将毕业实验设计与微生物学实验课程合并开展的新型教学方式

医学院校生物专业毕业生微生物实验设计复杂,实验周期长;低年级微生物实验课简单、枯燥,系统性差。探讨开创一条将毕业级实验与低年级微生物学实验课程合并开展的新型实验教学方式。一方面高水平高质量的完成毕业生实验设计工作,另一方面也提高低年级学生的实验技术水平,同时高效利用和节约实验室资源,达到一举多得的效果。     

血管内皮抑制因子α-干扰素和γ-干扰素对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响

目的:探讨α-干扰素(IFN-α)和γ-干扰素IFN-γ对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响及作用机制.方法:内皮细胞取自猪的胸导管.应用Hoechst和Caspase染色法检测IFN-α和IFN-γ诱导的细胞凋亡;采用划线法和MTT法观察IFN-α和IFN-γ对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响;活兔后肢切断淋巴管并分别注射IFN-α和生理盐水,观察淋巴管的再生情况.结果:经IFN-α和IFN-γ处理后,淋巴管内皮细胞其核周围有凋亡小体Caspase染色阳性表达;IFN-α和IFN-γ对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用;手术切断兔后肢淋巴管后16 d,IFN-α侧仍有大量染料渗漏.结论:IFN-α和IFN-γ具有促进细胞凋亡的作用.IFN-α和IFN-γ对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用.     

HBV DNA经小鼠精细胞垂直传递的研究

目的 建立乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)垂直传递的小鼠模型,探讨HBV垂直传递的机制.方法 体外培养小鼠精细胞,阳离子转染剂介导HBV DNA转染精细胞,应用聚合酶链反应(PCR)检测小鼠精细胞中HBV DNA的存在,并使用荧光原位杂交技术(FISH)观察HBV DNA在精细胞中的定位;采用精子载体法建立HBV DNA垂直传递小鼠模型,应用PCR和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测新生代小鼠中HBV DNA的存在及表达.结果 PCR检测到被转染的精细胞中有HBV DNA的存在,并且荧光显微镜下部分精子带有黄绿色阳性杂交信号,主要在精子头部的中后部区域两侧和顶部;31只新生代小鼠中11只小鼠检出HBV DNA,其中又有3只检出HBV RNA.结论 为研究乙肝病毒垂直传播的机制建立了理想的HBV DNA垂直传递小鼠模型.     

牛磺酸通过调控AKT/NF-κB通路改善脓毒症小鼠肝脏损伤的保护作用

目的探究牛磺酸对脂多糖(LPS)所致脓毒症小鼠肝损伤的保护作用。方法本研究于2022年2月至7月进行。50只ICR小鼠(4～5周龄, 体质量18～22 g)分为空白对照组(Control组)、LPS造模组(LPS组)、牛磺酸低剂量组(L+L组, 100 mg/kg)、牛磺酸中剂量组(L+M组, 200 mg/kg)和牛磺酸高剂量组(L+H组, 400 mg/kg), 牛磺酸连续腹腔注射给药7 d, 实验第7天腹腔注射LPS建立脓毒症模型。测定小鼠肝脏、肾脏和肺脏指数;外周血血常规分析;测定肝脏丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的含量;Western blot及免疫组化检测肝脏核因子(NF)-κB、核因子κB抑制蛋白(IκB)和蛋白激酶B(AKT)的表达变化。采用t检验或单因素方差分析。结果与LPS组相比较, 牛磺酸用药组的肝脏、肾脏及肺脏指数均明显降低(P<0.05, P<0.01, P<0.001);血常规显示白细胞计数和粒细胞比率明显降低, 淋巴细胞比率明显升高(...     

萝卜硫素对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的 探讨萝卜硫素对免疫抑制小鼠免疫功能的保护作用。方法 实验用小鼠随机分为4组：对照组、环磷酰胺（Cy）模型组、萝卜硫素高剂量组（30 mg/kg）和萝卜硫素低剂量组（15 mg/kg）,灌胃给药,比较四组小鼠脾脏指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素含量以及外周血淋巴细胞转化率;运用RT-PCR半定量法观察免疫调节基因TGF-β和PD-1mRNA的表达。结果 与对照组相比,免疫抑制小鼠血清溶血素OD值（0.702±0.08）、外周血淋巴细胞的转化率（42.22%）、胸腺指数（1.25±0.21）和脾脏指数（2.73±0.26）、吞噬百分率（31.86%）和吞噬指数（0.73±0.06）显著下降（P＜0.05）;但是与环磷酰胺模型组比较,萝卜硫素组小鼠血清溶血素OD值（1.325±0.10）、外周血淋巴细胞的转化率（51.44%）、胸腺指数（1.89±0.31）和脾脏指数（3.80±0.46）、吞噬百分率（43.56%）和吞噬指数（1.15±0.08）明显增加（P＜0.05）,免疫调节基因TGF-β和PD-1mRNA的表达量下降,并且具有剂量依赖性。结论 萝卜硫素可明显改善环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能,同时能有效抑制免疫调节基因TGF-β和PD-1的过度表达。     

大黄素对小鼠的免疫调节作用及对脾细胞TNF-α和IL-10表达的影响

目的探讨大黄素对小鼠的免疫调节作用,以及对免疫炎性因子TNF-α和IL-10表达的影响。方法将ICR小鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、大黄素高和低剂量组(10和5 mg/kg)。实验进行7 d,测定各组小鼠胸(脾)指数、血清溶血素含量、外周血T淋巴细胞转化率;ELISA检测外周血TNF-α和IL-10表达水平以及RT-PCR检测脾细胞TNF-α和IL-10 mRNA的表达。结果大黄素降低了小鼠的胸(脾)指数和外周血T淋巴细胞转化率,但提高了小鼠血清溶血素含量;大黄素用药组小鼠外周血TNF-α的表达水平降低,IL-10的表达水平上升;大黄素用药组小鼠脾细胞TNF-αmRNA的表达降低,IL-10 mRNA的表达升高。结论大黄素可以提高机体体液免疫功能,同时表现出良好的抗炎活性,但是对于免疫器官和细胞免疫功能有一定的抑制作用。     

二甲双胍对脂多糖致炎性反应小鼠的抗炎作用

目的探究二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)致炎性小鼠的抗炎效应。方法 ICR小鼠分为对照组、LPS组、二甲双胍高、中和低剂量组(400, 200和100 mg/kg)。对照组和LPS组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,其余3组注射不同剂量的二甲双胍;0.5 h后,除对照组外,其余4组腹腔注射等体积的LPS致小鼠炎性反应,6 h后测量小鼠的脾指数;ELISA检测小鼠血清中炎性因子IL-6、TNF-α和IL-10的表达;RT-PCR检测小鼠肝脏组织IL-6、TNF-α和IL-10 mRNA表达的变化;HE染色检测小鼠肝脏组织炎性反应变化。结果相对于LPS组,二甲双胍用药组小鼠的脾指数降低(P0.05);外周血IL-6和TNF-α及肝脏组织中IL-6和TNF-αmRNA的表达明显下降(P0.05);而外周血IL-10及肝脏组织中IL-10 mRNA显示上升(P0.05);二甲双胍高剂量组可明显减轻由LPS所致小鼠肝脏的炎性反应。结论二甲双胍对于LPS致炎性小鼠具有一定的抗炎活性。     

原花青素对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 探究原花青素（PC）对环磷酰胺（Cy）致免疫抑制小鼠的免疫调节作用及其对白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 选用40只ICR小鼠，随机均分为正常对照组、Cy模型组、PC高剂量组（100 mg/kg）和PC低剂量组（80 mg/kg）。灌胃给药，7 d后测定各组小鼠胸腺（脾脏）指数、血清溶血素水平、迟发型超敏反应性；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测外周血IL-10和TNF-α的表达；RT-qPCR测定小鼠脾脏TNF-α和IL-10 mRNA的表达。结果 PC能够提高小鼠胸腺、脾脏指数，一定程度恢复免疫抑制小鼠的迟发型超敏反应能力，提高血清溶血素含量；同时PC也可降低外周血IL-10的表达，升高TNF-α的表达；降低脾细胞IL-10 mRNA的水平，升高TNF-α mRNA的水平。结论 原花青素可以提升机体免疫功能，其调节机制可能是通过对细胞因子TNF-α和IL-10的调节来完成的。