RNA干扰诱导DNA修复基因hMGMT表达沉寂的研究

背景与目的：构建能特异诱导人DNA修复基因hMGMT表达沉寂的RNA干扰载体。材料与方法：通过两步法聚合酶链反应（Polymerasing chain reaction,PCR）扩增hMGMT特异RNA干扰表达盒,连入质粒载体构建RNA干扰质粒pU6-MGMTi,与pGEFP-C1共转染人支气管上皮16HBE（Human bronchial epithelial）细胞,G418筛选后,采用RT-PCR和Westem Blot分别检测mRNA和蛋白水平的表达抑制情况。结果：成功构建hMGMT特异RNA干扰质粒pU6-MGMTi,转染16HBE细胞的mRNA和蛋白表达受到显著的抑制。结论：应用RNA干扰表达盒以及共转染技术,构建MGMT基因表达沉寂的细胞株,为进一步阐明MGMT基因的功能创造条件。     

肺癌组织和体外人气管上皮细胞癌变模型中10环氧化物-DNA加合物的检测

目的探明10G环氧化物(BPDE)-DNA加合物在人群肺癌发生中的作用及其分子机制.方法使用针对BPDE-DNA加合物的单克隆抗体,通过免疫学方法检测150例的肺癌组织、120例的癌旁肺组织、40例的肺良性病变组织和40例的正常肺组织中BPDE-DNA加合物的含量,同时检测相应肺组织中p53、C-MYC、K-RAS、BCL-2、hTERT等癌变相关基因的表达,分析BPDE-DNA加合物与上述基因的关系.并在BPDE诱导的体外人气管上皮细胞癌变模型上检测癌变过程中BPDE-DNA加合物的变化.结果82.0%的肺癌组织中可检出BPDE-DNA加合物,加合物阳性细胞的比率为11.52%±14.44%(x±s);37.5%的癌旁肺组织可检出BPDE-DNA加合物,加合物阳性细胞的比率为2.25%±5.07%;15.0%的肺良性病变组织可检出BPDE-DNA加合物,加合物阳性细胞的比率为0.75%±2.30%;40例正常肺组织中仅1例可检出BPDE-DNA加合物,该组人群平均加合物阳性细胞比率为0.03%±0.16%;肺癌组织中加合物的含量显著高于癌旁肺组织、肺良性病变组织和正常肺组织,P＜0.001.将肺癌病例按性别、年龄、细胞类型和吸烟史分组,发现男性病例加合物检出率为89.9%,高于女性的检出率(51.6%),P＜0.01.99.1%的吸烟患者其癌组织可检出BPDE-DNA加合物,加合物阳性细胞比率为13.91%±15.53%;27.8%的非吸烟肺癌患者其癌组织也可检出BPDE-DNA加合物,加合物阳性细胞含量为4.68±7.44;吸烟患者BPDE-DNA加合物的含量显著高于非吸烟患者,t=3.44,P＜0.001.肺癌组织BPDE-DNA加合物含量在p53、K-RAS、BCL-2基因阳性表达者中显著高于阴性表达者,而C-MYC、TERT基因表达与BPDE-DNA加合物无关联.在体外用BPDE作用于人气管上皮细胞系,可诱导该细胞系发生转化和癌变,在其癌变过程中BPDE-DNA加合物由阴性变为强阳性.结论BPDE-DNA加合物是反映多环芳烃暴露和产生致癌效应的重要生物标志物,其致癌作用可能与p53、K-RAS、BCL-2等基因有关.     

镍化合物对培养人支气管上皮细胞的致癌性研究

[目的]研究几种镍化合物对培养人支气管上皮细胞的恶性转化作用及转化细胞的致癌性。[方法]通过细胞转化、体外转化细胞的软琼脂培养和裸鼠接种 ,测定几种镍化合物的致癌性。用全谱直读感耦等离子体原子发射光谱仪检测镍转化后接种成瘤细胞及肺癌组织中二价镍离子及镉、铬、铍、砷等几种金属元素的含量。[结果]水溶性镍化合物NiCl2、Ni(CH3COO)2、NiSO4 和不溶性结晶型NiS均可使人支气管上皮细胞发生恶性转化 ,以NiS的作用最强 ,浓度为110μmol/L时 ,每瓶细胞的平均转化集落为15.7±3.51 ,而浓度大致相同的三种水溶性镍化物 (100μmol/L)的转化集落分别为7.33±3.61、6.3±2.31和5.67±1.53。转化细胞接种裸鼠后能诱发肿瘤形成。在肺癌组织中的二价镍离子浓度明显高于正常肺组织 (P<0.01) ,而NiS转化细胞内的二价镍离子浓度则相当于肺癌组织中浓度的二倍。[结论]NiCl2、Ni(CH3COO)2、NiSO4 和NiS对人支气管上皮细胞均具有转化活性和致癌性 ,此活性可能与细胞或组织内的二价镍离子浓度有关     

深化医学教学改革为社区培养实用型医学人才的实践

为适应医学模式的转变，实现“人人享有卫生保健“的全球战略目标，培养和建设一支满足社区卫生服务急需的实用型医学人才。文章介绍了我院在深化医学教学改革过程中，采用多种综合性措施强化在校临床医学专业本科生的全科医学知识教育，为其将来从事社区卫生服务奠定基础。为满足当前我国社区卫生服务工作对实用型医学人才的急需，对于主要面向基层培养高级医学人才的地方性普通高等医学院校，应对在校学生提前有机地增加和融入社区全科医学知识教育，这有利于强化和巩固医学生的社区卫生服务观念和综合素质。     

10～13岁游泳运动员比赛前后血乳酸变化及恢复的探讨

本文通过对10～13岁游泳运动员比赛前后及经2小时被动休息后血乳酸指标测定结果进行对比分析,了解到少年游泳运动员在比赛中的能量代谢是以无氧代谢为主的,血乳酸水平呈高调节状况。经2小时左右的被动休息,血乳酸水平仍没能恢复至赛前水平,这提示在对抗剧烈的比赛期间,仅仅靠被动休息来促使一过性肌肉疲劳的恢复是不够的,在较短的时间内重复参加比赛的情况下,对运动员成绩的提高,最佳运动水平的发挥尤为不利,此外在对不同距离游泳比赛后血乳酸水平的比较,100米与400米、200料与400米赛后血乳酸水平亦不相同,表明400米游泳比赛时间较长,负荷较大,乳酸能的供给处于较高水平,同时也是提示三种距离的运动强度对机体的效应是是不同的。赛后及被动体息后乳酸水平男女性别比较无差异。     

培养医学生应对突发公共卫生事件能力的实践与探讨

目的探讨培养临床医学生应对突发公共卫生事件能力的教学模式。方法自2003年起在临床医学本科三、四、五年级学生进行培养应对突发公共卫生事件能力教学实践。结果预防医学教学、传染病学教学和生产实习相结合的培养学生应对突发公共卫生事件能力的教学模式，激发了学生的学习积极性，培养了学生应对突发公共卫生事件的能力。结论使用预防医学、传染病学和生产实习相结合的教学模式对提高学生应对突发公共卫生事件能力有重要的意义，值得推广。