构建靶向血管内皮生长因子受体2可调控活性的嵌合抗原受体T细胞及其体外功能验证

目的构建靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)可调控活性的小分子门控嵌合抗原受体T(smgCAR-T)细胞系统并在体外验证其抗肿瘤和可调节活性。方法采用基因全长合成和磷酸钙转染法构建smgCAR-T及其阳性(CAR+-T)和阴性(CAR--T)对照细胞。同时构建表达VEGFR2的小鼠结直肠癌细胞(MCA38VEGFR2+)。验证并筛选构建成功的细胞后再体外验证CAR-T细胞靶向结合能力。在不同的效靶比下检测白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-γ的浓度来评估CAR-T细胞的体外分泌功能,用乳酸脱氢酶浓度评估CAR-T细胞的体外抗肿瘤活性。组间的比较采用t检验或单因素方差分析。结果基因测序和流式细胞术证实CAR-T细胞和靶细胞构建成功。与对照组比较,CAR+-T细胞+MCA38VEGFR2+组具有最强的靶细胞杀伤能力。在smgCAR-T细胞+MCA38VEGFR2+组中,随着C16-(S)-3-甲基吲哚雷帕霉素(Rapalog)滴度升高靶细胞杀伤率逐渐升高;当Rapalog为40 nmol/L时杀伤率达到最大值,为(66.25±13.20)%。分别向smgCAR-T细胞+MCA38VEGFR2+细胞组(A和B组)加入40 nmol/L的Rapalog后,在24 h时可观察到两组杀伤率出现同步升高[(44.25±6.24)%比(49.25±5.56)%,t=1.197,P>0.05],差异无统计学意义。在置换培养基后,再次添加了Rapalog的A组中观察到靶细胞杀伤率升高明显;而未再次添加Rapalog的B组中靶细胞杀伤率升高缓慢;此时,A和B组杀伤率差异有统计学意义[(89.00±3.16)%比(56.50±6.61)%,t=8.873,P<0.01]。结论构建的smgCAR-T细胞在体外展现出一定的抗肿瘤活性,且其活性受小分子化合物Rapalog的可逆调控。     

“学生评教”中若干问题的思考

学生评教是教学质量监控与评价的必要环节和教学管理的重要手段．探讨“学生评教”在课堂教学质量监控中存在的问题并初步提出了学生评教工作中存在问题的解决措施．     

结直肠癌中CAR-T细胞免疫治疗的研究现状及展望

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫疗法是一种通过基因工程修饰来招募T细胞对抗肿瘤的新方法。CAR-T细胞免疫疗法在血液系统恶性肿瘤中已取得巨大的进展,因此,许多研究者提出将其用于诸如结直肠癌(CRC)这类实体肿瘤。但是,由于肿瘤特异抗原的缺乏,肿瘤细胞间的紧密连接和免疫抑制性的肿瘤微环境,以及治疗不良反应等问题,限制了CAR-T细胞疗法在CRC的应用。为克服实体瘤免疫治疗的这些困境,研究人员提出了多种优化CAR的治疗策略,这些策略各有其优势和不足,本文总结了CRC中CAR-T细胞免疫疗法的靶点选择,治疗不良反应和相应的优化策略等现状,并提出对实体瘤CAR-T细胞免疫治疗的未来展望。     

结直肠癌系膜癌结节相关的病理因素及预后分析

目的探讨结直肠癌病人肠系膜癌结节(tumor deposit,TD)数目对预后的影响。方法回顾性分析2011年3月至2014年11月于武汉大学人民医院胃肠外科行结直肠癌根治术病人的临床病理资料,对病人生存情况进行随访,并对TD有无以及根据TD的截断值(cutoff值)分组的病人进行生存分析。结果TD阳性、T3~4期、N1和N2期、神经侵犯阳性、癌胚抗原(CEA)阳性以及肿瘤病理分化为低分化是结直肠癌病人预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。根据TD的cutoff值分组行生存分析,发现TD数目总体上与结直肠癌病人预后呈负相关,且TD数目4~5组病人死亡风险较TD1~3组高[HR=7.596,95%CI(3.147,18.333),P<0.01],TD≥6组病人较TD4~5组病人更高[HR=41.976,95%CI(12.343,142.754),P<0.01]。结论肠系膜TD为结直肠癌病人预后的独立不良因素,且不同TD数目对预后的影响不同,简单将TD阳性(淋巴结转移阴性)划分至N1c期或许不能精确地评估病人预后。     

肿瘤标志物和Ki67在结直肠癌中的表达及预后因素分析

目的探讨术前血清肿瘤标志物与术后Ki67联合检测对结直肠癌病人预后评估的价值。方法收集2012年1月至2014年6月在武汉大学人民医院胃肠外科就诊的结直肠癌病人的临床病理资料和随访资料。癌胚抗原(CEA)>5μg/L定义为阳性,癌抗原(CA)19-9>35 kU/L定义为阳性。Ki67 LI大于其对应截断值定义为高表达(阳性)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线寻找Ki67 LI的截断值[曲线下面积(AUC)最大时];Cox回归分析寻找影响结直肠癌病人预后的独立危险因素。结果研究共纳入311例结直肠癌病人,截至2019年6月1日,中位随访67个月(3~89个月),随访率94.2%,病死率32.5%。单因素生存分析提示,CEA阳性、CA19-9阳性,Ki67高表达与结直肠癌病人预后不良相关(均P<0.01)。联合血清肿瘤标志物和Ki67的生存分析结果提示,均阴性时病人预后最好,单阳性时次之,均阳性时最差(均P<0.01)。Cox回归结果提示:CEA[HR=6.461,95%CI(3.693,11.304),P<0.01]、CA19-9[HR=2.046,95%CI(1.214,3.449),P=0.007]、TNM[HR=2.104,95%CI(1.597,5.242),P=0.028]、CEA+Ki67[HR=9.992,95%CI(5.337,18.706),P<0.01]、CA19-9+Ki67[HR=5.345,95%CI(2.282,12.521),P<0.01]是影响预后的独立危险因素。结论联合检测术前血清肿瘤标志物和术后Ki67指标对评估结直肠癌病人预后具有重要价值。     

药物毒理学双语教学的探索与思考

本文探讨了药物毒理学课程实行双语教学的方法,并对今后开展双语教学提出几点建议。     

加强和规范高校二级学院教学管理的探索

加强和规范高校二级学院（系）的教学管理变得越来越重要，本文提出通过建立和完善教学管理规章制度、构建教学质量监控体系来加强和规范二级学院教学管理，以提高教学质量．     

构建药学专业实践教学体系的实践与思考

在探讨药学专业实践教学体系构建的基础上,为进一步完善该系统提出建议：     

浅谈品管圈对高血压患者服药依从性的影响

目的：观察品管圈工作模式对高血压患者服药依从性的影响。方法将2013年7月~2014年6月入院的高血压患者160例，对照组：采用常规护理模式。观察组：采用品管圈扩张模式。结果两组患者服药依从性、高血压知识和护理满意度比较差异有统计学意义(<0.05)。结论品管圈工作模式可以帮助患者提高服药依从性，掌握高血压的相关知识及有利于患者的康复，降低并发症的发生，提高护理满意度。