上海市防控2019冠状病毒病(COVID-19)儿科质控工作的指导性意见(第一版)

2019冠状病毒病（COVID-19）疫情防控形势日趋严峻,儿童感染报告病例日益增多。为进一步做好COVID-19的预防与控制工作,根据国家卫生健康委员会及世界卫生组织相关文件,结合上海市实际情况,上海市儿科临床质量控制中心特制定防控工作指导性意见,主要包括：工作人员的管理,预检分诊管理,发热门诊、疑似或确诊病例隔离观察区管理,普通儿内科病房管理,特殊操作及辅助检查流程等方面的细则,以期有效降低儿科诊疗工作中的感染和传播风险。     

SF-1和DAX-1在发育内分泌学的研究进展

核受体的作用极其广泛 ,类固醇生成因子 1(SF 1)和剂量敏感的性别转换综合征和先天性肾上腺发育不良症的关键基因 1(DAX 1)两种核受体家族是近年来发育内分泌学研究的热点之一 ,通过SF 1和DAX 1的动物模型及人类基因突变表现型阐述了在胚胎早期性发育和性分化中SF 1和DAX 1的作用可能通过相同途径相互拮抗 ,在垂体促性腺细胞和肾上腺能细胞中 ,两者在细胞及组织中的分布一致 ,通过下丘脑对垂体 性腺轴及垂体 肾上腺轴发育过程中不同时期的各个环节进行调控 ,本文对SF 1和DAX 1在内分泌器官发育过程中的分布、结构及其作用进行综述。     

1例糖原累积病患儿酸性-α-葡萄糖苷酶基因的新无义突变p.W738X

目的 探讨1例临床疑似糖原累积病Ⅱ型患儿的临床特点和酸性-α-葡萄糖苷酶(GAA)基因突变情况.方法 分析患儿病史,并检测患儿及其父母外周血白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增GAA编码区,直接测序分析GAA基因突变情况.结果 该患儿生后2个月即出现喂养困难和全身肌无力,4个月发现心脏增大,6个月时死于心肺功能衰竭.患儿白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性明显降低,仅为正常对照中位数的17.3%.DNA测序分析显示患儿携带一个新无义突变p.W738X和一个已报道的p.E888X突变.患儿及其母亲均携带假性缺陷等位基因c.1726G ＞ A;2065G ＞ A.结论 GAA酶活性测定结合基因诊断明确诊断1例临床疑似糖原累积病(GSD)Ⅱ型,发现1个GAA基因新无义突变p.W738X.根据患儿临床表现可诊断为婴儿型GSD Ⅱ,推测p.W738X突变对GAA酶活性影响严重.由于假性缺陷等位基因c.1726G ＞ A;2065G ＞ A可引起正常人GAA酶活性降低,故GAA基因突变分析对明确GSDⅡ型患者的诊断及其家系的产前诊断有重要意义.     

12例多种羧化酶缺乏症的基因突变分析

目的 旨在从基因水平证实多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency,MCD)的诊断,探讨我国MCD患儿的基因突变情况.方法 12例MCD患儿接受基因诊断.采用PCR及直接测序法分别对4例生物素酶(biotinidase,BT)缺乏症和8例全羧化酶合成酶(holocarboxylase synthetas,HLCS)缺乏症进行BT基因和HLCS基因突变分析,对基因新突变通过限制性片段长度多态性分析及患儿父母和50名正常对照者基因检测以证实.结果 12例患儿基因突变检出率100%.4例BT缺乏症中发现BT基因突变6种:c.98-104del7ins3,c.1369G>A(V457M),c.1157G>A(W386X),c.1284C>A(Y428X),c.1384delA,c.1493_1494insT,后4种为新突变.8例HLCS缺乏症中发现HLCS基因突变4种:c.126G>T(E42D),c.1994G>C(R665P),c.1088T>A(V363D),c.1522C>T(R508W),后两种为热点突变[75%(12/16)],c.1994G>C为新突变.结论 本研究从基因水平上证实了12例MCD的诊断.共发现了6种BT基因突变,4种HLCS基因突变,其中5种为新突变;得出2种HLCS基因的热点突变.     

先天性甲状腺功能减退症患儿甲状腺形态学改变和治疗时机对智力发育的影响

目的 探讨先天性甲状腺功能减退症(CH)患儿甲状腺形态学改变、开始治疗时间及治疗前甲状腺功能(血FT4、TSH浓度)对患儿智力发育的影响.方法 对52例CH患儿确诊后即给予左旋甲状腺素口服,监测其智力、体格发育,并进行甲状腺核素扫描(99mTcO4)或(和)超声检查了解甲状腺形态学改变,10～30个月行Bayley婴儿发育测量法测试,得到智力发育指数(MDI)及运动发育指数(PDI)测试结果,根据治疗开始时间及形态学改变进行分组分析.结果 甲状腺形态学异常组MDI明显低于甲状腺形态正常组(91±20 vs 102±15,P＜0.05),患者越晚开始治疗对MDI影响越大,以61～90 d治疗者MDI(73±24)影响最为显著.结论 CH患儿智力发育与甲状腺形态学改变及开始治疗时间有关,提示对筛查检出的新生儿甲减早期诊断和治疗的重要性.     

分子生物学与儿科医学发展

目前,分子生物学技术已从基础研究发展到临床应用,使人们对许多疾病的认识由细胞水平进入了分子水平,为疾病的诊治和预防开辟了新的道路。本文就分子生物学常用技术及对儿科医学的影响作一简要概述。     

促甲状腺激素受体基因缺陷与甲状腺疾病的研究进展

促甲状腺激素受体属于鸟苷酸调节偶联蛋白受体，在生理情况下，ＴＳＨＲ基因表达主要受促甲状腺激素调控。近年来ＴＳＨＲ基因缺所致的甲状腺功能异常已被逐认识。ＴＳＨＲ基因缺陷以突变为主，引起先天性甲状腺功能亢进或毒性结节性甲状腺肿。     

红细胞二氢蝶啶还原酶活性测定方法的建立和应用

目的建立红细胞二氢蝶啶还原酶(DHPR)活性测定方法,对高苯丙氨酸血症(HPA)者进行DHPR缺乏型四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症筛查。方法采用UV-2450型双光束分光光度仪、1 mmol/L细胞色素C及20 mmol/L 6-甲基四氢蝶呤等试剂测定外周干滤纸血片中DHPR活性。结果DHPR活性与年龄无关,该实验室儿童DHPR活性参考值为(2.2±0.7)nmol/(m in.5 mmd isc)[(1.02~3.35)nmol/(m in.5 mmd isc)];实验批内变异系数(CV)为9.1%,批间CV为11.5%,实验最好在37℃恒温下进行;30例HPA患儿DHPR活性测定结果为(2.4±0.8)nmol/(m in.5 mmd isc),未发现DHPR缺乏者。结论干滤纸血片中红细胞DHPR活性测定是DHPR缺乏症有效、可靠且易行的诊断方法。     

串联质谱检测干血滤纸片氨基酸方法的建立

目的　建立可靠的串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸方法,以便用于氨基酸代谢紊乱疾病的筛查和诊断。方法　取含不同浓度氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、瓜氨酸和缬氨酸)的血滤纸片,用含已知量相应氨基酸内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,用串联质谱仪检测血片中氨基酸谱及其浓度。分析该方法的精确性、样品回收率及浓度相关性。结果　氨基酸批内和批间变异系数分别为6. 3% ~9. 7%、9. 9% ~14. 3%。低浓度回收率为92% ~100%,中等浓度回收率为94% ~104%,高浓度回收率为98% ~107%。不同浓度的氨基酸实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0. 999 0~0. 999 9。结论　串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸能够达到较高的精确性、准确性和回收率,为临床进行氨基酸分析提供了一项新技术,可用于新生儿遗传代谢病筛查、高危儿童遗传代谢病的诊断及其他与氨基酸代谢有关的疾病诊治。     

串联质谱分析干血滤纸片中酰基肉碱质控

目的：串联质谱技术是近几年应用于临床检验的新技术，具有特异性强、灵敏度高，一次试验可检测数十种物质的优点。本文通过对近4年的质控结果进行分析，探讨影响检测结果的因素及应对措施。方法：美国CDC每年提供4批酰基肉碱质控干血滤纸片，酰基肉碱检测方法为取直径为3mm的质控干血滤纸片放入96孔聚丙烯板，经含酰基肉碱内标的甲醇萃取，盐酸正丁醇衍生后，进行串联质谱检测。分析本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差及其他实验室质控结果（169个实验室的均值）与美国CDC检测结果的偏差之间的差异。结果：本实验室每次质控结果所有酰基肉碱均在美国CDC检测结果95％可信区间内，且每一批结果的临床评价与美国CDC质控临床评价完全一致。本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差与其他实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差比较，无显著差异，丙酰基肉碱差异显著（Z=-2．638，P〈0．005），戊二酰基肉碱差异亦显著（Z=-2．482，P〈0．005）。结论：本实验室酰基肉碱质控结果，达到美国CDC的质控要求，丙酰基肉碱检测值偏高，其阳性判断切割值设定也相应增高，而戊二酰基肉碱检测值偏低，其阳性判断切割值设定也相应降低。