PRDM16基因启动子区甲基化水平与食管癌的关系

目的探讨PRDM16(PR domain containing 16)基因启动子区甲基化水平与食管癌的关联。方法运用MethyTarget方法检测40例食管癌患者的癌组织与癌旁组织中的PRDM16基因启动子区甲基化水平,构建食管癌诊断模型。结果共有25个位点甲基化水平差异有统计学意义(校正P值=0.000 5),癌组织的甲基化水平均高于癌旁组织,两者间甲基化差值在0.13~0.26。多因素logistics回归独立筛选出两个位点,分别为prdm16_1f_14、prdm16_2f_6(P0.01)。决策曲线显示prdm16_1f_14、prdm16_2f_6联合诊断收益率高于单独诊断;ROC曲线显示prdm16_1f_14、prdm16_2f_6单独诊断曲线下面积(AUC)分别为0.837、0.803,联合诊断AUC为0.880。结论联合prdm16_1f_14、prdm16_2f_6位点对食管癌诊断有一定的应用价值。     

基于网络药理学探讨抗感方抗病毒作用机制

目的基于网络药理学方法研究抗感方治疗冠状病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)的作用机制。方法借助TCMSP数据库筛选出抗感方活性成分及作用靶点,通过Gene Cards数据库筛选出冠状病毒、RSV的疾病靶点。利用Cytoscape软件、STRING数据库分别构建“药物-成分-靶点-疾病”的相互作用和潜在靶点PPI网络图,并进行GO和KEGG富集分析,最后进行分子对接验证。结果抗感方中174种潜在活性成分,涉及51个抗病毒关键靶点,可能通过IL-17、AGE-RAGE、TNF、Toll样受体、NOD样受体等炎症、免疫信号通路发挥抗病毒作用。16种主要活性成分对冠状病毒和RSV关键靶蛋白(Mpro与RSV-F)均有较好地结合力。结论抗感方中多种活性成分通过多靶点、多通路协同作用发挥对冠状病毒与RSV的干预作用,为临床应用于多种病毒的防治提供理论依据。     

D101型大孔树脂纯化山豆根总生物碱的工艺优选

目的:优选D101型大孔树脂纯化山豆根总生物碱的工艺条件。方法:选择苦参碱为指标成分,采用UV测定总生物碱含量,检测波长415 nm。以总生物碱含量为指标,通过单因素试验考察上样量质量浓度、洗脱剂用量及种类、洗脱流速等因素对山豆根总生物碱大孔树脂纯化工艺的影响。结果:最佳工艺条件为上样液用盐酸调p H 3~4,用20%氨水调p H 10,上样液质量浓度0.8 g·m L-1,上样流速2 BV·h-1,上样量为山豆根药材与树脂体积比例1∶2.5,加水2 BV除杂,用70%乙醇4 BV于4 BV·h-1流速洗脱;总生物碱纯度66.83%。结论:D101型大孔树脂对山豆根生物碱类物质具有较好的纯化效果,优选的工艺简单可行,为山豆根的资源利用提供参考     

多指标综合评分法优选抗感胶囊提取工艺

目的优化抗感胶囊提取工艺。方法采用单因素考察结合正交试验设计法,以方中金银花和连翘的有效成分绿原酸、木犀草苷、连翘酯苷A的含量和浸膏得率为综合评分指标,考察溶剂用量、提取时间、提取次数3个因素对抗感胶囊水提工艺的影响,并进行验证试验。结果最优提取工艺为:加12倍量水,回流提取2次,每次提取1.5h。结论本研究优选的提取工艺简单、稳定可行,对抗感胶囊的生产工艺制定具有一定的指导意义。     

利用统计学方法消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标的干扰

目的利用析因分析、偏相关和多元回归分析判断与消除检验延误(时间因素)对大鼠致癌试验凝血指标的干扰。方法对照、低、中、高剂量4个实验组共168只Wistar雌性大鼠致癌试验期满后(104周)以磁珠法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)。采用析因分析方法并结合偏相关和多元回归分析对采血后3~24 h内完成检测的数据进行分析。结果析因分析显示,APTT分别受时间和剂量的独立影响,TT受时间影响并与染毒剂量存在交互作用,PT亦受时间影响。偏相关和多元回归分析显示,APTT、TT分别与时间有相关性,并入选APTT、TT的回归模型;PT与时间无相关性,亦无法建立回归模型,由此判断因检验延误延长了APTT和TT,产生干扰的时间节点为5 h。剔除问题数据后对照、低、中、高4个实验组APTT均值分别下降了1.85%、4.56%、20.08%和30.45%,TT分别下降了4.01%、6.78%、11.76%和16.64%。结论联合使用析因分析、偏相关和多元回归分析可识别和消除检验延误对大鼠致癌试验凝血指标APTT和TT的干扰。     

高分辩超声显像诊断阴囊内疾病的应用研究

本文应用高分辩超声显像对76例阴囊内疾病患者进行探查,结果表明:超声诊断与手术病理对照符合率为90%(69/76);对肿块实质性和液性的判察完全正确;对睾丸、附睾外伤的诊断有其独特的价值。我们认为该法简便可靠,论断准确率高,是值得大力扩大应用的检查手段。     

NS5 ATP9抑制血清饥饿诱导的HepG2细胞凋亡

目的探讨HCV NS5A反式激活基因NS5ATP9对肝癌细胞系HepG2细胞凋亡的影响。方法将NS5ATP9基因表达质粒、NS5ATP9干扰RNA质粒及各自的对照空质粒转染到HepG2细胞中,48h后换无血清培养基培养24h诱导细胞凋亡,采用实时荧光定量PCR验证转染后NS5ATP9mRNA表达水平的变化,采用Annexin V/7-AAD流式细胞术检测细胞凋亡情况,JC-1检测线粒体膜电位,Western blot检测Bax蛋白表达,综合观察NS5ATP9对HepG2细胞血清饥饿诱导凋亡的影响。结果 Annexin V/7-AAD检测结果显示,和对照组细胞相比NS5ATP9过表达组早期凋亡和总凋亡率显著减少(P0.05);而NS5ATP9干扰RNA组细胞的早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡率均显著增加(P0.05)。JC-1检测结果显示,和对照组相比NS5ATP9过表达组细胞线粒体膜电位保持正常形式的比例增加,而出现去极化电位形式的比例显著减少(P0.05);而NS5ATP9干扰RNA组线粒体膜电位保持正常形式的比例显著减少(P0.05)。Western blot检测结果显示,NS5ATP9干扰RNA组促凋亡分子Bax表达量显著升高(P0.05),NS5ATP9过表达组Bax表达量则有下降趋势。结论 NS5ATP9基因抑制血清饥饿诱导的HepG2细胞凋亡,其机制可能是通过线粒体途径实现。     

HBV表面抗原大蛋白与人胰腺突触角蛋白6之间的相互作用

目的 验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺突触角蛋白6 (STX6)在细胞内是否存在相互作用,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础.方法 构建真核表达质粒pACT-STX6,采用哺乳动物双杂交技术验证LHBs与STX6之间的相互作用.结果 实验组和各阴性对照组相对荧光素酶活性值均存在差异,且均具有显著统计学意义(P＜ 0.01).结论 LHBs与人胰腺STX6在胰腺细胞内存在相互作用.     

核苷（酸）类药物应答不佳的慢性乙型肝炎患者优化治疗过程中血清IL-21的动态变化及意义

目的通过检测核苷（酸）类似物治疗应答不佳慢性乙型肝炎患者在优化治疗过程中血清IL-21表达水平,探讨血清IL-21水平的动态变化与患者对抗病毒应答的相关性。 方法检测25例核苷（酸）类似物治疗应答不佳的慢性乙型肝炎患者在接受优化的核苷（酸）类似物抗病毒治疗基线、12周、24周、36周、52周、64周、76周、88周和104周的血清并检测IL-21水平、HBV DNA定量、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和肝功能等相关指标,分析这些指标的动态变化及其之间的相关性;另选取15例HBV携带者、15例健康志愿者做对照。 结果核苷（酸）类似物治疗应答不佳的慢性乙型肝炎患者优化治疗基线血清IL-21水平与无症状携带者血清IL-21水平差异无统计学意义,但均显著高于健康对照组（P = 0.000、0.003）;核苷（酸）类似物应答不佳的慢性乙型肝炎患者在优化治疗过程中血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg、HBeAb均呈下降趋势,且HBV DNA水平及HBsAg浓度于治疗12周内下降速度最快,HBsAg浓度降低速度随治疗时间延长逐渐减慢。基线IL-21水平与优化治疗12～24周时的病毒量变化对数值存在中等强度的负相关性（r =-0.55、P = 0.015）,36周时IL-21水平与36～52周病毒量变化存在中等强度的负相关性（r =-0.62、P = 0.001）。核苷（酸）类药物优化治疗过程中患者血清IL-21浓度呈现先升高后下降的趋势,峰值浓度在36周,为66.41 pg/ml,显著高于基线IL-21浓度（P = 0.001）,治疗至88周及104周时患者血清IL-21水平恢复到基线状态。 结论乙型肝炎病毒感染的患者血清IL-21浓度升高,优化核苷（酸）类抗病毒治疗后,慢性乙型肝炎患者血清IL-21水平呈现一过性升高,峰值与HBV DNA的抑制及HBsAg、HBeAg等变化有一定的相关性。