荧光定量聚合酶链反应检测CCND1基因扩增在乳腺癌诊断中的应用

目的应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测细胞周期蛋白D1（CCND1）基因表达水平，探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用价值。方法应用FQ-PCR法，并以β2-微球蛋白为内对照测定15例健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中CCND1的表达量。结果CCND1表达水平在健康对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义（P〉0．05），乳腺癌组均高于前2组（P〈0．05），β2-微球蛋白在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。81例乳腺癌患者阳性率为45．7％，良性乳腺疾病组为0。结论FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CCND1方法，可有效监测乳腺癌的诊断：疗效、转移，评估其预后。     

乙型肝炎病毒载量与血清学标志及preS1抗原的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)载量与血清学标志及preS1抗原的关系,为乙型肝炎的诊断、疗效评估提供科学依据。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA),检测患者血清HBVDNA载量、血清学标志及preS1抗原。结果155例HBVDNA载量大于103拷贝/ml的标本中,preS1阳性136例,HBeAg阳性100例,两种检测指标间存在显著性差异(P<0·01)。preS1/HBeAg组合分析检测HBV复制的灵敏度100%、特异性78·1%。preS1或HBeAg阳性患者HBVDNA拷贝数显著高于preS1或HBeAg阴性患者(P<0·01)。结论血清preS1、HBeAg与HBV复制密切相关。作为反映HBV复制的指标,preS1优于HBeAg,preS1/HBeAg组合分析优于preS1,preS1/HBeAg在HBV的诊断和疗效评估方面有重要的临床应用价值。     

钙非依赖型磷脂酶A2活性的调节及生物学功能

钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2)属于Ⅵ型磷脂酶A2,其活性受蛋白激酶C(PKC)、钙调蛋白、活性氧等物质的调节。iPLA2分解产生的花生四烯酸(AA)和溶血磷脂是一类信号传递因子,参与调节多种细胞功能。该文就iPLA2的调节及生物学功能作一综述。     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱血清蛋白指纹图谱在肿瘤诊断中的应用

蛋白质组学是当今生命科学研究中最活跃的前沿领域，蛋白指纹图谱技术是研究蛋白质组的技术手段之一，由蛋白芯片及表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）两部分组成，可通过蛋白表达图谱模式快速筛选肿瘤标志物，进行肿瘤的诊断。现就该技术的一般原理及在肿瘤诊断中的应用作一综述。     

肝癌细胞凋亡基因调控的研究进展

肝癌细胞凋亡调控的基因分为两大类,一类是抑制肝癌细胞凋亡的基因,主要有Bcl-2和生存素(Survivin);另一类是促进肝癌细胞凋亡的诱导基因,有p53、Fas/FasL、TRAIL等。通过这些基因的表达和相互作用,对肝癌细胞凋亡的调控起着重要的作用。     

细胞角蛋白19基因扩增及过度表达的研究

目的: 建立荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测CK19基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用.方法: 建立FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定30名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和91例乳腺癌患者外周血中CK19的表达.结果: CK19表达水平在正常对照组和良性乳殚腺疾病组间差异无显著性意义(P>0.05),乳腺癌组均高于前两组(P<0.05),B2-微球蛋白在三组间差异无显著性意义(P>0.05).91例乳腺癌患者阳性率为49.5%,良性乳腺疾病组为0.CK19表达与患者年龄和肿瘤大小和类型无关(P>0.05),与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关(P<0.05).结论: .FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CK19方法,可有效监测乳腺癌的诊断、疗效、转移和预后.     

溴酚蓝测定尿液白蛋白的方法改进

最近Shosinsky氏等(Clin Chem 33:223,1987)建立了用溴酚蓝测定尿液中白蛋白的方法,该法具有简便、快速、灵敏等优点,但测定稳宅性差,既便在30秒内完成比色,受球蛋白的干扰仍较大。我们对该法进行了改进,其反应的稳定性和特异性都有很大提高。现介绍于下。     

ELISA实验Levey—Jennings室内质量控制分析处理方法

临床实验室质量管理的第一要素是选择和执行适当的室内质量控制（Internal quality control,IQC）程序,例如依据测定项目的质量要求和方法特点选择统计学标准、控制规则和质控品的数目,并严格执行IQC程序以提高IQC的质量。对质量控制过程和结果的分析、对失控原因的分析和处理及相关记录是质量控制过程得到认可的重要依据,也是目前临床实验室质量管理的薄弱环节,许多实验室都不知道应该如何具体进行ELISA质量控制分析记录,存在不分析、不记录,或分析、记录不规范的情况。笔者综合一些医院、血站的经验,结合自身工作体会,参考有关专著介绍如下,供读者参考。     

甘氨脱氧胆酸对肝细胞膜流动性及脂质过氧化的作用研究

目的 研究甘氨脱氧胆酸(GDCA)对肝细胞脂质过氧化及细胞膜流动性的影响,探讨GDCA 肝损伤机理。方法 以 GDCA 为处理因素,体外培养肝细胞。结果 终浓度为250μmol/L 时,GDCA 组培养1～4小时,肝细胞 MDA 含量显著增加(P<0.001),细胞膜流动性显著降低(P<0.02)。随着丙二醛(MDA)的增加和细胞膜流动性的降低,肝细胞释放 ALT 增加,r 分别是0.945和0.986。结论 GDCA 能引起肝细胞 MDA 增加和膜流动性降低,从而导致肝细胞损伤,从新的角度解释了 GDCA 的肝损伤机理。     

CK19和Ccnd1 mRNA联合检测在乳腺癌诊断中的临床研究*

目的:建立荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测细胞角蛋白19（CK19）和细胞周期蛋白D1（Ccnd1）基因表达水平，探讨其联合检测在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用。方法:建立FQ-PCR 法，并以β 2- 微球蛋白为内对照测定15例健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中CK19和Ccnd1 的表达量。结果:正常对照组、良性乳腺疾病和乳腺癌组CK19表达水平分别为（1.42± 0.12，1.46± 0.11，3.29± 2.12）× 10-3，Ccnd1 表达水平分别（1.44± 0.11，1.46± 0.10，3.76± 0.39）× 10-3，两种基因表达水平在正常对照组和良性乳腺疾病组间无显著性差异（P>0.05），乳腺癌组均高于前两组（P<0.05），β 2- 微球蛋白在三组间差异无显著性意义（P>0.05）。 81例乳腺癌患者中CK19和Ccnd1 的阳性数分别为44例和41例，阳性率分别为54.3% 和40.7% ，良性乳腺疾病组阳性数为0。CK19和Ccnd1 联合检测的阳性数49例，阳性率为60.5% ，两者联合检测的灵敏度高于单个基因的检测。结论:FQ-PCR 技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测CK19和Ccnd1 方法，两者联合检测可有效提高对乳腺癌诊断的灵敏度。