微小RNA-125a-5p负性调控基质金属蛋白酶11对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的检测微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)在骨肉瘤细胞及正常成骨细胞(NHOst)中的表达特征,并探讨其通过负性调控基质金属蛋白酶11(MMP-11)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法采用荧光定量PCR分析骨肉瘤细胞及正常成骨细胞中miR-125a-5p的表达情况。体外转染miR-125a-5p模拟物(mimics)至骨肉瘤细胞系(HOS和Saos-2),并观察其对细胞增殖及凋亡的影响。通过双荧光素酶报告基因试验及Western blot验证miR-125a-5p对MMP-11的负性调控作用。结果 miR-125a-5p在HOS和Saos-2细胞中的表达均显著低于NHOst细胞(P 0. 05)。HOS和Saos-2细胞中转染miR-125a-5p mimics可显著升高细胞内源性miR-125a-5p表达水平(P 0. 05)。过表达miR-125a-5p抑制HOS和Saos-2细胞的增殖,并促进细胞凋亡(P 0. 05)。miR-125a-5p与MMP-11信使RNA(mRNA) 3'-非编码区(3'-UTR)存在互补结合位点,其通过与MMP-11结合而抑制骨肉瘤细胞中MMP-11蛋白的表达(P 0. 05)。结论 miR-125a-5p在骨肉瘤细胞中呈现低表达,过表达miR-125a-5p可通过负性调控MMP-11抑制骨肉瘤细胞的增殖,并促进细胞凋亡,提示miR-125a-5p可作为骨肉瘤新的分子治疗靶点。     

上海市结核分枝杆菌耐药性监测研究报告

目的完善上海市结核病耐药监测网络,获得国际可比性的结核病耐药率资料,评价现行结核病控制策略的效果。方法按照WHO/IUATLD的标准,采用100%诊断中心抽样方法,全市各区县结核病定点医院2004年2月—2005年1月诊治的所有新发及复治培阳肺结核病例同时纳入,并对所有分离培养阳性菌株进行菌型鉴定及利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)敏感性测试。结果共入选1076例培养阳性肺结核患者,最后获得1015例(94.3%)患者的菌型鉴定及药敏结果,其中结核分枝杆菌964例,占95.0%;非结核分枝杆菌51例,占5.0%。肺结核患者初始耐药率为15.4%(118/764),初始耐多药率为3.9%(30/764);获得性耐药率为27.5%(55/200),耐多药率为12.5%(25/200)。结论上海市结核病耐药率仍然处于国际上相对较高的水平,今后要进一步加强耐药结核病的防治工作。     

结核病复发的流行病学研究进展

结核病是我国重点控制的传染病之一.在短程督导治疗(DOTs)下,绝大多数肺结核患者可治愈,但仍有部分肺结核患者治愈后复发.由于复发结核病患者的耐药率较高、病情复杂,往往难以治愈,造成疾病的迁延不愈和进一步传播.同时,复发结核病患者往往需用二线抗结核药物治疗,而这些药物副反应发生率较高,且费用昂贵,给患者带来沉重的生理和心理负担.为此就近年来国内外学者在结核病复发水平、复发原因和复发危险因素等方面的流行病学研究进展进行综述.     

结核分枝杆菌embB基因306位点突变与耐药的相关性研究

embB基因突变，特别是其306位点（embB306）的点突变一直被认为是结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的重要原因。但是，Hazbon等对来自世界各地的1020株菌株进行分析后认为，embB306突变不直接引起结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性，而是容易产生对任何药物的耐药性。Plinke等报道，embB306位点突变只发生在乙胺丁醇耐药菌株中，从而说明该位点突变与乙胺丁醇耐药有关。可见embB306位点突变与乙胺丁醇耐药的关系还存在着较大的分歧。     

恒温扩增-防污染核酸试纸条在快速检测结核分枝杆菌中的应用

结核分枝杆菌生长缓慢的特性一直以来限制了临床对患者的诊断及治疗.为了快速准确的鉴定结核分枝杆菌,为临床诊断提供有效依据,基于分子生物学技术的诊断方法越来越多的应用到日常的检测工作中,核酸扩增试验(nucleic acid amplification tests,NAAT)自应用到结核病的早期诊断以来,就显示出其强大的优越性.它比培养的速度快,特异性高,可以在3～6 h得到结果[1].商业化的检测试剂盒更是让早期快速诊断结核病成为可能[2-3].高通量的自动检测装置虽然提高了工作效率,但是高昂的价格和实验室配套设备的要求限制了方法的使用范围.为更好的控制结核病的蔓延,临床迫切需求一种简便、快速、准确的结核病早期诊断方法.     

上海市南汇地区乡村医生结核病认知及影响因素调查

为了解辖区内乡村医生结核病防治知识知晓情况,分析其影响因素,为开展乡村医生结核病健康教育提供依据,我们对上海市南汇地区乡村医生的结核病知识知晓情况作了调查。     

人结核分枝杆菌和牛结核分枝杆菌差异蛋白质组学的研究

目的 探讨人MTB标准株H37Rv与牛分枝杆菌标准株卡介苗株的亚细胞蛋白质组学差异.方法 应用密度梯度离心法分离H37Rv和卡介苗株的细胞壁、细胞膜和细胞质蛋白,利用二维液相色谱分离技术进一步获得H37Rv和卡介苗株亚细胞蛋白质组,采用酶联免疫吸附试验分别检测H37Rv和卡介苗各组分与结核病患者和健康人各5例血清的免疫学反应.组间比较采用t检验.结果 共获得26个特异性引发免疫反应的H37Rv菌株蛋白组分.细胞膜组分M3Fr18与结核病患者的血清免疫学反应的吸收光度(A450值)为(721±3)×10-3,明显高于健康人[(356±6)×10-3],也明显高于卡介苗株细胞膜相应组分与健康人的血清免疫学反应强度[(414±7)×10-3],差异均有统计学意义(t值分别为1.852和1.037,均P＜0.01).细胞膜组分MI0Fr21与结核病患者的血清免疫学反应的A450值为(954±6)×10-3,明显高于健康人[(415±6)×10-3],也明显高于卡介苗株细胞膜相应组分与健康人的血清免疫学反应强度[(315±4)×10-3],差异均有统计学意义(t值分别为2.113和2.550,均P＜0.01).结论 二维液相色谱和酶联免疫吸附试验联合应用,有助于检测人MTB感染的相关抗原蛋白.M3Fr18和M10Fr21蛋白质组分可引起结核病患者的特异性免疫反应,提示其可能是人MTB感染的特异抗原.

Abstract：

Objective To compare the proteome of Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37 Rv strain with Bovine mycobacterium (Bacillus Calmette-Guerin, BCG) strain at the sub-cellular level. Methods Proteins of the cell wall, membrane and cytolymph of H37 Rv and BCG were extracted by density gradient centrifugation. Sub-cellular proteome of H37 Rv and BCG were analyzed using 2-dimensional liquid chromatography. The immunity reactions of H37 Rv fractions with sera from patients ( n = 5 ) and healthy controls ( n = 5 ), as well as BCG fractions with sera from healthy controls ( n = 5 ) were analyzed by ELISA.Data was analyzed by t test. Results Twenty-six fractions of H37 Rv were found to elicit specific antibody response. Fraction M3Fr18 of H37 Rv reacted with sera from patients. The A450 [ (721 ± 3 ) × 10-3] was higher than that with sera from healthy controls [ ( 356 ± 6) × 10 - 3 ] , as well as the A450 of the corresponding fractions of BCG with sera from healthy controls [ (414 ± 7) × 10-3 ]. The differences between the patient group and the 2 healthy control groups were significant ( t = 1. 852 and 1. 037, all P ＜ 0. 01 ). Moreover,fraction M10Fr21 of H37Rv reacted with sera from the patients. The A450[ (954 ±6) × 10 -3 ] was higher than that with sera from the healthy controls [ (415 ± 6 ) × 10-3 ], as well as the A450 of the corresponding fractions of BCG with sera from the healthy controls [ ( 315 ± 4 ) × 10-3 ]. The differences between the patient group and the 2 healthy control groups were significant ( t = 2. 113 and 2. 550, all P ＜ 0. 01 ).Conclusions The combination of 2-dimensional liquid chromatography and immunology technology is useful in finding antigens associated with MTB infection. Fractions M3Fr18 and M10Fr21 can elicit specific immune reaction among MTB patients, suggesting that they may be specific antigens of MTB infection.     

采用基因分型技术分析家庭内结核病的传播

由于结核病的潜伏期较长,传统的流行病学方法对其传染源的追踪和传播规律的认识有一定的局限.20世纪90年代以来,用基因分型技术鉴别不同的结核分枝杆菌,并与传统流行病学结合而建立的分子流行病学方法,使人们对结核病的传播有了新的认识.我们采用基因分型法对一个家庭内结核病传播病例进行分析,探讨传统流行病学与分子生物学对于传染源判定的差异.     

应用噬菌体报告系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性

早期诊断耐药结核分枝杆菌是防治耐药结核病的关键和基础。1993年起噬菌体报告系统（LRPs）陆续应用于结核分枝杆菌的鉴定及耐药检测，噬笛体生物扩增法（PhaB）也在国内被用于检测结核分枝杆菌的耐药性。我们利用新的重组噬菌体phAE142建立LRPs检测方法，检测了106株结核分枝杆菌对4种常用抗结核药物的耐药性，评价LRPs在结核病临床和流行病学研究中应用的可行性。     

上海市1999-2006年新登记老年肺结核患者死亡情况及影响因素分析

目的 描述上海市60岁及以上的老年肺结核患者的死亡情况,探讨其可能的影响因素。方法 上海市1999-2006年期间新登记并确诊的痰分枝杆菌培养阳性肺结核病患者共14589例,其中≥60周岁的老年患者共5068例（34.7%）,<60岁的非老年患者共9521例（65.3%）。研究描述了两组患者人口学、临床特征、细菌学、死亡情况等方面的特征,并以logistic回归逐步前进法鉴别老年患者中可能与死亡有关的危险因素。结果 老年患者中男性4167例,占82.2%,非老年患者中男性6699例,占70.4%（χ²=244.8, P<0.01)、老年复发患者1447例,占28.6%;非老年患者1240例,占13.0%（χ²=536.3, P<0.01);老年有合并症患者1472例,占29.0%,非老年患者1172例,占12.3%（χ²=624.2, P<0.01);老年涂阳患者4313例,占85.1%,非老年患者7625例,占80.0%（χ²=31.6, P<0.01)。两者比较差异均有统计学意义。老年患者中肺部影像学检查显示有空洞者(1480例,占29.2%)显著低于非老年患者（3120例,占32.8%）,两者比较有统计学差异（χ²=11.9, P<0.01)。老年患者病死率(668例,13.2%)显著高于非老年患者(139例,1.5%),两者比较差异有统计学意义（χ²=479.7, P<0.01)。在5068例老年组患者中,经多因素logisitic回归逐步前进法分析显示,70～<80岁(OR=1.89, 95%CI＝1.54～3.32,P<0.01)、80岁及以上 (OR=3.71, 95%CI＝2.91～4.74, P<0.01)、男性(OR=1.72, 95%CI＝1.34～2.21,P<0.01)、有合并症(OR=1.53, 95%CI＝1.28～1.83,P<0.01)、涂阳(OR=1.33, 95%CI＝1.02～1.72, P=0.03)、居住地区为郊县(OR=1.49, 95%CI＝1.24～1.79,P<0.01)和耐多药(OR=1.95, 95%CI＝1.10～3.48,P=0.02)与死亡相关。结论 上海市老年肺结核患者病死率远高于非老年患者。高龄、男性、有合并症、涂阳、居住于郊县和耐多药是死亡的危险因素。