海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因的分型研究及序列分析

目的对恶性疟原虫海南株的MSP2基因进行分型和多态性分析. 方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因的中间可变区(第3区),对41株恶性疟原虫分离株进行基因分型,并对部分目的基因片段进行直接测序. 结果 41份血样中有39份共扩增得到55个目的基因片段,以3D7型为主(28份血样,36个基因片段),两种等位基因家族混合感染的情况极少见.序列分析结果表明,海南省恶性疟原虫虫株的MSP2中间重复序列区变异程度大. 结论海南省恶性疟原虫的MSP2以3D7等位基因家族为主,且存在显著的多态性.     

青蒿素、哌喹、磷酸哌喹抗性系杀虫速度实验研究

目的：探讨青蒿素、哌喹、磷酸哌喹抗性系与其敏感株在杀虫速度方面是否存在差异。方法：采用WHO 48h杀虫速度实验方法对已培育出的抗性虫系与敏感株进行杀虫速度实验,观察是否存在差异。结果：具有轻度抗性的青蒿素抗性系与其敏感株在杀虫速度方面无显著差异;具有中度抗性的哌喹、重度抗性的磷酸哌喹与其敏感株在杀虫速度方面则存在显著差异。结论：抗性系与敏感株在杀虫速度方面存在一定的差异。     

海南省恶性疟原虫氯喹抗性相关基因pfcrt多态性分析

目的了解海南省恶性疟原虫产生氯喹抗性是否与pfcrt基因中的关键性点突变有关。方法对45份采自海南省恶性疟患者血样，采用套式PCR法分别扩增pfcrt基因中含有第76位和220位氨基酸的多态性片段，并对扩增产物进行限制性内切酶酶切分析，观察是否存在突变位点。结果45个样本中，pfcrt基因发生K76T点突变的样本有28个，其中20个是抗性株，8个是敏感株；全部样本的pfcrt基因第220位氨基酸均发生A220S点突变。结论我国海南株恶性疟原虫产生氯喹抗性与发生在pfcrt基因中的K76T点突变有一定的关联。     

海南省恶性疟原虫MSP1和MSP2等位基因分型研究

目的 对海南省恶性疟原虫分离株的裂殖子表面蛋白质1(MSPl)和裂殖子表面蛋白质2(NSP2)基因进行分型研究。方法 从海南省恶性疟流行区采集的恶性疟患者血样，用套式PCR方法分别扩增PfMSP1和PfMSP2基因中具有型特异性的片段，进行等位基因分型。结果(1)MSPl基因分型：94份恶性疟患者血样中有82份扩增出MAD20型基因片段(占87．2％)，27份扩增出K1型基因片段(占28.7％)，15份同时扩增出MAD20型和K1型基因片段(占16．0％)，未扩增出RO33型基因片段。(2)NSP2基因分型：94份血样中有75份扩增得到3D7型基因片段(79．8％)，28份扩增得到FC27型基因片段(29．8％)，10份同时扩增得到3D7型和FC27型基因片段(占10．6％)。结论 海南省恶性疟原虫的MSPl等位基因和MSP2等位基因分别以MAD20型和3D7型为优势基因型；不同等位基因型的混合感染率很低。     

青蒿素对恶性疟配子体感染性的影响

将２７例携带恶性疟配子体的患者，分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组，Ａ组日服青蒿素１２００ｍｇ共５天，Ｂ组顿服甲氟喹７５０ｍｇ，Ｃ组顿服甲氟喹７５０ｍｇ＋伯氨喹４５ｍｇ。服药后按计划逐日取血观察配子体密度变化，同时观察配子体对大劣按蚊的感染情况。结果显示：Ａ组服药后４、７、１４和２ｌ天配子体密度和按蚊感染率下降非常显著，７天以后配子体感染性明显下降；Ｂ组７、１４和２１天配子体密度显著减少，１４天和２ｌ天配子体感染性和按蚊感染率下降非常明显；Ｃ组９例４天时有５例配子体消失，全部不能感染蚊媒。说明青蒿素对恶性疟配子体感染性有抑制作用，在阻断恶性疟传播途径方面的作用明显优于甲氟喹。     

抗疟新药--双氢青蒿素复方

双氢青蒿素复方的三代产品(CV8(R),Artecom(R),Artekin(R))是李国桥教授率领的热带医学研究所持续11年不断改进研制的拥有自主知识产权的新型抗疟药,其技术优势和综合优势处于全球领先水平.三代复方均选择以中药青蒿素为原料,半合成工艺最简单的短半衰期药双氢青蒿素,与长半衰期的磷酸哌喹配伍,发现其最佳剂量配比增效不增毒,具有速效、高治愈率、低毒、短疗程、服用方便等优点,同时减少了双氢青蒿素用量,节约资源,降低成本.三个复方已先后成为越南、柬埔寨等国的疟疾一线用药,现已有超过190万人接受该复方药治疗,创外汇收入342万美元.Artekin作为目前综合优势最强的抗疟新药,得到WHO的持续关注,并期望它能进入公立医疗机构代替氯喹.Artekin的制造成本仅及青蒿素类单药的70%,其功效性能又优于Coartem.李国桥教授联合英国牛津大学著名热带病专家N.White教授和WHO/TDR,向MMV(疟疾风险基金)申请并获取350万美元资助,以推动该药按国际标准研究使之日后进入世界卫生组织基本药物目录.     

海南省东方市恶性疟原虫对双氢青蒿素复方组分敏感性的体外检测

【目的】检测海南省东方市恶性疟原虫对双氢青蒿素复方组分双氢青蒿素（DHA）和磷酸哌喹（PQ）的敏感性。【方法】采用世界卫生组织（WHO）标准的体外微量法。【结果】2001年和2004年分别对61例和28例患者检测DHA敏感性，均敏感，IC50分别为6．84nmol／L和5．67nmol／L，完全抑制裂殖体形成的平均药物浓度分别为35nmol／L和39nmol／L；分别对75例和29例患者检测PQ敏感性，抗性率分别为22．67％和17．24％，I‰分别为274mmol/L和317nmol／L，完全抑制裂殖体形成的平均药物浓度分别为l220nmoL／L和1269nmol／L。【结论】当地恶性疟原虫对Ⅸ王A是敏感的，对PQ的敏感性有所恢复。     

海南省恶性疟原虫cg2基因ω重复区多态性与氯喹抗性关系分析

目的 了解海南省恶性疟原虫cg2基因ω重复区多态性与氯喹抗性的关系。方法 采用套式PCR技术特异扩增恶性疟原虫海南分离株cg2基因ω重复区,并对部分目的基因片段进行直接测序和序列分析。结果 氯喹抗性株和敏感株均可扩增得到cg2基因ω重复区,大小约在180bp至550bp之间。结论 海南省恶性疟原虫cg2基因ω重复区多态性与氯喹抗性没有明显关系。     

恶性疟原虫海南分离株pfcrt基因同氯喹抗性的相关性分析

目的探讨恶性疟原虫海南株pfcrt基因多态性同氯喹抗性的关系。方法采集确诊恶性疟患者血样42份，应用套式PCR方法体外扩增pfcrt基因含有编码第76和356位氨基酸的基因片段，并对扩增产物进行限制性酶切分析。结果1）76位点：22个氯喹抗性虫株中有18个发生K76T突变型（81．82％），20个氯喹敏感虫株中野生型和突变型各占50％；2）356位点：所有42个样本的356位点均为野生型。结论我国海南省恶性疟原虫pfort基因的K76T突变与氯喹抗性存在一定关联，而356位点可能与氯喹抗性无关。     

青蒿琥酯对恶性疟原虫配子体感染性影响的观察

越南南方疟区15例携带恶性疟原虫配子体和无性体的患者分为A、B、C 3组,A组口服青蒿琥酯片5天总量600mg,B组口服青蒿琥酯片2天总量200mg,C组静脉注射青蒿琥酯5天总量360mg。给药前、后定时血检计算配子体密度,并取血离体感染大劣按蚊。配子体转阴时间,A组为15.4±5.0天,B组为20.6±4.8天,C组为20.3±4.0天。配子体失去感染性,A组D_7(给药后7天)2/5例、D_(14)5/5例;B组D_70/5例、D_(14)1/5例、D_(21)5/5例;C组D_70/5例、D_(14)2/4例、D_(21)3/3例。研究结果表明口服青蒿琥酯5天总量600mg对清除恶性疟原虫配子体血症及抑制配子体的感染性有明显影响。