乙型肝炎病毒对HepG2细胞IL-17R信号通路的影响

目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)重组腺病毒对HepG2细胞的IL-17R和接头蛋白Act1表达的影响,以及HBV对IL-17诱导NF-B活化的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测HepG2细胞的IL-17、IL-17R和Act1的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-17R和Act1的蛋白表达;免疫荧光检测NF-B核移位;ELISA检测上清的IL-17含量.结果:各组HepG2细胞培养上清液中均未检测到IL-17且亦未检测HepG2细胞有IL-17的mRNA表达;HBV重组腺病毒组的IL-17R mRNA和蛋白的表达明显低于相应浓度对照组(0.68±0.02vs0.89±0.03,0.33±0.06vs0.81±0.01,0.12±0.01vs0.86±0.05,P<0.05;蛋白:0.84±0.12vs1.01±0.13,0.56±0.09vs1.01±0.08,0.24±0.08vs0.98±0.05),且呈剂量和时间依赖性.但HBV重组腺病毒组与对照组比较,对HepG2细胞接头蛋白Act1的mRNA和蛋白表达水平无明显影响;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.但HBV重组腺病毒与对照组比较,对接头蛋白Act1在mRNA和蛋白表达水平上影响无明显变化;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.结论:HBV重组腺病毒可降低HepG2细胞的IL-17R mRNA和蛋白的表达,抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化,对HepG2细胞的IL-17R信号通路发挥抑制作用.     

异常剪切应力促兔颈总动脉粥样硬化模型的建立

目的建立异常剪切应力促兔颈总动脉粥样硬化（As）动物模型,论证不同程度As病变与不同程度和形式的剪切应力相关,为研究异常剪切应力在As中的作用奠定基础。方法给予26只新西兰兔右颈总动脉硅胶管套环后等分为对照组（给予普通饮食）和高脂组（2％高胆固醇饮食）;9周后处死动物,第。周和第9周收集血清测量总胆固醇（Tc）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、甘油三酯（TG）水平;采集两侧颈总动脉,苏丹Ⅳ和HE染色观察颈总动脉As斑块面积。结果高脂组血清TC、LDLC和HDLC水平明显较对照组高（P〈0．05）。颈总动脉苏丹Ⅳ染色和HE染色显示：高脂组远心段和近心段都有斑块形成,且近心段斑块更加明显,并有大量泡沫细胞堆积。结论成功构建了异常剪切应力促兔颈总动脉As模型,并提示不同节段不同程度As病变与异常剪切应力相关。     

pcDNA3.1/ SjDLC 和pcDNA3.1/mIFN-γ重组质粒构建及表达

目的 构建日本血吸虫动力蛋白轻链DNA疫苗和小鼠干扰素真核表达质粒,研究其在HeLa细胞及动物体内的表达。方法设计特异性引物,PCR扩增获取动力蛋白轻链(SjDLC)与干扰素-γ(IFN-γ)基因,克隆于pcDNA3.1真核质粒,经双酶切及测序鉴定。将两种重组质粒分别转染至HeLa细胞,Western blot鉴定其表达。真核质粒经左腿股四头肌免疫小鼠,在末次免疫2周后,PCR法检测小鼠肌组织内SjDLC和IFN-γ基因,免疫组织化学法检测基因的表达,MTT法检测T细胞增殖水平。结果PCR和双酶切能检测到280 bp的SjDLC基因及480 bp的IFN-γ基因;Western blot显示在12 kDa和19 kDa处有阳性反应条带,与SjDLC和IFN-γ分子量大小一致,两种基因能在HeLa细胞中表达。PCR及免疫组化显示两种基因能在小鼠肌肉组织中存在和表达。MTT法显示两种质粒均能刺激T细胞增殖。结论成功构建pcDNA3.1/SjDLC和pcDNA 3.1/ mIFN-γ真核质粒,两种质粒能在HeLa细胞和动物体内表达。     

犬肝微波单纯热凝固化后并发症的观察

目的　观察犬肝微波单纯热凝固化后并发症 ,探讨其发生原因与防治 ,为临床治疗不能切除的中晚期肝癌提供借鉴。方法　采用植入式微波治疗机对犬肝行微波内照射 ,作局部组织微波单纯固化后留置。实验犬分为A、B、C 3组 ,A组行全肝每叶双点微波辐射 ,B组行部分肝叶多点微波辐射 ,C组在B组的处理基础上于术后置腹腔引流管及肌注抗生素。结果　A组犬 75%因肝功能衰竭死亡 ,B、C组全部存活。 7d后探查 ,B组犬 75%出现膈下脓肿。结论　在微波辐射量相同的情况下 ,部分肝叶多点微波辐射比全肝每叶双点辐射安全 ;微波治疗后应常规放置腹腔引流管 ,并注射抗生素预防感染。     

南华大学临床技能学课程金课实践

高等学校本科教育质量评价的重点在于课程质量.金课是教育部提出的具有高阶性、创新性和挑战度特点的高质量课程标准,是国家教育部对于建设一流本科教育的要求.文章介绍了南华大学衡阳医学院临床技能学课程在教学实践中,以金课的标准和要求贯彻课程教学,广泛调动了学生的积极性和主动性,取得了更好的教学效果,是提高课程质量的有效方法,应...     

尿沉渣联合干化学法检测在鉴别诊断儿童血尿来源中的应用

目的：观察尿沉渣与干化学法相结合对于儿童血尿来源检测的准确性。方法选取医院2012年9月－2013年9月收治的66例儿童血尿患者，对其采用尿沉渣结合干化学法进行血尿来源检测，观察2组的准确率。结果尿沉渣及干化学法联合检查与普通临床检测结果相比，其对肾性和非肾性血尿检测的准确率分别为86．67％及91．67％。结论在儿童血尿来源检测中，运用尿沉渣联合干化学法对非肾性血尿检测的准确性高于肾性血尿。     

早期肠内营养对严重烧伤病人肠源性感染的防治

目的：探讨早期肠内营养对严重烧伤病人肠源性感染的防治价值。方法：2001年1月—2002年3月随机将50例严重烧伤病人分成两组，观察组30例，对照组20例，观察组采用早期有效抗生素、创面处理和早期肠内营养，对照组采用早期有效抗生素、创面处理和静脉营养。结果：观察组中肠源性感染的发生率明显低于对照组，两组差异有显著性(P＜0．05)。结论：早期肠内营养对烧伤病人肠源性感染的防治有重要作用。     

日本血吸虫感染小鼠的髓源抑制细胞对T 细胞的免疫抑制

目的:研究日本血吸虫感染小鼠模型中的髓源抑制细胞(MDSCs)的免疫抑制功能及对T细胞的作用机制。方法:构建日本血吸虫感染BALB/c小鼠模型,流式细胞术检测MDSCs动态比例变化,免疫磁珠分选小鼠骨髓中单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs (CD11b~+Gr1~+Ly6G~+)亚群细胞,Write-Giemsa染色进行形态学鉴定; CFSE法检测单核系和粒系MDSCs亚群对CD4~+T、CD8+T细胞增殖的抑制作用,Real-time PCR方法检测细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β和精氨酸酶(ArgⅠ)、一氧化氮合酶2(NOS2)的表达。结果:血吸虫感染模型小鼠的MDSCs较对照组小鼠明显增多,以粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群增多为主。两个亚群细胞均能降低CD4+T、CD8+T细胞的增殖活性,粒系亚群MDSCs的抑制作用更显著; Real-time PCR结果显示两个亚群细胞的细胞因子IL-4、IL-10、IL-13、TNF-α、IFN-γ以及ArgⅠ、NOS2的表达水平均不同程度升高。结论:血吸虫感染模型小鼠体内的MDSCs显著增高,单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群均能抑制CD4~+T、CD8~+T细胞增殖,其作用机制可能与两亚群细胞均能上调相关细胞因子IL-4、IL-10、IL-13和ArgⅠ、NOS2的表达有关。     

Ibrolipim对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体Al表达及肿瘤坏死因子-α释放的影响

目的为探讨巨噬细胞源性泡沫细胞肿瘤坏死因子-α的释放与新药Ibrolipim（NO-1886）抗动脉粥样硬化作用的关系。方法采用体外培养的THP-1细胞构建泡沫细胞模型,分别经Ibrolipim处理6、12、24 h后,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化,双抗体夹心法检测细胞培养液肿瘤坏死因子-α的水平,免疫印迹法检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A l蛋白的表达。结果与对照组比较,泡沫细胞经Ibrolipim处理6、12、24 h后,细胞内总胆固醇含量和游离胆固醇含量不断减少,细胞培养液中的肿瘤坏死因子-α水平逐渐降低,细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A l蛋白的表达升高。结论Ibrolipim抗动脉粥样硬化的作用与其减少泡沫细胞肿瘤坏死因子-α的释放有关。     

99mTc-MIBI全身显像及P糖蛋白预测中晚期非小细胞肺癌患者多药的耐药性

目的旨在中晚期非小细胞肺癌（Non-small-call lung cancer,NSCLC）患者半年随访期间利用99m Tc-MIBI全身显像（whole body scintigraphy,WBS）及P糖蛋白（P-glycoprotein,PGP）预测其多药耐药（multiple drug resistance,MDR）。方法共入组57例中晚期NSCLC患者[男性39例,女性18例,平均年龄（59.5±14.7）岁],其中20例初诊患者未接受过任何治疗,37例复诊患者既往有过放化疗病史。所有患者初诊或治疗前均行PET/CT显像,原发病灶或转移病灶均由病理证实为NSCLC （腺癌31例,鳞癌26例）。患者开始治疗前进行一次WBS及PGP测定,疗效于半年之后复查PET/CT进行评价。当WBS检查显示至少一个部位存在非生理性放射性聚集时,则提示WBS阳性。当患者具有活性病灶,但WBS显示阴性,则提示存在MDR。结果WBS预测NSCLC患者发生MDR的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别为:40%、73.7%、70.6%、43.8%及57.1%。而PGP... 更多