激光辅助孵化技术在透明带异常患者新鲜移植周期中的应用及安全性分析

目的探讨透明带异常患者新鲜移植周期中应用激光辅助孵化(AH)技术的临床结局及其安全性。方法回顾性分析2013年1月至2016年12月在本中心进行IVF-ET的透明带异常患者的临床资料,总例数为154例。按照纳入标准对第3天移植的115例透明带异常患者进行筛选,符合纳入标准的48例患者均行激光AH,设为AH组;随机筛选透明带正常未行激光AH的患者290例设为对照组;比较两组患者的一般资料及临床妊娠结局。结果 AH组和对照组两组患者的一般资料,如年龄、体重指数(BMI)、激素水平及内膜厚度比较差异均无统计学意义(P0.05)。AH组患者48例,临床妊娠34例,临床妊娠率70.83%;对照组患者290例,临床妊娠219例,临床妊娠率75.52%,两组临床妊娠率比较无统计学差异(P0.05)。两组的多胎率、活产率、早产率、流产率及异位妊娠率比较差异亦无统计学意(P0.05)。结论对于透明带异常但具有优质胚胎的患者,行激光AH可以改善患者的妊娠结局,且并未增加流产率、畸形率、多胎率等不良结局风险。     

HOXA10与连续TTAT基序结合抑制p／CAF表达

目的:转录因子HOXA10在胚胎着床和子宫内膜蜕膜化过程中发挥重要作用.p/CAF是HOXA10新的靶基因,文章旨在筛选并鉴定p/CAF启动子区与HOXA10功能性结合的序列. 方法:制备重组腺病毒HOXA10(ad-HOXA10),用于感染人子宫内膜间质细胞(hESC);构建p/CAF启动子区多种突变报告基因质粒;采用萤光素酶报告基因实验检测结合腺病毒介导的HOXA10基因过表达,分析hESC中HOXA10对p/CAF启动子转录活性的调控. 结果:获得滴度为2.4×1011ifu/mL的重组ad-HOXA10,对hESC的感染率达到80%以上.HOXA10通过结合连续的3个TTAT(-710～ -674nt)基序抑制p/CAF启动子活性,连续的3个TTAT基序的一级结构影响HOXA10的功能性结合. 结论:p/CAF启动子区连续的3个TTAT基序是HOXA10功能性结合所必须的,HOXA10可能通过调控p/CAF的表达来控制hESC的增殖与分化.     

剩余冷冻复苏胚胎行囊胚培养后再次冷冻并复苏移植后获双胎妊娠1例报告

在体外受精一胚胎移植(IVF-ET)周期中,冷冻复苏胚胎移植后,剩余复苏胚胎往往丢弃.本中心自2009年起对这些剩余复苏胚胎行囊胚培养及囊胚冷冻,于2010年解冻并移植前次保存的囊胚成功获得临床双胎妊娠1例,报告如下.     

体外受精-胚胎移植周期透明带透亮致密患者的受精与临床结局

目的：探讨卵子透明带透亮致密患者行常规体外受精（IVF）或卵胞质内单精子显微注射（ICSI）后受精、胚胎发育情况及临床结局。方法：回顾性分析体外受精过程中卵子出现透明带透亮致密的43个周期,其中IvF周期27例,ICSI周期16例,比较受精率与正常受精比例、胚胎质量、临床妊娠结局。结果：27例IVF周期均未受精,行早期补救ICSI,其中23例完全不受精。补救后IVF总体受精率达64．83％,正常受精率59.32％;16例ICSI周期均受精,受精率和正常受精率分别为85．11％和79．01％,均显著高于IVF组（P〈0．05）。IVF组和ICSI组卵裂率分别为97．96％、95．65％,优质胚胎率分别为52．67％、43．75％,组间差异无统计学意义（P〉0．05）。IVF组妊娠率为37．04％,种植率为33．33％;ICSI组妊娠率为31．25％,种植率为25．00％,组间临床结局相近,无统计学差异（P〉0．05）。结论：透明带透亮致密患者的自然受精能力下降,需要采用ICSI方式授精。常规IVF受精失败后采用早期补救ICSI或直接行ICSI能明显改善透明带透亮致密患者的受精结局,但不能改善妊娠结局。     

常规产前超声与系统产前超声在先天性心脏病中期筛查中的运用对比

目的对比常规产前超声与系统产前超声在先天性心脏病中期筛查中的运用。方法采用回顾性方法分析,选取我院自2013年2月-2018年2月的2737例待产孕妇的临床资料,共检测出119例胎儿先天性心脏病,所有患者均给予常规产前超声检查(2737例,对照组)与系统产前超声检查(2737例,观察组),比较两种超声检查结果。结果观察组检出率4.10%(112/2737)明显高于对照组检出率2.71%(74/2737),其差异有统计学意义(χ2=22.456,P=0.0020.05)。常规产前超声检查后漏诊和误诊情况:45例中,肺动脉瓣病变16例、法洛四联症12例、大动脉转位6例、室间隔缺损5例、主动脉病变2例、房间隔缺损2例、二尖瓣病变2例。系统产前超声检查误诊及漏诊情况:7例中肺动脉瓣病变3例、法洛四联症2例、大动脉转位1例、室间隔缺损1例。观察组的敏感性(95.18%)、准确度(99.92%)、特异度(99.76%)均高于对照组(61.45%、99.59%、98.35%、),其差异具有统计学意义(P0.05)。结论系统产前超声检查中期胎儿先天性心脏病具有较高敏感性、检出率,值得临床推广应用。     

父方年龄及精子来源对ICSI周期临床结局的影响

目的分析ICSI周期中父方年龄及精子来源与临床结局的关系。方法回顾性分析2012年1月至2015年12月在本中心进行ICSI且女方年龄在30~34岁的患者,总例数为489例。将患者按是否临床妊娠分组,分析父方年龄(30岁、30~40岁、40岁)和精子来源(精液精子、附睾精子、睾丸精子)对于临床妊娠结局的影响。结果临床妊娠组有348例,未临床妊娠组有141例;临床妊娠组与未妊娠组一般情况如女方年龄、基础FSH、体重指数、内膜厚度、可利用胚胎率等均无统计学差异(P0.05);以是否临床妊娠作为因变量,精子来源和父方年龄作为自变量,进行回归分析,结果显示精子来源与临床妊娠无统计学相关性(P0.05),而父方年龄与临床妊娠相关(P0.05);不同父方年龄组的一般情况均无统计学差异(P0.05),而随着父方年龄的增长,种植率和临床妊娠率呈现显著下降的趋势(P0.05)。结论在ICSI周期中,随着父方年龄的增长,ICSI的临床妊娠率下降,而精子来源并不影响临床结局。     

腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin和可溶性血管内皮生长因子受体-1重组蛋白的构建和功能初步鉴定

目的 构建腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin(sEng)和可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)重组蛋白,观察其对内皮细胞管化及滋养细胞迁移的影响.方法 提取小鼠胎盘组织总RNA,通过RT-PCR获得sEng和sFlt-1 cDNA,插入到穿梭载体pAdTrack-CMV中,获得pATC-sEng和pATC-sFlt-1质粒,转化其至pAdeasy-1受体菌,选阳性克隆转染293A细胞,获得Ad/sEng和Ad/sFlt-1,制备高滴度病毒液.用病毒感染COS7细胞,检测sEng和sFlt-1蛋白表达,并通过成管和划痕实验观察两种蛋白对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)管化和BeWo细胞迁移的影响.结果 成功获得sEng和sFlt-1重组腺病毒,其滴度分别为2.2×1011pfu/ml和2.0×1011pfu/ml.感染COS7细胞后,sEng和sFlt-1蛋白均较高表达,并能抑制HUVEC管化及BeWo细胞迁移,两者有协同作用.结论 构建的腺病毒介导的小鼠sEng和sFlt-1重组蛋白对血管生成和滋养细胞迁移有明显抑制作用.     

短时受精周期中患者年龄与多原核合子发生及妊娠结局的关系

目的探讨短时受精周期中患者年龄与多原核合子发生及妊娠结局的关系。方法回顾性分析本中心2008年1月至2010年12月共3862例IVF短时受精治疗周期资料,按患者年龄分为<35岁,35-37岁,38-40岁,>40岁四组,分别比较四组患者的多原核合子发生率、妊娠率、种植率、早期胚胎丢失率。结果短时受精患者年龄高于37岁时,其产生多原核合子的周期比例显著降低(P<0.05)。随着患者年龄的增加,妊娠率、种植率均显著性降低(P<0.01),而早期胚胎丢失率显著性升高(P<0.01)。结论短时受精周期中,年龄37岁以上患者周期产生多原核合子概率低于37岁及以下患者,患者的年龄可以作为预测短时受精周期临床结局的指标。     

用实时荧光定量RT-PCR检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达

目的用单细胞实时荧光定量RT-PCR,检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达。方法采集小鼠卵母细胞和原核期胚胎,后者经体外培养至囊胚。采用实时荧光定量RT-PCR对多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中Tcl1基因的表达进行定量检测;用同样方法对小鼠种植前各发育阶段的胚胎进行Tcl1基因的表达检测。结果在多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中,均检测出Tcl1的表达;多个卵母细胞、2-细胞期胚胎中Tcl1的表达量显著高于单个卵母细胞、2-细胞期胚胎;此方法也适用于胚胎早期发育的各个时期,Tcl1在单个卵母细胞、原核期胚胎和2-细胞期胚胎中表达量最高,在4-细胞期胚胎、8-细胞期胚胎、桑葚胚和囊胚中表达量极低。结论应用单细胞实时荧光定量RT-PCR可对单个小鼠种植前胚胎中基因的表达进行定量检测。     

富硒乳酸菌对肝损伤小鼠红细胞脂质过氧化和免疫功能的影响

目的 :　探讨富硒乳酸菌制剂保护 CCl4诱发肝损伤小鼠红细胞脂质过氧化和免疫功能变化及作用机制。方法 :　选择 48只雌雄各半健康成年小鼠 ,随机分成对照组 (C组 ) ,CCl4组 ,CCl4-中剂量富硒乳酸菌制剂保护组 (CCl4- MSe组 ) ,CCl4-高剂量富硒乳酸菌制剂保护组 (CCl4-HSe组 ) ,通过腹腔注射 CCl4诱发肝损伤后 ,分别在第 1、2 w观察 RBC- CR1 花环率和 RBC- IC花环率及 GSH- Px、GST、SOD和 MDA的变化。结果 :　在注射 CCl4后 ,RBC- CR1 花环率均低于或显著低于对照组 ,但 CCl4- MSe、CCl4- HSe组均高于或显著高于 CCl4组 ;CCl4组 RBC- IC花环率显著升高 ,CCl4- MSe和 CCl4- HSe组未见明显上升 ,与对照组相近 ;CCl4组红细胞溶血液 GSH- Px活性与对照组差异不显著 ,但 CCl4- MSe、CCl4- HSe组均显著高于对照组和 CCl4组 ;各组间 GST活性除第 1 w CCl4- HSe组显著高于 CCl4组外无显著差异 ;SOD活性仅见第 2 w CCl4- MSe、CCl4- HSe组比 CCl4组明显升高 ;各处理组溶血液 MDA含量均明显高于对照组 ,但 CCl4- MSe和 CCl4- HSe组均低于或显著低于 CCl4组。结论 :　 CCl4诱发肝损伤小鼠红细胞脂质过氧化和免疫功能变化非常显著 ,富硒乳酸菌制剂能通过增强红细胞免疫功能和抗氧化酶活性发挥有效作用。