重组MUC1-MBP融合蛋白联合R848对小鼠T细胞免疫活性的诱导作用

目的：研究MUC1-MBP联合TLR7/8激动剂R848对小鼠T细胞免疫活性的诱导作用,为寻找重组MUC1-MBP融合蛋白的合适佐剂提供实验依据。方法：21只C57BL/6小鼠随机分为对照组（注射生理盐水）、MUC1-MBP+ R848组（注射MUC1-MBP+ R848）和MUC1-MBP+卡介苗（BCG）组（注射MUC1-MBP+ BCG）,每组7只。第2次免疫后第4~7天无菌取脾脏组织,测定脾指数;淋巴细胞增殖反应测定各组小鼠的刺激指数（SI）;ELISA法测定小鼠脾细胞培养上清中肿瘤坏死因子γ（TNF-γ）和 白细胞介素4（IL-4）水平;流式细胞术检测小鼠脾细胞中T淋巴细胞亚群比例。结果：与对照组比较,MUC1-MBP+R848组和MUC1-MBP+BCG组小鼠脾指数均升高（P<0.01）,SI升高（P<0.05）,TNF-γ水平升高（P<0.05或P<0.01）;且MUC1-MBP+R848组小鼠上述指标高于MUC1-MBP+BCG组（P<0.05或P<0.01）;IL-4水平略微升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,MUC1-MBP+ R848组和MUC1-MBP+ BCG小鼠脾细胞中CD3⁺细胞、CD4⁺细胞和CD8⁺细胞比例明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：MUC1-MBP 融合蛋白联合R848或BCG均能诱导小鼠倾向于Th1的细胞免疫应答反应,R848是良好的MUC1-MBP候选佐剂分子。     

胸腺肽α1诱导MUC1特异性Th2型免疫应答

目的：采用黏蛋白与麦芽糖结合蛋白融合蛋白（MUC1-MBP）作为特异性抗原,研究胸腺肽α1（Tα1）加强诱导MUC1特异性免疫应答的类型,探讨其作为佐剂应用的可行性。方法：将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组（注射生理盐水）、MUC1-MBP+BCG组（注射MUC1-MBP＋BCG）和MUC1-MBP和Tα1组（注射MUC1-MBP＋Tα1）,分别进行T细胞免疫活性、MUC1特异性抗体效价及亚类、Tα1联合MUC1-MBP抗肿瘤作用检测。第3次免疫后4~7 d无菌取脾脏组织,测定脾指数;淋巴细胞增殖反应测定各组小鼠的刺激指数（SI）;ELISA法测定小鼠脾细胞培养上清中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素10（IL-10）的水平及小鼠血清中MUC1特异性抗体水平;第3次免疫后7 d,注射黑色素瘤细胞B16-MUC1,观察各组小鼠生存期。结果：与生理盐水组比较,MUC1-MBP+BCG组和MUC1-MBP+Tα1组小鼠脾指数与SI均升高（P<0.05或P<0.01）,MUC1特异性SI明显升高（P<0.05）。与生理盐水组比较,MUC1-MBP+BCG组小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-2水平均明显升高（P<0.05）;IL-4和IL-10水平均略微升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。与生理盐水组比较,MUC1-MBP+Tα1组小鼠脾细胞培养上清中IL-4水平明显升高（P<0.01）;IFN-γ、IL-2和IL-10水平均略微升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。MUC1-MBP+Tα1免疫小鼠能够产生抗MUC1特异性抗体且效价随浓度升高而升高。抗体亚型检测,与生理盐水组比较,MUC1-MBP+Tα1组IgG1水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,IgG2a水平无明显变化。肿瘤预防实验,与生理盐水组比较,MUC1-MBP＋BCG组和MUC1-MBP+Tα1组小鼠生存期未见明显差异。结论：MUC1-MBP联合Tα1更倾向于Th2型免疫应答,Tα1可以作为预防性疫苗佐剂使用,不适合治疗性疫苗使用。