Wnt/β⁃catenin信号通路参与马蹄内翻足畸形形成的研究

目的　探讨Sox9（sex determining region Y-box9）和β-catenin对先天性马蹄内翻足（congenital talipes equinovarus，CTE）的影响以及Wnt/β-catenin信号通路作用机制。 方法　将孕10 d的SD大鼠随机均分为实验组及对照组，以135 mg/kg全反式维甲酸溶于矿物油对实验组大鼠进行灌胃制作胎鼠CTE模型，对照组予以等量矿物油灌胃处理，取大鼠足踝部组织，通过免疫组化、RT-PCR、Western blot检测β-catenin、Sox9以及磷酸化β-catenin-S552的表达水平。 结果　与对照组相比，HE染色可见CTE模型组织中有较多的胶原组织沉积，免疫组化结果显示实验组标本Sox9与β-catenin表达增高，RT-qPCR表明实验组Sox9与β-catenin的mRNA水平显著增高，Western blot结果显示实验组Sox9与β-catenin的表达增高而磷酸化β-catenin-S552表达降低。 结论　CTE大鼠的足踝部组织中Sox9高表达受Wnt/β-catenin信号通路调控，该通路参与先天性马蹄内翻足畸形的形成。     

PD-L1促进大鼠断尾再植成活及可能机制

目的研究程序性死亡受体-1(PD-L1)对断尾再植成活的影响,探讨可能的机制。方法建立大鼠断尾再植模型,随机选取40只断尾再植模型成功大鼠,分为两组:PD-L1组(术后立即环手术切口浸润注射重组大鼠PD-L1蛋白生理盐水溶液)和生理盐水组(术后立即环手术切口浸润注射生理盐水0.1ml),另取10只正常大鼠作为对照。ELISA检测手术前后各个时间点的血清样本中PD-L1水平,应用重组大鼠PD-L1蛋白干预断尾再植大鼠的断尾成活,评价术后断尾发生血管危象请况,Western blot法检测断尾再植大鼠尾组织中血管内皮生长因子(VEGF)、CD34蛋白表达水平。结果术后PD-L1水平显著增高(0.05),至术后48 h时达最高值,之后开始降低,至术后7d接近术前水平。经重组大鼠PD-L1蛋白干预的大鼠断尾血液循环较好,血管危象发生几率显著低于生理盐水预处理组。与正常大鼠相比,PD-L1蛋白干预组、生理盐水干预组断尾再植鼠尾组织中VEGF、CD34蛋白表达水平均显著增高(0.05),与生理盐水干预组相比,PD-L1蛋白干预组术后48h鼠尾组织中VEGF、CD34蛋白表达均显著增高(0.05),术后12d鼠尾组织中仅见VEGF蛋白表达显著增高(0.05)。结论 PD-L1促进断尾再植成活可能与上调VEGF及CD34表达相关。     

BMP-2/bFGF双基因转染的骨髓间充质干细胞复合生物陶瓷骨促进兔桡骨缺损修复

目的探讨骨形态发生蛋白2 (BMP-2)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因转染的骨髓间充质干细胞(BMSC)复合生物陶瓷骨在兔桡骨缺损模型中的治疗作用,及其与EphB4/ephrin-B2信号通路的调控关系。方法体外分离培养兔BMSC并经流式细胞术鉴定,采用慢病毒载体将BMP-2/bFGF基因转染到兔BMSC,通过Western blotting鉴定过表达。制备BMSC复合生物陶瓷骨,植入兔挠骨缺损模型后,8周后取出缺损侧挠骨组织。HE染色观察桡骨组织形态变化;实时定量PCR检测成骨标志物Runt相关转录因子2 (Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达;采用Lane-Sandhu组织学评分分析桡骨修复情况;采用免疫荧光检测桡骨组织ColⅠ、OPN的表达;采用Western blotting检测桡骨组织中EphB4、ephrin-B2水平。结果 BMP-2/bFGF双基因转染的BMSC复合生物陶瓷骨能够改善缺损桡骨组织形态,提高桡骨组织Lane-Sandhu组织学评分,上调桡骨组织中Runx2、ALP、OPN和ColⅠ的表达,并能够上调...     

脑卒中后抑郁大鼠血清中IL-2,TNF-a改变

脑卒中后抑郁是年来新的研究方向。虽然刚刚起步,但是因其在临床上的重要作用,和对人们严重的不良影响越来越受到重视。越来越多的研究表明脑卒中发生发展不仅与人生理心理行为有关,也与免疫系统异常有关。那么卒中后抑郁是否也涉及免疫系统呢。本文研究了脑卒中后抑郁大鼠血清中IL-2,TNF-a变化。以期找到新的临床治疗靶点。1材料清洁级健康成年雄性sD大鼠（鼠龄l2～15月）,体质量（320±30）g。由中国医科大学动物中心提供并饲养,饲养期间给予大鼠标准颗粒饲料及纯净饮水。     

被动训练促进失神经肌萎缩模型大鼠骨骼肌结构和功能的恢复

文题释义：肌肉萎缩：是指横纹肌营养障碍,肌肉纤维变细甚至消失等导致的肌肉体积缩小。多由肌肉本身疾患或神经系统功能障碍所致,病因主要有：神经源性肌萎缩、肌源性肌萎缩、失用性肌萎缩和其他原因性肌萎缩。肌肉营养状况除肌肉组织本身的病理变化外,更与神经系统有密切关系。脊髓疾病常导致肌肉营养不良而发生肌肉萎缩。 肌卫星细胞：是一类存在于肌细胞基底膜与肌膜之间的成体干细胞,作为肌源性干细胞在肌肉组织损伤后,能够在激活后发挥良好的增殖、分化能力,在骨骼肌损伤的修复和再生过程中发挥重要作用。 背景：炎症细胞或炎性因子参与失神经损伤后骨骼肌肌卫星细胞的增殖和分化,在失神经骨骼肌肌组织病理过程中起着重要的作用。 目的：研究被动康复训练对失神经萎缩大鼠骨骼肌结构、功能以及肌动蛋白和炎症因子表达的影响。 方法：将30只SD大鼠平均分为假手术组、模型组和训练组,模型组及训练组大鼠暴露坐骨神经并剪断,假手术组只暴露而不剪断坐骨神经。造模后2个月始用自制滚筒对训练组大鼠进行被动康复训练2个月,用肌肉湿质量比和BBB评分评估肌肉萎缩的程度及运动功能,苏木精-伊红染色观察肌纤维微细结构及横截面积,免疫组化染色检测各组腓肠肌肌动蛋白及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及白细胞介素1β表达。实验经沈阳医学院实验动物福利伦理委员会的审批,批准文号为SYYXY2015010601。结果与结论：①训练组BBB评分高于模型组;②训练组腓肠肌湿质量高于模型组但肌纤维的横截面积却低于模型组(P < 0.001,P < 0.05),训练组腓肠肌肌动蛋白表达高于模型组(P < 0.001);③训练组炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及白细胞介素1β的表达水平低于模型组(P < 0.001或P < 0.05);④结果说明,被动训练有助于失神经萎缩肌肉结构和功能的恢复,降低炎症因子的水平防止肌肉的进一步萎缩,提高骨骼肌的肌力。 ORCID: 0000-0002-9303-8651(王世杨) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

尿液中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9检测对膀胱癌的诊断价值

目的探讨尿液中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9水平与膀胱癌发生和发展的关系及早期诊断的价值。方法测定101例膀胱癌患者,88例良性泌尿系统疾病患者及51名健康人尿液中MMP-2和MMP-9的水平。比较3组尿液中MMP-2和MMP-9水平的差异,并比较膀胱癌患者尿液MMP-2和MMP-9水平与肿瘤病理分级的关系。应用受试者工作特征曲线(ROC)进行评价,判断两者的最优截断点并计算其准确度、阳性预测值和阴性预测值。结果膀胱癌患者组尿液中MMP-2和MMP-9水平显著高于良性泌尿系统疾病患者组和健康对照组(P<0.01),Ⅱ级和Ⅲ级膀胱癌患者尿液中MMP-2和MMP-9水平明显高于Ⅰ级(P<0.01)。尿液MMP-2的ROC曲线下面积为0.854,最优截断点为2.4ng/mg蛋白时,准确度为80.8%,灵敏度为81.2%,特异度81.3%;MMP-9的ROC曲线下面积为0.906,最优截断点为6.2ng/mg蛋白时,准确度为87.5%,灵敏度为85.1%,特异度为89.2%;MMP-2和MMP-9联合诊断的灵敏度达到98.0%,特异度为96.4%,准确度为90.0%。结论尿液MMP-2和MMP-9的检测可以用于对膀胱癌的初步诊断,可将其作为膀胱癌的筛选检查项目。     

全氟辛烷磺酸盐对小胶质细胞活化及放射损伤后海马记忆功能影响

目的探讨全氟辛烷磺酸盐(PFOS)对小胶质细胞活化及放射损伤后海马记忆功能的影响。方法选取40只昆明(KM)小鼠随机分入对照组、放射组、PFOS组和放射+PFOS组,每组各10只。放射组和放射+PFOS组小鼠通过放射源钴(⁶⁰Co)照射,累积30 Gy。PFOS组和放射+PFOS组腹腔注射10 mg/kg PFOS,其他各组小鼠注射等量生理盐水。通过水迷宫检测各组小鼠记忆功能,通过TUNEL染色检测小鼠海马神经元凋亡情况,酶联免疫吸附法和双标免疫荧光染色检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶受体(TkrB)水平。结果与对照组比较,放射组、PFOS组、放射+PFOS组逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与放射+PFOS组比较,放射组、PFOS组逃避潜伏期显著缩短,穿越平台次数显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组海马神经元凋亡率显著低于放射组、PFOS组、放射+PFOS组,差异有统计学意义(P<0.05)。放射+PFOS组海马神经元凋亡率显著高于放射组和PFOS组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,放射组、PFOS组、放射+PFOS组的TNF-α、IL-1β、BDNF、TrkB水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。放射+PFOS组TNF-α、IL-1β、BDNF、TrkB水平显著高于放射组和PFOS组,(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PFOS通过BDNF/TrkB通路激活小胶质细胞分泌炎性因子,从而加剧放射线引起的小鼠海马体神经元凋亡和记忆功能损伤。     

医学生主观幸福感相关研究

目的：了解医学生主观幸福感现状并提出合理化改善建议。方法：采用人脸量表、情感量表和生活满意度量B表对沈阳医学院在校大学生进行问卷调查。结果：医学生主观幸福感较高,具有中等水平的积极情感、较低水平的消极情感和较高水平的生活满意度。不同家庭所在地、不同家庭经济状况的学生在主观幸福感上存在显著差异。不同学制的学生在主观幸福感体验上差异无显著性。结论：医学生主观幸福感较高。生活满意度对主观幸福感的影响最大。     

骨髓间充质干细胞调节大鼠视神经损伤后小胶质细胞的活化

背景:外伤性视神经损伤是引起视力丧失的重要原因,治疗方法也比较局限,为探求更好的治疗方法,该实验从小胶质细胞方向入手进行探究。在神经病理条件下,激活小胶质细胞能够维持中枢神经系统的稳定,但小胶质细胞过度活化会产生大量的炎症因子,使损伤进行性加重。目的:探讨视神经损伤后小胶质细胞活化情况以及骨髓间充质干细胞对其过度表达的调节作用。方法:选取8周龄SD大鼠18只,将其随机分为移植组、模型组和假手术组,每组6只,其中模型组、移植组选取左眼进行视神经钳夹造模后分离视网膜和视神经,假手术组只分离视网膜和视神经,不进行钳夹,移植组在损伤后立即向左眼玻璃体内注入第3代骨髓间充质干细胞(注入细胞1×108,细胞量为2μL),模型组、假手术组玻璃体内注入等量的PBS,术后15 d全部处死,在灌流固定后取视网膜连带视神经用于苏木精-伊红染色和免疫组织化学检测。结果与结论:模型组视神经及视网膜小胶质细胞活化标记物Ox-42以及炎症因子TNF-α的表达量均高于假手术组(P<0.05),移植组视神经及视网膜中Ox-42和TNF-α表达量降低(P<0.05)并且接近假手术组水平。结果表明,小胶质细胞的过度活化与视神经损伤相关,骨髓间充质干细胞可以抑制小胶质细胞过度活化及炎症因子的释放,从而在一定程度上保护视网膜和视神经免受损伤。     

不同体积分数血清对培养原代破骨细胞噬骨能力的影响

目的:改变培养液中血清的浓度,观察破骨细胞形态结构,并比较不同体积分数血清对培养的原代破骨细胞噬骨能力的影响。方法:实验于2007-03/06在沈阳医学院中心实验室完成。①实验材料:选取清洁级新生24hWistar大鼠6只;胎牛血清(天津灏洋);新鲜成年牛股骨皮质(市售)。②实验过程:取新鲜成年牛股骨皮质,用磨片机磨成厚50μm的1cm×1cm骨片;取新生大鼠四肢长骨,分离破骨细胞,并用不同体积分数血清(分别为0,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25)培养原代破骨细胞。③实验评估:第1,6天倒置显微镜下计数,第3天取细胞玻片观察细胞形态结构;扫描电镜观察不同体积分数血清培养的破骨细胞在牛骨皮质上产生骨陷凹面积的差异。结果:①破骨细胞的分离培养结果:分离培养的破骨细胞数量较少,体积大,胞浆丰满,细胞突起延展,细胞核呈圆形或椭圆形,积聚在细胞中央或排列在细胞周边。②不同体积分数血清培养液中骨片上吸收陷窝深度比较:随着培养液中血清体积分数的增加,骨片上陷窝深度逐渐增加,在培养液中血清体积分数为0.15时,骨片上陷窝最深,此后随着培养基血清体积分数的增加,形成骨陷凹的深度无明显增加。结论:血清体积分数为0.15培养基培养的破骨细胞在牛皮质骨片上产生骨陷凹最深,噬骨能力最强。