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应用嵌套式聚合酶链反应(nestedPCR)法检测结核菌DNA,所用内、外两对寡核苷酸引物衍生于37.7u(38kDa)蛋白抗原b的编码(Pab)DNA序列。对6种抗酸分枝杆菌和10种非分枝杆菌DNA进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色证实,只有人型结核杆菌、牛型结核杆菌和卡介苗(BCG)出现322bp特异扩增带,而其他菌种未见此种扩增。第1步和第2步PCR分别检测到的最低限量为10pg和10fg的靶DNA。采用此法检测72份临床标本,结果显示:该技术具有特异性强、敏感性高、快速简便的优点,尤适用于肺内外结核的早期诊断。 相似文献
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DNA探针过去多用同位素标记,但半衰期短,价格昂贵,且防护和操作困难,故应用受限。近年来非同位素标记探针大量应用,结果十分理想。作者用光生物索标记DNA探针的方法,对本室保存的标准军团菌种进行了鉴定。对从环境中分离培养到的形态疑似军团菌的菌落亦进行了鉴定。 相似文献
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用Nested聚合酶链反应(Nested PCR)法检测嗜肺军团菌种。Nested PCR法所用的两对寡核苷酸引物按编码24 kDa嗜肺军团菌表面抗原的基团片段序列设计的。用此两对引物对实验的军团菌种和非军团菌种细菌DNA进行扩增,只有嗜肺军团菌种DNA被扩增,而其他军团菌种和非军团菌属细菌没有被扩增。第1步和第2步PCR分别检测到最小量为10pg和10 fg的靶DNA。对不同量的嗜肺军团菌配制成的痰标本进行检测,能检测到0.1cfu/ml的嗜肺军团菌,只需12h。这些结果显示Nested PCR法检测嗜肺军团菌特异性强,敏感性高。此方法为从临床标本和环境材料中早期、快速检测到嗜肺军团菌提供了有效的工具。 相似文献
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DNA探针过去多用同位索标记.但半衰期短。价格昂贵。且防护和操作困难,故应用受限。近年来非同位素标记探针大量应用.结果十分理想。作用光生物索标记DNA探针的方法,对本室保存的标准军团菌种进行了鉴定。对从环境中分离培养到的形态疑似军团菌的菌落亦进行了鉴定。 相似文献
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