升高７８％（ｔ＝３．８９２,Ｐ＜０．０１）;伤后３６０分钟,ＴＲＨ组ＲＲ达（９９±９）次／ｍｉｎ,比休克组高７１％（ｔ＝３．４５６,Ｐ＜０．０１）。ＴＲＨ降低了肺体指数和肺含水率;升高ｐＨ、ＨＣＯ－３,改善酸中毒和酸碱失衡。结论：ＴＲＨ在失血致低血容量性休克治疗过程中有重要作用,能有效减轻休克的严重程度。     

用流式细胞术监测原位心脏移植病人术后的T细胞及亚群的变化

我院于 1998年 9月成功地进行了 1例扩张型心肌病患者的原位心脏移植手术 ,我们采用流式细胞术对术前、术后淋巴细胞、Ｔ细胞及其亚群进行了详细的监测。1　资料与方法1 1　临床资料患者 ,男 ,14岁 ,汉族 ,因扩张性心肌病入院 ,符合心脏移植条件。供者 ,男 ,2 8岁 ,脑死亡者。免疫抑制剂的使用状况 :术前 1ｄ :开始给病人服用环孢素Ａ和硫唑嘌呤剂量分别为 15 0ｍｇ/次、2次 /ｄ ,3 7 5ｍｇ/次、2次 /ｄ ;手术当日晨 :环孢素Ａ 15 0ｍｇ、硫唑嘌呤 3 7 5ｍｇ静滴 ;术后当晚 :同手术当日晨 ,另加甲基强的松龙 10 0 0ｍｇ分 2次静滴。以后 …     

大鼠内毒素血症时中性粒细胞凋亡的发生规律及其与继发性肺损伤的关系

已有研究表明 ,创伤或感染时大量中性粒细胞 (ＰＭＮ)聚集、扣押于肺组织中 ,并与肺损伤的发生发展有密切关系。那么 ,扣押于肺中的ＰＭＮ转归如何 ,与循环血中ＰＭＮ有何区别 ,目前研究尚少。笔者动态观察了大鼠内毒素血症时肺组织中和循环血中ＰＭＮ凋亡的发生规律及其功能的改变 ,并分析它们与肺损伤之间的关系。一、材料与方法(一 )主要试剂和仪器ＤＭＥＭ培养基 (美国Ｇｉｂｃｏ公司 ) ,脂多糖 (ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ,ＬＰＳ ,Ｏ55Ｂ5,)、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ 1119、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ 10 83、,Ａｎｎｅｘｉｎ-Ⅴ…     

SOX2和CTBP1相互作用对非小细胞肺癌转移的意义

目的探讨SOX2和CTBP1异常表达在非小细胞肺癌(NSCLC)转移中的作用机制。方法 Western blot检测新鲜NSCLC组织及相应的癌旁组织中SOX2和CTBP1蛋白表达;免疫沉淀法分析SOX2和CTBP1在非小细胞肺癌细胞和组织中有无相互作用;用免疫组织化学染色法(IHC)检测114例NSCLC石蜡标本中SOX2和CTBP1蛋白表达;通过转染质粒分析SOX2-CTBP1相互作用的调节机制及其对非小细胞肺癌转移的影响。结果 SOX2和CTBP1的表达水平在肺癌组织中要明显高于癌旁组织(P0.05);SOX2-CTBP1能形成复合物,SOX2、CTBP1在NSCLC转移组中的表达水平明显高于非转移组的表达水平(P0.05)。CTBP1的高表达与肿瘤分期、组织分化程度﹑SOX2表达、Ki-67表达相关(P0.05)。在细胞水平,干扰CTBP1表达可下调SOX2及其下游靶基因Snail的表达,从而使H1299细胞体外迁移能力受到抑制。结论 SOX2和CTBP1的异常表达可能与NSCLC发生、发展有关,并且SOX2-CTBP1相互作用可能促进了NSCLC的侵袭转移。     

024 大鼠肺撞击组织细胞凋亡的变化及其意义

目的: 探讨肺撞击伤的特点, 比较左、右肺组织中细胞凋亡的变化, 提示细胞凋亡在肺撞击伤和继发性肺损伤中的作用. 方法: 撞击大鼠右侧胸部建立重度肺撞击伤模型, 应用流式细胞仪配合PI和FITC双染法检测伤前及伤后6、 24、 48、 72 h和1周时大鼠左、右肺组织的细胞凋亡率. 结果: 大体观察可见, 右肺受撞击区域出血、充血、水肿, 左肺除稍饱满外, 未见出血或充血等损伤. 光镜观察, 右肺受撞击区域组织结构严重破坏, 出血及水肿明显, 可见较多浸润的中性粒细胞, 左肺组织结构清晰, 仅见小血管袖套状操作及中性粒细胞浸润, 伤后24 h肺泡内开始出现水肿液. 伤后24 h双侧肺组织中细胞凋亡率均显著高于伤前水平(P<0.05). 右肺伤后48 h细胞凋亡率与24 h相当, 48 h后迅速升高, 72 h达峰值, 之后逐渐下降, 伤后1周接近伤前水平. 左肺组织中细胞凋亡持续增高, 伤后48 h达高峰, 72 h已接近伤前水平. 与右肺比较, 左肺组织细胞凋亡达到峰值较早, 但24、 48和72 h均显著低于右肺(P<0.05). 结论: 肺撞击伤后不同时间不同部位细胞凋亡的变化差异明显, 提示肺撞击伤后不同时间不同部位细胞凋亡的发生机制可能不同, 细胞凋亡可能是导致继发性肺损伤的重要因素.