华细辛气相色谱指纹图谱及药材含量测定研究

目的建立华细辛挥发油的气相色谱(GC)指纹图谱并采用内标法对α-蒎烯、莰烯和甲基丁香酚3种成分进行定量分析。方法采用水蒸气蒸馏法提取华细辛中的挥发油,利用毛细管气相色谱对其进行分析,采用DB-1石英毛细管柱(25 m×0.32 mm,0.25μm),氢火焰离子化检测器,程序升温,流速为1m L·min-1,进样量为1μL,分流比为10:1,内标物为丁香酚。结果获得了较为理想的华细辛GC指纹图谱,确定了19个共有峰,建立了华细辛指纹图谱的共有模式,10批样品相似度均>0.95;α-蒎烯、莰烯和甲基丁香酚分别在0.024 0~0.768 0 mg·m L-1、0.005 0~0.160 0 mg·m L-1及0.066 0~2.112 0 mg·m L-1线性关系良好,平均回收率分别为92.0%、95.6%和97.8%,RSD分别为3.7%、1.7%和2.4%。结论该方法建立的华细辛指纹图谱和3种成分的定量测定方法,可为华细辛药材的质量评价提供依据。     

纵隔子宫两侧内膜夹角对纵隔切除术后产科结局的影响

目的：探讨纵隔子宫两侧内膜夹角对纵隔切除术后产科结局的影响。方法：将72例经阴道三维超声（3－dimention-al transvaginal ultrasound,3DTVU）诊断纵隔子宫并测量两侧内膜夹角,分小角度组（＜90°）,大角度组（≥90°）,均行腹腔镜监视下宫腔镜纵隔切除术（ transcervical resection of septum ,TCRS）。术后3个月3DTVU复查及随访18个月妊娠结局。结果：72例患者术前3DTVU诊断纵隔子宫与手术诊断结果均符合。术后2组纵隔残余发生率差异有统计学意义（ P＝0．016）。随访18个月,2组累计妊娠率和累计活胎分娩率差异均无统计学意义（ P＝0．295; P＝0．080）。结论：大角度组纵隔切除术后更易发生纵隔残余,而两侧内膜夹角对术后妊娠结局的影响尚待进一步研究。     

CaMKⅡ调控Na_V1.1与CaM的结合

目的探讨钙调蛋白激酶CaMKⅡ对电压门控性钠通道Na_V1.1结合钙调蛋白CaM的调节功能,分析CaMKⅡ在不同Ca~(2+)浓度下对二者结合的影响,进一步探讨CaMKⅡ、Ca~(2+)对CaM结合Na_V1.1的共同调节作用。方法应用pull-down技术检测不同Ca~(2+)浓度下经过CaMKⅡ磷酸化处理后Na_V1.1 IQ与CaM的结合情况。结果无钙条件下,CaMKⅡ不影响CaM与Na_V1.1 IQ的结合;有钙条件下,CaMKⅡ使CaM与Na_V1.1结合增加。结论钙离子存在时,CaMKⅡ磷酸化作用使Na_V1.1与CaM结合增加。     

注射用炎琥宁稳定性和相关产物的化学分析及毒性

目的研究注射用炎琥宁(脱水穿心莲内酯双琥珀酸半酯钠钾盐)的稳定性,分析其降解产物的化学组成,以在体实验考察极端条件获得降解物的毒性作用,为临床应用出现的不良反应分析提供借鉴。方法建立HPLC分析条件,分析炎琥宁分别在酸、碱条件下、常规生理盐水、葡萄注射液配制条件下的化学稳定性和成分变化情况,以LC-TOF-MS/MS法分析产物化学组成;采用HE染色法观察炎琥宁酸处理产物对实验动物对血管刺激性,对心、肝、肾等脏器的损伤程度,检测血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、谷丙转氨酶(GPT)、和谷草转氨酶(GOT)的含量来评价转化炎琥宁对实验动物的肝、肾损伤程度。结果炎琥宁/生理盐水注射液在日间24hr内稳定性良好;在pH 5-8的溶液环境下相对稳定,在pH5和pH8的条件下降解程度加大。毒性实验结果表明,与正常小鼠相比,炎琥宁酸处理产物组血清中的BUN显著降低(P0.01),CRE、GOT、和GPT显著升高(P0.01),而常规注射用炎琥宁组血清中的CRE也显著升高(P0.01)。常规炎琥宁组对肾脏均有不同程度的损伤,对血管刺激所导致的损伤能够随着时间恢复正常。结论本结果为临床应用注射用炎琥宁提供实验依据。     

高效液相色谱法测定头痛宁胶囊中天麻素含量的不确定度评定

目的建立高效液相色谱法测定头痛宁胶囊中天麻素含量的不确定度评估方法。方法结合CNAS-GL06-2006《化学分析中不确定度的评估指南》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,通过分析头痛宁胶囊中天麻素的测定过程,对各不确定度分量分析和计算,计算出合成标准不确定度和扩展不确定度。结果天麻素含量为(1.12±0.02)mg/g,k=2。测量不确定度的主要来源为标准品溶液配制、标准曲线拟合和回收率引入的不确定度,其次是稀释定容和样品重复性测定引入的不确定度,样品称量产生的不确定度较小,可忽略不计。结论本文建立的不确定度评估方法可用于头痛宁胶囊中天麻素含量测定的评定,为提高测定结果的准确度提供数据支持。     

青蒿素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响

目的探讨青蒿素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法将人膀胱癌T24细胞分为空白对照组与青蒿素组(50、100、200μmol/L)。不同浓度青蒿素干预48h后,MTT方法检测T24细胞的增殖活力,流式细胞术检测T24细胞的凋亡率。200μmol/L青蒿素干预48 h后,划痕实验与Transwell侵袭实验检测青蒿素对T24细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot实验检测T24细胞中PI3K、p-Akt与pmTOR的表达。结果不同浓度青蒿素均能显著抑制T24细胞增殖,并促进细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P0.01)。200μmol/L青蒿素干预48 h后,T24细胞迁移与侵袭能力显著降低,T24细胞中PI3K的表达以及Akt和mTOR的磷酸化水平降低(P0.01)。结论青蒿素能够通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡。     

聚乙二醇对盐酸伊立替康脂质体体外释放及在不同稀释介质中稳定性的影响

目的:考察不同聚乙二醇含量对盐酸伊立替康脂质体体外释放特性及在不同稀释介质中稳定性的影响。方法:采用乙二胺四乙酸铵梯度法,以聚乙二醇2000含量分别为0、8、14、20、26 mg/ml的聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(m PEG2000-DSPE)制备盐酸伊立替康脂质体,测定其包封率和粒径,评价其体外24 h内的累积释放度和在生理氯化钠溶液与5%葡萄糖注射液中的稳定性。结果:随着m PEG2000-DSPE含量的增加,盐酸伊立替康脂质体体外24 h累积释放度逐渐减小;以生理氯化钠溶液及5%葡萄糖注射液稀释后,随着m PEG2000-DSPE含量的增加,盐酸伊立替康脂质体的包封率和粒径变化均减小;当聚乙二醇2000质量浓度增加至20、26 mg/ml时,脂质体包封率和粒径基本不再变化。结论:m PEG2000-DSPE的加入可减慢盐酸伊立替康脂质体的体外释放,提高其在不同稀释介质中的稳定性。     

承德市不同职业人群乙肝疫苗复种意识的调查

目的了解不同职业人群乙肝疫苗复种意识现状。方法以调查问卷形式对承德市不同职业1140人进行调查。结果1140份调查问卷,有效答卷1078份,不同职业人群中均有相当数量自已有意向及支持亲友定期复查HBV—M根据需要复种乙肝疫苗加强针人数。对乙肝疫苗加强免疫注射预防乙型肝炎相关知识的了解缺乏,成为不能进行乙肝疫苗加强免疫注射的最主要因素。结论医疗卫生职业者愿意复种率及支持亲友复种率均高于其他职业者。因此,加强对不同职业人群进行HBV-M复查与乙肝疫苗复种加强免疫注射预防乙型肝炎相关知识的宣传教育,可以有效的推动承德市乙型肝炎免疫预防工作的开展,降低人群中乙型肝炎发病率,提高群众的身体健康水平。