灵芝孢子粉和双歧杆菌对小鼠菌群失调的治疗作用

目的:研究灵芝孢子粉(GSP)、双歧杆菌(BB)对小白鼠肠道菌群失调的治疗作用.方法:用盐酸林可霉素注射液给实验小鼠灌胃0.36 g/kg连续6 d,建立小鼠菌群失调模型.将小鼠随机分成11组,每组10只,包括一个正常对照组(CC),一个菌群失调模型组(MIC)和9个治疗组(根据不同剂量和治疗方法建立的3个GSP治疗组,3个BB治疗组以及3个共同治疗组).连续6d后,处死小鼠,取直肠粪便并用生理盐水稀释成1×10-7、1×10-8、1×10-9,三个稀释度,行有氧及厌氧培养48 h后作菌落计数,数据进行统计学处理.结果:成功建立了小鼠肠道菌群失调模型,MIG组的需氧菌和厌氧菌菌落计数均低于CG组,并且在经过CSP和BB治疗后小鼠肠道菌群数量明显得到恢复,其中高剂量灵芝孢子粉和高剂量双歧杆菌治疗组的效果最好,与CG组及相应中、低剂量组比较有统计学意义(P相似文献   

双歧杆菌及灵芝孢子对胃肠菌群失调的预防

目的:探讨双歧杆菌、赤灵芝孢子及其联合制剂对小鼠胃肠菌群失调的预防作用,为临床用药提供实验依据.方法:用不同剂量双歧杆菌、灵芝孢子粉及其联合制剂灌胃7 d,然后林可霉素连续灌胃7 d,计数直肠成型粪便菌落.结果:(1)各预防组需氧及厌氧菌落数均明显高于菌群失调组(P<0.01);(2)双歧高剂量组需氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);(3)灵芝孢子高剂量组厌氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);中、低剂量组需氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);(4)联合制剂高剂量组厌氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05).结论:双歧杆菌、赤灵芝孢子、联合制剂有一定预防菌群失调作用.     

胎盘多肽注射液对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:研究胎盘多肽注射液对人脐静脉内皮细胞(ECV-304)增殖的影响.方法:采用细胞计数和MTT法观察不同稀释度胎盘多肽作用72 h后,ECV-304细胞增殖情况.同时以免疫组织化学法检测不同稀释度胎盘多肽对ECV-304细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.结果:一定稀释度的胎盘多肽可促进ECV-304细胞的增殖,25 ml/L即可发挥作用,200 ml/L作用最明显.ECV-304细胞PCNA表达阳性率与胎盘多肽稀释度呈剂量相关性.结论:胎盘多肽可促进体外培养的ECV-304细胞增殖.     

体外扩增的NK细胞运载溶瘤呼肠孤病毒对结直肠癌细胞的杀伤效应

[摘要] 目的：评价体外扩增的人NK细胞能否作为呼肠孤病毒的运载细胞并探讨其临床转化应用价值。方法：体外扩增人NK细胞,用NK细胞装载呼肠孤病毒,激光共聚焦显微镜观察呼肠孤病毒与NK细胞结合的部位。NK细胞运载呼肠孤病毒（Reo-NK）到达肿瘤细胞后,CCK-8 法检测在中和抗体的存在下病毒发挥的溶瘤作用;qPCR法检测肿瘤细胞内病毒RNA的相对表达量。CCK-8 法检测Reo-NK对结直肠癌KRAS基因突变型（DLD-1）和野生型（CaCo-2、HT29）细胞株的杀伤效应,ELISA 双抗体夹心法检测NK细胞释放的穿孔素水平。结果：呼肠孤病毒主要结合于NK细胞膜上,在人AB型血清的存在下体外扩增的NK细胞可将呼肠孤病毒传递到肿瘤细胞,且传递后的呼肠孤病毒仍具有显著溶瘤活性（P<0.01）;同时检测到肿瘤细胞内病毒RNA的表达量显著增高（P<0.01）。与NK组相比,Reo-NK组对KRAS基因突变型和野生型结直肠癌细胞株的细胞毒作用均显著增强（P<0.05）,穿孔素的释放均明显增加（P<0.05）。结论：体外扩增的人NK细胞适合作为呼肠孤病毒的运载细胞,且呼肠孤病毒能够增强NK细胞的细胞毒作用,两者联合后对结直肠癌细胞可发挥更强的杀伤作用,因而具有重要的临床转化应用价值。     

还原型谷胱甘肽靶向氧化应激对肝癌干细胞的作用

目的探讨还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)干细胞性的作用。方法采用总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)测试盒检测细胞内T-GSH/GSSG水平;应用CCK-8实验评估细胞活力及干细胞培养基培养干细胞球(HCC sphere);运用流式细胞技术分析CD133阳性细胞亚群比例。结果 HCC细胞中内源性T-GSH/GSSG水平比正常细胞显著升高。外源性补充GSH减少胞内活性氧物质(reactive oxygen species, ROS)并抑制HCC细胞活力及HCC sphere形成。进一步分析发现GSH显著降低CD133~+肝癌干细胞(liver cancer stem cells, LCSC)的亚群比例。结论 HCC细胞中ROS水平及抗氧化防御能力增强。外源性GSH能够降低胞内的ROS水平,并抑制HCC细胞活力及干细胞性,降低LCSC在HCC细胞中的亚群比例。为靶向异常氧化应激(oxidative stress,OS)及肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)治疗HCC提供了新靶点。     

重组HMGB1对DEN2感染Ana-1细胞分泌TNF-α及NO的影响

目的:观察不同浓度重组高迁移率族蛋白1(recombination high mobility group box protein 1,r HMGB1)对DEN2感染鼠源单核巨噬细胞Ana-1分泌TNF-α、NO及DEN复制的影响。方法:直接免疫荧光法鉴定DEN2吸附Ana-1细胞;qRTPCR检测不同时间胞内病毒载量变化;双抗体夹心ELISA法检测感染不同时间TNF-α的分泌水平,Griess试剂检测细胞释放NO变化。结果:不同剂量r HMGB1处理Ana-1细胞后,对DEN2感染细胞的病毒抑制率(%)分别为41.53±2.12﹑55.30±1.59﹑74.75±1.12﹑86.35±1.42,差异有统计学意义(P0.05)。r HMGB1处理后,感染细胞分泌TNF-α和NO水平均有所下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:r HMGB1可有效调节DEN2感染Ana-1细胞的TNF-α和NO分泌,并抑制DEN2的增殖。