TLR4/NF-κB在国人膝关节OA关节软骨中表达的实验研究

[摘要] 目的 通过研究人膝关节晚期骨性关节炎（osteoarthritis,OA）中Toll样受体4/核因子-κB（Toll-like receptor 4/nuclear factor kappa B, TLR4/NF-κB）的表达，初步探讨自身免疫在OA发病机制中的作用。方法 选取2013年9月~11月行全膝关节置换手术的20名膝关节OA患者（平均年龄68.5岁），取胫骨负重区及非负重区软骨，对照组为12名因创伤性股骨颈骨折行全髋关节置换术患者（平均年龄66.3岁）的股骨头负重区软骨。采用免疫组化方法分析各组软骨中TLR4的表达情况；运用RT-PCR和Western Blot技术检测三组标本软骨中TLR4、NF-κBp65的mRNA和蛋白表达。结果 1.免疫组化结果显示TLR4在负重区软骨中表达最高，非负重区其次，对照组正常软骨表达最少。2 .RT-PCR及Western Blot检测软骨中TLR4、NF-κB的mRNA及蛋白含量，结果显示负重区软骨同样表达最高，对照组表达最低，且运用Kruskal-Wallis秩和检验方法分析显示P<0.05，组间具有统计学差异。结论 TLR4/NF-κB在OA的软骨负重区表达明显上调，提示TLR4/NF-κB信号通路介导的自身免疫可能参与了OA的发病机制。     

新生大鼠原代肝细胞四氯化碳损伤模型与叶下珠保肝活性成分的提取与初步分离

目的：采用大鼠原代肝细胞四氯化碳化学性损伤模型，结合四甲基偶氮噻唑蓝比色法的体外药理模型，对传统中草药叶下珠的活性成分进行提取和初步分离，追踪叶下珠保肝护肝的活性单体成分。方法：实验于2006—05／12在浙江大学药学院中药开发及评价重点研究实验室完成。①制备新生大鼠原代肝细胞四氯化碳损伤的药理模型。②叶下珠提取物的制备：采用水、体积分数为0.95的乙醇对叶下珠活性成分进行回流提取。③活性成分的初步分离：依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取；应用AB-8大孔吸附树脂分步洗脱法，即体积分数为0.1～0.9的乙醇洗脱。④采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法，通过保护率及增生指数，观察回流提取物、各萃取物及AB-8大孔树脂各洗脱部位对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞的保护作用。结果：①正丁醇萃取物对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞的保护率及其增生指数高于阳性对照槲皮素及其他各萃取物（P〈0．05-0．01）。②正丁醇萃取物中，体积分数为0.1，0.3，0.5的乙醇洗脱部分对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞具有保护作用，但体积分数为0.1的乙醇洗脱部分保护作用最强，显著高于阳性对照槲皮素及其他各处理组（P〈0．01），体积分数为0.1乙醇洗脱部分在剂量为200g／L时，保护率为64．43％，增生指数达到2．952。结论：叶下珠保肝护肝的有效部位为正丁醇萃取物中AB-8大孔吸附树脂体积分数为0.1的乙醇洗脱部分。但叶下珠中保肝的有效单体成分还没有确定，有待进一步实验证明。     

叶下珠胶囊的HPLC法指纹图谱研究

目的建立叶下珠胶囊的HPLC指纹图谱质量控制方法。方法采用高效液相色谱法,选用HypersilODSⅡ色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),分析时间65 min,流速0.8 ml/min,检测波长为280nm。结果建立了叶下珠胶囊的HPLC对照指纹图谱,标示了17个共有峰,并初步确定叶下珠胶囊的相似度阈值为0.91。结论本方法可靠、简单,能用于叶下珠胶囊的质量控制。     

三腔二囊管救治胃底溃疡大量呕血1例报告

患者,刘某,男,54岁,因解黑色稀便并呕大量咖啡样液体伴有血块半天到当地医院经抗酸、止血、补液、输血等处理,疗效不佳而入我院。既往上腹部不适史、吸烟史,否认肝炎病史。查体:T35.8°C,P116次/min,R29次/min,BP62/46mmHg,神情,急性重症病容,面色苍白,皮肤湿冷,出汗。肺部呼吸     

miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病抗性与易感SPF鸡法氏囊组织的差异表达分析

目的 在前期高通量测序分析的基础上,进一步利用荧光定量PCR验证miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病(MD)抗性(B21单倍型)与易感(B19单倍型)鸡法氏囊组织的差异表达情况.方法 通过经优化后确定的最佳实时荧光定量PCR反应体系和扩增条件,进行荧光定量PCR分析.结果 miR-200b-3p和miR-200b-5p荧光定量PCR结果与高通量测序结果上下调情况基本一致,但差异表达显著性分析结果却不完全相同.结论 尽管差异表达显著性分析结果不完全一致,但两种方法的结果均提示来源于同一前体的miR-200b-3p和miR-200b-5p可能与MD抗性/易感性相关.     

胃体高位平滑肌肉瘤出血1例报告

患者陈某，女，18岁，因反复解柏油样便3个月，呕血1次，并有头晕、气促、乏力、胸闷，但食欲可，无上腹疼痛、腹泻，解鲜血便，当地医院经输血、抗酸等处理病情无好转。胃镜检查示：浅表性胃炎。面色苍白，否认肝炎及家族性遗传病史。查体：T37℃，P106次/min，Bp14/8.1kPa；急性重度贫血外貌，全身皮肤粘膜苍白，浅表淋巴结未触及到肿大；肺部无异常，心尖部闻及Ⅱ级SM；腹软，上腹部压痛（±），未触及到包块，未闻及振水音。血常规：RBC2.63×1012/L，HGB53g/L，WBC5.3×109/L，出凝血时间正常。大便常规：黄软，潜血（+）。尿…     

马钱内生真菌Exserohilum rostratum次生代谢产物研究

目的 对有毒植物马钱内生真菌Exserohilumrostratum的次生代谢产物进行研究。方法 通过硅胶柱色谱及反相HPLC等多种色谱分离方法进行分离纯化,运用高分辨质谱、核磁共振波谱、红外、紫外及圆二色谱等分析方法对所分离的化合物进行结构鉴定。采用Griess法对化合物进行抗炎活性测试。结果 从有毒植物马钱内生真菌Exserohilum rostratum的发酵产物中分离得到6个化合物,分别鉴定为exserone A(1)、(3R,4R)-4,8-二羟基-3-[(R)-2-羟基戊基]-6,7-二甲氧基异色满-1-酮（2）、(+)-monocerin(3)、11-hydroxymonocerin(4)、5-丁基-6-(羟甲基)-4-甲氧基-2H-吡喃酮（5）和setophapyrone B(6)。结论 化合物1为新的聚酮类化合物,命名为突蠕孢酮。化合物3具有潜在的抗炎活性。     

m6A甲基化修饰在肿瘤免疫中的作用及干预策略

N⁶-甲基腺苷(N⁶-methyladenosine, m⁶A)修饰是真核生物信使RNA中最丰富的表观遗传修饰，其失调会导致mRNA异常生物学行为如翻译和降解紊乱，从而调控肿瘤发生发展。近期研究表明m⁶A在免疫调控过程中可发挥重要作用，其不仅可调节免疫细胞的活化，还在肿瘤微环境中免疫应答发挥重要调控作用，从而影响免疫治疗效果。越来越多的证据表明m⁶A修饰可能是肿瘤免疫治疗的重要潜在干预靶点。本文阐述了免疫细胞中m⁶A修饰调控及其在肿瘤免疫微环境中相关调节作用，并进一步探讨了靶向m⁶A调控蛋白在肿瘤免疫治疗中的干预策略及潜在治疗价值。