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艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的一类疾病,该病已成为危害人类最严重的疾病之一,研制AIDS疫苗已成为当务之急。外膜蛋白gp12 0是由HIV 1囊膜蛋白gp16 0经蛋白酶裂解而成[1] 。它不仅与病毒进入细胞有关,同时它含有大量刺激机体产生体液免疫和细胞免疫的抗原决定簇[2 4] 。因此,它成为人们研制艾滋病疫苗的重要靶蛋白。以病毒为载体构建基因工程活载体疫苗是当前研制疫苗的一个重要途径,它不仅可以诱导体液免疫的产生,同时可引起特异性CTL ,尤其对于病毒病的预防更为有效。本研究利用鸡痘病毒中国疫苗株为载体,构建了HIV… 相似文献
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实验以pBluescriptllks质粒为载体,构建了人白细胞介素6次级克隆pBIL-6。用限制性内切BamHI和EcoRV消化pBIL-6,分离并回收了IL-6cDNA片段,并在其平未端加入了BamHI接头。实验将带有BamHI粘性末端的IL-6全基因片段插入到了逆转录病毒载体pZLPNeoSV(X)1的BamHI位点上,构建了重组质粒pZLPIL-6。经对重组予DNA的琼脂糖凝胶电泳、限制住内切酶分析和核酸杂交鉴定,筛选出了含有IL-6cDNA片段及插入方向正确的pZLPIL-6。 相似文献
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SARS冠状病毒灭活疫苗研究初报 总被引:5,自引:0,他引:5
陆家海 余新丙 徐劲 陈守义 凌文华 王一飞 熊盛 张美英 向军俭 李久香 刘新建 万卓越 鄢心革 郑唤英 顾为望 屈莉芝 王红伟 吴清洪 韩文瑜 夏成柱 《广东医学》2003,24(Z1):129-130
目的研制出安全、有效、质量可控的SARS冠状病毒灭活疫苗;同时,制备能用于SARS被动免疫和治疗用的异源高效价特异性抗体,用于SARS的免疫防治.方法采用细胞培养法,从非典型肺炎患者标本中分离获得病毒株,通过电镜、血清学以及RT-PCR技术进行病毒鉴定.运用细胞规模化培养技术大量制备SARS冠状病毒.用温度灭活法和甲醛灭活法对SARS冠状病毒进行灭活处理,筛选灭活条件.将不同类型和不同剂量的佐剂与灭活病毒加以配伍,优化SARS灭活疫苗;同时,以小鼠、兔、猴等为实验对象,进行灭活疫苗的免疫原性评价.用灭活疫苗免疫马,获取异源(马)高免血清,并进行应用效果评价.结果从分离得到的SARS冠状病毒中,优选出适合疫苗制作的SARS病毒株2株-F69和Y3,初步建立了大规模培养SARS病毒的技术体系,病毒TCID50达到106以上.确定了SARS病毒的灭活方法,优选出灭活疫苗的佐剂,并已生产出一定量的SARS灭活疫苗.将灭活疫苗初步用于小鼠、兔等的免疫接种,对其体液免疫和细胞免疫效果进行了初步检测.结论试验研制的SARS灭活疫苗具有较强的免疫原性,设计的灭活疫苗生产技术路线是可行的,进一步的研究工作结束后,可望进行规模化开发生产. 相似文献
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应用B-淋巴细胞杂交瘤技术,建立了5株稳定分泌抗空肠弯曲菌共同抗原(CA)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。其中4株的McAb针对CA中的耐热抗原成分,1株的McAb针对CA中的不耐热抗原成分。应用32种其它细菌对这些McAb的特异性检查表明,除与幽门弯曲菌发生交叉反应外,与其它细菌均为阴性反应。应用不同地区、不同来源的516株空弯菌对这些Mc-Ab与空弯菌的反应性进行了检查,结果均为阳性反应。应用BA-ELISA对人(140)、 相似文献
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Ⅰ型人免疫缺陷病毒gag-gp120嵌合基因核酸疫苗的构建与鉴定 总被引:4,自引:1,他引:4
目的:构建含Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)gag—gp120嵌合基因核酸疫苗的表达质粒。方法:将gag和gp120连接后的嵌合基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建真核表达质粒pVAXGE。用脂质体法将构建的重组质粒转染Hela细胞72h后,取转染的Hela细胞进行RT—PCR检测和和Dot—ELISA分析。结果:重组质粒转染细胞的总RNA中,可扩增出目的基因的转录产物。Dot-ELISA的结果显示,目的基因在Hela细胞内得到表达。结论:成功地构建了表达gag—gp120嵌合基因的核酸疫苗质粒,为HIV—1核酸疫苗的制备奠定基础。 相似文献
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长春地区猪链球菌对大环内酯和林克酰胺类耐药的分子机制研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 分析长春地区猪链球菌耐大环内酯类和林克酰胺类的分子机制。方法 采用微量稀释法和双纸片扩散法分别测定相关抗生素的耐药谱和红霉素耐药型 ,并以猪链球菌的染色体DNA为模板 ,PCR扩增ermB基因和mefA/E基因 ,然后将其克隆到pMD18-T载体中 ,用双脱氧链末端终止法测定DNA序列后进行序列分析。结果 2 2株猪链球菌的临床分离菌株均扩增出ermB基因 ,而未扩增出mefA/E基因 ;对四环素、环丙沙星和大环内酯和克林霉素有高的耐药率和耐药水平 ;红霉素的耐药型以CR型为主。同源性分析显示 ,ermB基因的差异为 36 %~ 10 0 % ,与GenBank中的肺炎链球菌、粪肠球菌等的erm基因有 98%~ 10 0 %的同源性。结论 长春地区猪链球菌对MLSB 的耐药是红霉素甲基化转移酶所介导的 ,以CR型为主的耐药 ,编码该类耐药的是ermB基因 ,并与人源及动物源性的耐药基因可能存在着广泛的交换。 相似文献