治伤巴布剂对大鼠急性软组织损伤模型P38MAPK、AKT信号通路的影响＊

目的 观察治伤巴布剂对急性软组织损伤（acute soft tissue injury， ASTI）模型p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、丝/苏氨酸蛋白激酶（AKT）信号通路的影响，探讨治伤巴布剂干预ASTI的可能作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、治伤巴布剂组、p38MAPK信号通路抑制剂组、AKT信号通路抑制剂组，每组8只。除正常对照组外，其余四组均予以左侧后肢小腿ASTI造模。造模成功后，治伤巴布剂组于标记部位立即予治伤巴布剂（修剪成1.5x3cm大小）外敷，并用胶布固定；其余四组均予等剂量赋形剂（修剪成1.5×3 cm大小）外敷处理，胶布固定；持续外敷，共持续24 h。p38MAPK信号通路抑制剂组在造模前30 min予腹腔注射p38MAPK信号通路抑制剂SB203580（400 μg/kg/天）1次；AKT信号通路抑制剂组在造模前30 min予腹腔注射AKT信号通路抑制剂perifosine（20 mg/kg/天）1次。分别于0（造模前）、2h、4h、8h、12h、24h测量受伤小腿肌肉处的周长，并计算肌肉肿胀率（muscle swelling rate，MSR）。24 h药物干预结束后，采用颈椎脱臼法处死大鼠。后将左侧后肢小腿损伤中心部位进行取材，分成三份。一部分用于观察组织病理学形态变化；一部分用于逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测核因子-κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）p65 mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA、白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA表达水平；剩下部分用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平及蛋白质免疫印迹（Western-blot）法测定p38MAPK、AKT、NF-κB p65、核因子抑制蛋白α（inhibitor kappa B alpha， IκBα）表达水平。结果 与正常对照组相比，模型对照组MSR显著增加（P<0.01）；病理形态学上，骨骼肌组织可见大面积肌细胞排列紊乱，肌细胞变性坏死，间质内可见红细胞聚集及大量炎症细胞浸润；骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平显著升高（P<0.01）；磷酸化p38MAPK（p-p38）/总p38MAPK（t-p38），磷酸化-AKT（p-AKT）/总-AKT（t-AKT）明显升高（P<0.01），NF-κB p65及NF-κB p65mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。与模型对照组相比，治伤巴布剂组MSR在治疗第8 h、12 h、24 h显著下降（P<0.01），且在治疗第24 h，其MSR较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更明显（P<0.05）；病理学评分显著下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更显著（P<0.05）；骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平明显下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组更显著（P<0.05）；p-p38/t-p38及p-AKT/t-AKT明显下降（P<0.01），NF-κB p65及NF-κB p65 mRNA表达水平显著下降（P<0.01），且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组在降低NF-κB p65及NF-κB p65 mRNA相对表达值方面更显著（P<0.01）。结论 治伤巴布剂可能同时对p38MAPK、AKT信号通路产生了一定的抑制作用，引起NF-κB活性下调，NF-κB p65蛋白的表达下调，进而引起骨骼肌组织TNF-α、IL-1β炎性细胞因子含量水平下调，减轻ASTI炎症反应，从而改善ASTI。     

Proteomics analysis of lysine crotonylation and 2-hydroxyisobutyrylation reveals significant features of systemic lupus erythematosus

Introduction/objectives

To seek significant features of systemic lupus erythematosus (SLE) by utilizing bioinformatics analysis.

Method

Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) was used to quantify lysine crotonylation (Kcr) and lysine 2-hydroxyisobutyrylation (Khib) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of systemic lupus erythematosus (SLE) patients and normal controls.

Results

Seventy-six differentially modified proteins (DMPs) dually modified by Kcr and Khib were identified between SLE patients and healthy people. GO enrichment analysis prompted significant enrichment of seventy-six DMPs in MHC class II protein complex binding and leukocyte migration. KEGG pathways were enriched in antigen processing and presentation pathway and leukocyte transendothelial migration pathway. Six DMPs (CLTC, HSPA1B, HSPA8, HSP90AB1, HSPD1, and PDIA3) were identified in antigen processing and presentation pathway, of which HSPA8 was the core protein. Significant changes of Kcr and Khib in HSPA8 may increase ATP hydrolysis and promote antigen binding to MHC II molecule. In leukocyte transendothelial migration pathway, 7 DMPs (ACTN1, ACTN4, EZR, MSN, RAC1, RHOA, and VCL) were identified. MSN was the protein with the most modification sites in this pathway. In amino terminal ferm region of MSN, Kcr and Khib expression change may lead to the adhesion between leukocytes and endothelial cells, which was an important step of leukocyte migration.

Conclusion

Kcr and Khib may promote the antigen presentation and jointly regulate the tissue damage mediated by leukocyte migration in SLE patients, which may play key roles in the pathogenesis of SLE probably.

2型糖尿病患者血清SUA和CysC水平与糖尿病视网膜病变的关系

目的：探讨血清尿酸(SUA)、胱抑素C(CysC)水平与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。

方法：前瞻性研究。选取2019-05/2021-05本院收治无DR的2型糖尿病(T2DM)患者53例和DR患者83例，DR患者中包括非增殖型糖尿病视网膜病变(NPDR)47例、增殖型糖尿病视网膜病变(PDR)36例。另选取同期体检中心体检健康者48人作为对照组。比较受试者血清学指标，尿酸氧化酶法检测SUA水平，免疫比浊法检测血清CysC含量，Spearman相关性分析血清SUA、CysC与其他血清学指标的相关性，多因素线性逐步回归法分析血清SUA、CysC的影响因素，使用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清SUA、CysC对DR预测效能。

结果：T2DM组、NPDR组和PDR组的体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)均明显高于对照组(均P<0.05)，PDR组的SBP均明显高于T2DM组和NPDR组(均P<0.05)，NPDR组和PDR组糖尿病病程均明显高于T2DM组(均P<0.05)，PDR组糖尿病病程明显高于NPDR组(P<0.05)。对照组、T2DM组、NPDR组、PDR组纳入对象中空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、SUA、CysC水平呈逐渐明显升高趋势(均P<0.001)，PDR组的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)水平明显高于对照组(均P<0.05)，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(P<0.05)。血清SUA水平与FPG、HbA1c、TC、TG水平呈正相关(r_s=0.564、0.631、0.513、0.408，P<0.001)，与HDL-C、LDL-C无相关性(r_s=-0.061、0.035，P>0.05)； 血清 CysC水平与FPG、HbA1c、TC、TG水平呈正相关(r_s=0.524、0.692、0.395、0.435，P<0.001)，与HDL-C、LDL-C无相关性(r_s=-0.012、0.049，P>0.05)，FPG、HbA1c、TC、TG是血清SUA、CysC水平影响因素(P<0.001)。SUA、CysC联合检测时曲线下面积(AUC)(0.892，95%CI：0.840～0.944，敏感性71.1%，特异性94.3%)显著高于其单独检测AUC\〖SUA(0.807，95%CI：0.735～0.879，敏感性69.9%，特异性75.5%)、CysC(0.763，95%CI：0.684～0.841，敏感性69.9%，特异性75.5%)\〗(均P<0.05)。

结论：随着DR病情严重程度加重而血清SUA、CysC水平逐渐升高。血清SUA、CysC联合检测可提高DR诊断预测效能。     

Ecological evaluation of heavy metal pollution in the soil of Pb-Zn mines

Ecotoxicology - Soil heavy metal pollution evaluations are a necessary measure for mine ecological control projects. In this study, the heavy metals Pb, Zn and Cd were studied in mining areas,...     

石河子地区近十年结肠镜成人结直肠癌及腺瘤检出情况的横断面调查

目的　调查石河子地区近十年结肠镜下成人结直肠癌（colorectal cancer，CRC）、结直肠腺瘤和进展期腺瘤检出率的变化趋势。方法　2010年1月1日—2019年12月31日期间，就诊于石河子大学医学院第一附属医院完成结肠镜检查的病例纳入调查，通过查阅电子病历系统收集病历资料，具体信息包括患者年龄、性别及结直肠腺瘤或CRC的部位、数量、大小和病理类型等。主要观察结直肠腺瘤、结直肠进展期腺瘤和CRC的检出率，包括10年总体检出率以及前五年（2010—2014年）总体检出率和后五年（2015—2019年）总体检出率。结果　共纳入50 645例，经排除标准排除14 931例，最终共35 714例纳入数据分析。结直肠腺瘤、结直肠进展期腺瘤和CRC的10年总体检出率分别为17.65%（6 302/35 714）、4.45%（1 589/35 714）和3.71%（1 324/35 714）。结直肠腺瘤后五年总体检出率［20.33%（4 565/22 457）］高于前五年［13.10%（1 737/13 257）］；结直肠进展期腺瘤后五年总体检出率［4.69%（1 053/22 457）］高于前五年［4.04%（536/13 257）］；CRC后五年总体检出率［3.30%（741/22 457）］低于前五年［4.40%（583/13 257）］。结论　石河子地区2015—2019年结直肠腺瘤检出率较2010—2014年有较大幅度升高，结直肠进展期腺瘤检出率较2010—2014年有小幅升高，而CRC检出率较2010—2014年有小幅下降，由此推测结肠镜检查发现并切除结直肠腺瘤对降低CRC发病率可能具有重要作用。     

LncRNA ANRIL靶向miR-195对HCT116细胞及裸鼠移植瘤放射增敏实验研究

目的 探究LncRNA ANRIL对结直肠癌HCT116细胞体外体内放射增敏作用及机制。方法 qPCR检测ANRIL表达。将阴性对照siRNA、ANRIL siRNA、miR-NC mimic、miR-195 mimic、miR-NC inhibitor、miR-195 inhibitor转染至HCT116细胞中分别记为阴性对照、沉默ANRIL、过表达miR-NC、过表达miR-195、抑制miR-NC、抑制miR-195组,以不做任何处理的HCT116细胞为空白对照组。克隆形成实验检测放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡,StarBase预测ANRIL下游miRNAs,双荧光素酶报告基因实验进一步验证。裸鼠皮下移植瘤实验检测ANRIL对照射后移植瘤生长影响。结果 沉默ANRIL组细胞存活分数较阴性对照组降低(P<0.05),其放射增敏比为1.52。沉默ANRIL+4Gy组细胞凋亡率较阴性对照+4Gy组增加[(27.86±2.78)%︰(12.06±1.46)%,P<0.05]。裸鼠皮下移植瘤实验结果显示在13、16、19、22、25天时阴性对照组肿瘤体积比沉默ANRIL组降低[(234±66)、(273±63)、(296±72)、(321±85)、(403±94) mm³与(357±79)、(485±124)、(617±143)、(764±174)、(985±221) mm³,P<0.05]。miR-195是ANRIL靶基因,抑制miR-195可逆转沉默ANRIL对HCT116细胞放射增敏和凋亡促进作用及移植瘤生长抑制作用。结论 LncRNA ANRIL通过调控miR-195表达来调节HCT116细胞放射敏感性,可能为临床结直肠癌放疗提供一个新的增敏靶点。