茯芩菌液态发酵合成茯芩三萜的实验研究

目的:探索茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的工艺条件.方法:从碳源、氮源、金属离子、辅助因子及初始pH角度对茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的过程进行系统分析,以确定高效发酵工艺.结果:最佳碳源为葡萄糖、氮源为玉米浆粉、添加金属离子ZnSO4、MnSO4、CuSO4或FeSO4以及辅助因子2-硫代巴比妥、初始pH范围为5～6.结论:通过培养基和发酵条件优化设计可显著提高茯苓三萜的合成效率.     

不同来源栀子中栀子苷含量测定

目的 测定不同来源栀子中栀子苷含量.方法 采用HPLC法.色谱柱:Agilent C18柱;流动相:甲醇-水(25:75);柱温:30 ℃;检测波长:238nm;流速:1.0 mL/min;进样量:10μL.结果 栀子苷在2.9～57.8μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 5),加样回收率99.58%,RSD为2.8%.湖南石门野生栀子的栀子苷含量高;储存期短的栀子中栀子苷含量较高:相同储存期栀子栽培品和野生品栀子苷含量接近.结论 不同产地、品种、储存期栀子中栀子苷含量存在差异.     

从卵巢形态结构及MMP-9、TIMP-1表达优选PCO大鼠造模法

目的优选PCO大鼠的造模方法。方法分别采用来曲唑、硫酸普拉睾酮钠、硫酸普拉睾酮钠联合HCG诱导PCO大鼠模型。应用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1在大鼠卵巢组织中的表达,HE染色后光镜下观察卵巢局部形态。结果 MMP-9在模型组大鼠卵巢组织中的表达增高,差异有显著统计学意义（P〈0.01）;TIMP-1表达在模型组大鼠卵巢组织中均降低,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）。3种造模方法均能诱导PCO动物模型,其中来曲唑造模法最优,符合PCOS动物造模要求。结论采用来曲唑造模法诱导PCO大鼠动物模型效果最佳。     

忽地笑加兰他敏生物合成代谢途径中COMT酶基因克隆及序列分析

目的克隆忽地笑加兰他敏合成代谢途径中COMT酶基因及序列分析。方法通过比较数据库中四种植物烟草、唐松草、玉米和罂粟的儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因的同源序列,设计简并引物,克隆出忽地笑COMT酶基因（LaCOMT）的部分序列,然后通过RACE技术获得LaCOMT的全长序列。结果该序列开放读码框长度为1101bp,编码366个氨基酸,且此氨基酸序列具有依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶蛋白的三个保守序列,并与高等植物COMT氨基酸序列（CAA52462.1、AAQ01670.1、AAD29844.1和NP₀01106047.1）的同源性大于74%。LaCOMT蛋白的预测分子量为40 501.9,等电点pI为5.95。结论此研究所获得的碱基序列为COMT酶基因的全长序列,且其预测的三级结构与咖啡酸-3-氧位甲基转移酶单体三级结构的1kyzE模型相似,均为依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶。     

mRNA差异显示法筛选黄花石蒜中加兰他敏合成相关基因

目的筛选和克隆黄花石蒜加兰他敏相关基因。方法采用mRNA差异显示法(mRNA differential displayPCR,DD-PCR),对7月份黄花石蒜产加兰他敏含量最高的部位花蕊和含量最低的部位花葶进行基因表达差异的研究,筛选其差异片段,再对差异片段进行回收、克隆、测序及序列分析和同源性比较。结果黄花石蒜花蕊和花葶中存在明显的基因表达差异,发现差异条带44条,经序列分析和同源性比较,确认其中2个条带与黄花石蒜加兰他敏合成相关,另一条可能与加兰他敏运输代谢调控有关。结论通过DD-PCR得到的3个同源序列为研究黄花石蒜中加兰他敏的合成途径提供了有力依据。     

木香饮片和新鲜药材DNA片段的克隆及同源性比较分析

目的对木香的饮片和新鲜药材进行DNA片段的比对分析,为木香的鉴定提供研究思路。方法选取木香饮片和新鲜药材,利用CTAB法提取其基因组总DNA,再进行PCR扩增筛选随机引物,找出能同时扩增饮片及新鲜药材基因组总DNA的随机引物,对饮片及新鲜药材基因组总DNA扩增产生的一致性条带进行克隆,得到阳性菌落,经转化子鉴定后测序。对所测序列进行生物信息学分析和同源性比较。结果木香饮片与新鲜药材长度均为794 bp的克隆片段序列相似度达99.75%,长度为1 116 bp的克隆片段的核苷酸水平比对及氨基酸水平比对的相似度均为100%。结论采用分子生物学手段能对木香饮片和新鲜药材进行鉴定。     

吴茱萸的心血管药理研究

吴茱萸能明显升高麻醉大鼠和狗血压，增强离体蟾蜍心肌收缩力和增加心输出量，增强在体兔心心肌收缩力和麻醉犬心功能，减少离体蟾蜍和大鼠后肢血管灌流量，增加麻醉犬后肢血管阻力，改善正常家兔球结膜微循环。初步分析，吴茱萸的心血管药理作用与兴奋α，β肾上腺素能受体有关。     

人参五灵脂配伍对小鼠四氯化碳肝损伤影响的实验研究

人参五灵脂配伍对小鼠四氯化碳肝损伤影响的实验研究（湖南中医学院４１０００７）郭国华，鲁耀邦，武幽兰，陈建国，宋浩，宋力飞主题词人参／药理学，五灵脂／药理学，中药配伍人参与五灵脂配伍属中药传统十九畏的范畴，历代医家在临床处方用药时大多不敢贸然合用。为了...     

人β防御素-2基因在解脲支原体感染女性生殖道组织中的表达

目的:检测人β防御素-2基因(hBD-2)在正常及解脲支原体感染的女性生殖道的表达情况及与炎症程度的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常及解脲支原体感染的女性宫颈、子宫内膜中hBD-2基因的表达情况,用β-actin作内参照。结果:在正常及解脲支原体感染女性宫颈、子宫内膜中hBD-2基因均有表达,且支原体感染的女性hBD-2基因表达比正常女性明显增强,二者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:hBD-2在正常及解脲支原体感染的女性生殖道中有广泛表达,且后者比前者明显,提示hBD-2在正常女性生殖道特别是在解脲支原体感染中起着重要的防御作用。     

忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性研究

目的 探讨忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性.方法 从忽地笑鳞茎中分离内生菌,分别进行发酵培养,采用其发酵浓缩液做体外抑菌试验,观察对常见病原菌的抑制作用.结果 从忽地笑鳞茎中分离出10株内生菌,其中真菌L-10对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有不同程度的抑制作用,其抑菌圈直径分别达到15、11 mm.结论 忽地笑内生菌可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型抗菌药物的筛选提供了新的分离途径.