人脂肪来源干细胞对小鼠压疮愈合影响的实验研究

目的探讨人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs)对小鼠压疮创面愈合的影响。方法取自愿捐赠的人脂肪组织,采用机械分离联合胶原酶消化法获取hADSCs并传代。取第3代细胞行成骨、成脂、成软骨分化以及流式细胞仪鉴定。取健康自愿者捐赠的外周血,采用离心法制备富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP),并行血小板计数。取45只C57BL/6小鼠采用磁铁夹压法于背部制备压疮模型,随机分为3组(n=15);hADSCs组、PRP组及对照组创面分别注射100μL经携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记后的hADSCs(1×106个)、人PRP、PBS。注射后观察压疮创面愈合情况,5、9、13 d计算创面愈合率;5、11、21 d取标本行HE染色、Masson染色以及CD31、S100免疫组织化学染色,观察创面血管、神经再生情况。hADSCs组于11 d时荧光示踪法观察细胞定植及成活情况。结果经诱导分化及流式细胞仪鉴定分离培养细胞为hADSCs。PRP血小板计数显著高于正常外周血(t=5.781,P=0.029)。大体观察,注射后hADSCs组创面愈合优于PRP组及对照组,5、9、13 d,hADSCs组创面愈合率明显高于PRP组及对照组(P0.05)。组织学观察示,与PRP组及对照组相比,hADSCs组炎性细胞浸润、炎性反应明显减轻,胶原沉积明显增多,且21 d时可见皮肤附属器再生;注射后各时间点,hADSCs组胶原表达量均显著高于PRP组及对照组(P0.05)。免疫组织化学染色示,各时间点hADSCs组新生血管数、S100阳性细胞百分比均明显多于PRP组和对照组(P0.05)。荧光示踪法显示注射11 d后hADSCs可定植于创面并成活。结论局部移植的hADSCs通过促进血管新生和神经再生,进而促进小鼠压疮创面愈合、提高愈合质量。     

壳聚糖神经导管联合施万细胞桥接修复周围神经缺损新进展

正壳聚糖(Chistosan,CS)是一种生物相容性良好,可降解且无毒性的生物材料,其具有促进神经生长因子分泌的特点,同时发挥广泛的抗菌、抗炎、止血、止痛作用。壳聚糖及其衍生物可用于神经损伤的修复,以及作为神经支架,联合各种生长因子、种子细胞等桥接神经缺损。施万细胞(Schwann cells,SCs)是周围神经系统的主要胶质细胞,具有多种生理功能,当周围神经受损时,可为轴突再生提供通道,可分泌数种神经营     

进一步改良Sihler's肌肉神经染色法显示SD大鼠皮肤神经

目的　探讨进一步改良Sihler's肌内神经染色法在显示SD大鼠皮肤神经分布中的应用。 方法　选取成年SD大鼠6只处死后紧贴肌肉表面分别于背侧及腹侧切取皮肤,最终获得背侧皮肤6块,腹侧皮肤6块,经10%甲醛溶液固定1月,无水乙醇脱脂3 d,并于0.25%的胶原酶Ⅰ和Ⅲ溶液中消化3 d后,经进一步改良的Sihler's肌内神经染色法染色SD大鼠皮肤。 结果　12块SD大鼠皮肤经染色后,除2块皮肤染色效果不佳外,其余10块皮肤均获得了良好的效果。在除色素的过程中,表皮常常脱落,即使不脱落,平铺的皮肤上也不能分界表皮与真皮,无法看见表皮内神经分支,且在解剖过程中剔除皮下脂肪时,部分皮下脂肪难以剔除干净,故肉眼可见部分皮下脂肪内明显的神经分布。透过X线阅片灯肉眼即可见皮肤呈现淡紫色,而神经为黑色,各区域神经分布不均,直径、形态及颜色深浅也不相同。甚至可看见神经呈现扭曲、打结的现象。 结论　经进一步改良的Sihler's肌内神经染色法染色SD大鼠皮肤,能够清晰显示肉眼可见的皮肤神经分布,这些结果将对于SD大鼠皮肤内各区域神经纤维密度的测定及动物模型中皮瓣移植后神经再生情况的研究具有一定意义。     

游离分叶穿支皮瓣修复四肢复杂创面北大核心CSCD

目的探讨游离分叶穿支皮瓣修复四肢复杂创面的疗效。方法2018年1月—2021年1月,收治10例四肢复杂创面患者。男7例,女3例;年龄32~64岁,平均45岁。致伤原因:交通事故伤4例,机器绞伤3例,机器挤压伤1例,重物压砸伤2例。上肢创面5例,下肢创面5例。创面范围11 cm×10 cm~25 cm×18 cm。采用旋股外侧动脉降支穿支三叶皮瓣7例、四叶皮瓣2例,旋股外侧动脉降支联合斜支穿支三叶皮瓣1例。皮瓣切取范围12.0 cm×10.5 cm~28.0 cm×12.0 cm。供区直接缝合9例,接力旋髂浅动脉穿支皮瓣修复1例。结果术后1例皮瓣边缘窦道形成,经换药、引流后愈合;其余皮瓣均顺利成活,创面Ⅰ期愈合。供区皮瓣成活,切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访,随访时间6~24个月,平均11个月。皮瓣无明显臃肿,色泽、质地良好。供区仅遗留线性瘢痕。结论游离分叶穿支皮瓣能有效修复四肢复杂创面,术后皮瓣成活率高,并发症少。     

脂多糖性肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8的变化及低剂量环磷酰胺的干预作用

目的:观察低剂量环磷酰胺对脂多糖性肺损伤模型大鼠血白细胞介素1β和白细胞介素8的影响,并与地塞米松进行阳性对照。方法:实验于2003-03/12在遵义医学院外科动物实验室、中心实验、病理实验室进行。取160只SD大鼠随机分为4组(n=40):环磷酰胺组、模型组、地塞米松组和生理盐水组。除生理盐水组外,其他3组大鼠采用腹腔注射内毒素脂多糖5mg/kg制作肺损伤模型。注射脂多糖后,环磷酰胺组立即腹腔注射1mL环磷酰胺(4mg/kg);地塞米松组腹腔注射1mL地塞米松(5mg/kg);模型组腹腔注射1mL生理盐水。生理盐水组腹腔注射生理盐水2mL。各组于模型制作后第1,4,6,8小时分别取10只采血,以ELISA法测血清中白细胞介素1β和白细胞介素8水平,且于第6小时留取肺组织进行肺组织的病理学光镜检查。结果:160只大鼠全部进入结果分析。①肺组织的病理学变化:模型组大鼠肺泡腔见大量出血及炎性细胞浸润,支气管上皮剥脱、水肿等,环磷酰胺组和地塞米松组也可见炎细胞浸润、肺萎陷现象,与模型组比较,明显减轻(P<0.05)。②白细胞介素1β水平:模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组,6h达到峰值(P<0.05);环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组(P<0.05),但两组间差异不显著(P>0.05)。③白细胞介素8水平:模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组,8h达到峰值(P<0.05);环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组(P<0.05),但两组间差异不显著(P>0.05)。结论:低剂量环磷酰胺与地塞米松一样具有明显的抗炎作用,能降低肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8水平,减轻其肺组织损害。     

改良带蒂旋髂浅动脉皮瓣修复手部及前臂创面

目的探讨改良带蒂旋髂浅动脉皮瓣修复手部及前臂大面积皮肤软组织缺损的疗效。方法 2008年6月-2011年6月,收治13例手部及前臂大面积皮肤软组织缺损患者。男9例,女4例;年龄23～64岁,平均41岁。致伤原因:机器绞轧伤2例,钢绳轧伤4例,交通事故伤3例,重物压伤2例,高压电击伤1例,蛇咬伤1例。新鲜创面10例,感染坏死创面3例。创面均伴骨及肌腱外露,皮肤软组织缺损范围为7 cm×3 cm～22 cm×6 cm。8例采用带蒂旋髂浅动脉皮瓣修复,5例采用带蒂旋髂浅动脉复合组织瓣修复。术中切取皮瓣蒂部携带2～4 cm宽皮条及3～5 cm宽软组织筋膜蒂;皮瓣切取范围为12 cm×4 cm～27 cm×8 cm。结果术后1周1例皮瓣部分撕脱出血,4周后断蒂;其余皮瓣均于术后3周断蒂;皮瓣均成活。供区切口Ⅰ期愈合。11例患者获随访,随访时间6～36个月,平均20个月。皮瓣色泽、质地好;其中3例皮瓣外形较臃肿,于术后3～6个月行皮瓣修薄术后外形满意。术后6个月皮瓣均恢复保护性感觉。术后6个月根据中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定手指总主动活动度(TAM),获优9例,良1例,差1例。结论改良蒂部的带蒂旋髂浅动脉皮瓣可修复手部及前臂大面积皮肤软组织缺损,且手术操作简便,供区损伤小。     

不同程度耳廓撕脱伤的修复

目的总结不同程度耳廓撕脱伤修复方法的选择及疗效。方法 2005年8月-2010年12月,收治26例耳廓撕脱伤患者。男10例,女16例;年龄5～63岁,平均27.5岁。致伤原因:机器绞伤9例,交通事故伤5例,暴力撕脱伤6例,动物咬伤6例。损伤部位:全耳廓撕脱6例,耳廓上1/3～2/3撕脱8例,耳廓外1/5～2/3撕脱6例,耳垂撕脱6例。受伤至手术时间1～12 h,平均4.5 h。直接清创原位缝合8例,血管吻合再植7例,一期清创、二期皮瓣再造5例,残端修整缝合6例。结果术后6例残端修整缝合切口均Ⅰ期愈合;其余患者中耳廓完全成活14例,部分成活3例,坏死3例。26例均获随访,随访时间6～24个月,平均16个月。直接清创原位缝合及血管吻合再植成活者耳廓外观优于其余方法。患者听力均正常。结论对于全耳廓撕脱伤应首选血管吻合再植修复,对于耳廓撕脱组织小且无可供吻合血管者可选择原位直接缝合。     

重塑趾(指)甲治疗难治性甲沟炎

甲沟炎是门诊外科一常见病、多发病.一般认为病因为[1]:①嵌甲 趾(指)甲嵌入甲沟软组织内,导致甲沟部软组织受到挤压.影响局部血液循环产生炎性反应,是引起甲沟炎的主要原因.嵌甲可能与不良生活习惯有关,如鞋子较小、鞋头狭窄等.②感染 可能与拔手指甲肉刺、咬指甲等不良卫生习惯有关.甲沟部污物积聚,细菌繁殖产生炎性反应.③外伤 跌伤、踢伤或剪甲等造成甲沟或甲床组织损伤,继发细菌感染.临床上对于第2、3种病因所致甲沟炎,治疗效果好,但对于第1种病因所致甲沟炎的治疗效果欠佳.目前一般采用拔甲、甲床部分切除、趾(指)侧梭形切除等方式治疗,但复发率高,特别是嵌甲及感染后拔甲治疗复发率为100％.2008年3月至2010年5月我们采用重塑趾(指)甲及甲皱襞,治疗难治性甲沟炎30例,术后随访无复发病例.     

乳胶-四氧化三铅液在穿支血管造影中的比例探讨

目的探讨一种可在常温下操作、简便易行、效果好的穿支血管造影液配比。方法常温下用不同配比的乳胶、水、四氧化三铅混合液对穿支血管进行灌注,灌注后的标本肉眼观察及X线摄片,比较其效果。结果乳胶（ml）：水（ml）：四氧化三铅（g）以1∶1∶2的比例配制灌注效果好,肉眼及X线片可见清晰的小血管网。配比中加入广告色、墨水等小分子量色料的效果差,影响观察血管。结论乳胶-四氧化三铅液是简便易行的小血管造影剂,其最佳配比∶乳胶（ml）：水（ml）：四氧化三铅（g）为1∶1∶2。