金属镍粉和氯化镍对叙利亚地鼠胚胎细胞转化的研究

国内外流行病学调查和实验室研究已经证明某些镍化合物在进入人体或细胞后具有潜在的致癌性。1980年对成都电冶厂341名镍冶炼工人职业危害调查时,发现工人的胸痛、咽痛、鼻干等症状和咽炎、鼻粘膜萎缩等体征均高于正常对照组并且两者间有显著性差异,且肺癌的死亡率亦较高。为此,我们用从该厂采集的金属镍粉和氯化镍对叙利亚地鼠胚胎细胞进行短期克隆转化试验,结果发现镍粉在促癌剂TPA的促进下出现了明显的形态转化克隆,转化率达6.78%。与强致癌剂MCA阳性对照组的转化率(7.23%)无显著性差异。这表明镍粉对细胞有直接的致癌作用。关于镍的致癌机理,目前还不清楚,可能与抑制RNA聚合酶有关.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子对人成骨细胞生长及增殖的影响

目的研究酸性成纤维细胞生长因子(acidfibroblastgrowthfactoraFGF)对成骨细胞生长及增殖的影响。方法取人胚胎颅盖骨骨内膜,利用组织块培养法进行成骨细胞原代培养,DMEM-F12培养液传代、扩增培养,以细胞形态学、细胞形成钙结节的能力及碱性磷酸酶活性鉴定成骨细胞。应用光镜、电镜、MTT法及流式细胞仪检测,分别从细胞形态、细胞生长及增殖特性分析不同浓度的aFGF对人成骨细胞生长和增殖的影响。结果10～100ng/mlaFGF可明显促进成骨细胞生长、增殖使S期细胞数增加,但高浓度aFGF(>1μg/ml)对成骨细胞生长具有抑制作用。结论aFGF对体外培养的人成骨细胞具有促生长和增殖作用,其有效浓度为10～100ng/ml。     

非小细胞肺癌组织中内皮抑素mRNA的转录表达及临床意义

背景与目的肿瘤生长和转移依赖于肿瘤血管形成,抑制其血管形成能够控制其生长和转移.胶原ⅩⅧ/内皮抑素(collagen ⅩⅧ/endostatin)是迄今为止最有效的内源性血管生长抑制剂之一.本研究拟探讨内皮抑素mRNA在非小细胞肺癌组织中的转录表达及其与肺癌临床病理生理特征的关系.方法用RT-PCR法检测46例非小细胞肺癌组织和14例肺良性病变组织中内皮抑素mRNA的转录表达.结果①肺癌组织中内皮抑素mRNA转录表达水平(0.872±0.071)显著高于癌旁肺组织(0.717±0.073)和肺良性病变肺组织(0.611±0.026)(P＜0.001),癌旁肺组织亦显著高于肺良性病变肺组织(P＜0.01).②肺癌组织中内皮抑素mRNA转录表达水平与肺癌原发肿瘤大小、有无远处转移、细胞分化程度和P TNM分期等均有密切关系,而与肺癌原发部位、淋巴结转移状态、组织学类型,患者性别、年龄和吸烟与否等均无明显关系.结论肺癌患者肺癌组织中存在内皮抑素mRNA转录表达水平的升高,这种升高与肺癌的发生、发展、远处转移和细胞分化不良有密切关系,因而有助于预测肺癌的恶性行为.     

温热联合化疗对人颊癌细胞的体外效应

目的：观察 办同化疗对体外培养的人颊鳞癌ＢＣａＣＤ８８５细胞的杀伤作用。方法：采用ＭＴＴ法研究了ＢＣａＣＤ８８５细胞对４３℃温热、几种临床常化疗药单独应用及联合４３℃ 民化疗药时的敏感性。结果：实验表明ＢＣａＣＤ８８５细胞对热不敏感,４３℃作用４０分钟时的细胞死亡率仅７．６％艇药时,细胞对ＡＤＭ最敏感,其次为ＤＤＰ、ＶＰ－１６、ＶＣＲ,再次为ＭＭＣ、ＢＬＭ,对５－Ｆｕ,ＭＴＸ不敏感,４３℃温热能显     

应用哺乳动物细胞体外转化检测致癌物和促癌物方法的研究

本文系统地研究了用哺乳动物细胞作体外短期转化试验检测致癌物和促癌物,并对几种实验条件和方法作了比较。结果表明SHE细胞和NIH/3T3细胞均为较理想的靶细胞;丝裂霉素C处理或~(60)Co照射的NIH/3T3 细胞分别作饲养层均可获得理想的检测效果。     

中药复方三生注射液对体外人肺腺癌细胞和肝癌细胞抗癌作用的研究

复方三生注射液由生附片、生川乌、生南星等六味中药经提取制成的灭菌注射剂。经临床试验对中晚期肺癌有明显疗效。本文用体外培养人肺腺癌细胞和肝癌细胞的方法进行研究,结果表明复方三生注射液对癌细胞有直接杀伤作用和抑制癌细胞核分裂的作用。     

检测CK19 mRNA和MUC1 mRNA诊断非小细胞肺癌淋巴结微转移

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结微转移的基因诊断方法，并分析CK19mRNA、MUC1mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法应用巢式逆转录聚合酶链反应(nestedRT-PCR)，对31例NSCLC的119枚淋巴结中的粘蛋白1(MUC1)mRNA、角蛋白19(CK19)mRNA表达情况进行检测；对照组为10例肺良性病变患者的35枚淋巴结。结果 31例NSCLC患者的119枚淋巴结中，66枚(55.5％)淋巴结存在CK19mRNA阳性表达，65枚(54.5％)存在MUC1mRNA阳性表达；肺良性病变患者35枚淋巴结中CK19mRNA和MUC1mRNA表达均为阴性，与肺癌组比较均有显著性差异。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PcR法检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标志物，两者联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移。     

低氧、无血清培养对人骨髓间充质干细胞增殖、凋亡的影响

目的观察人骨髓间充质干细胞（hBM—MSCs）对低氧环境的适应能力,为其临床应用提供依据。方法体外培养hBM—MSCs,根据培养条件分为四组,常氧正常血清组培养条件为20％O2及10％FBS／HD、常氧无血清组为20％O2及0％FBS／HD,低氧正常血清组为1．5％O2及10％FBS／HD,低氧无血清组为1．5％O2及0％FBS／HD,细胞培养6、12、24、48、72、96h后采用MTT法检测四组增殖状况;流式细胞术检测四组凋亡情况。结果在10％FBS培养下,48h时低氧可显著促进细胞增殖;在整个观察时间内,低氧培养不会促进hBM—MSCs凋亡;同时元血清培养时细胞增殖受抑。结论在正常的血清培养条件下,hBM—MSCs对低氧有较好的耐受性,但是无血清培养不利于hBM—MSCs增殖,hBM-MSCs可作为缺氧相关组织修复的种子细胞。     

转录靶向性KDR启动子调控双自杀基因系统对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用

背景与目的 研究KDR启动子转录调控双自杀基因系统(CDglyTK)对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用.方法 应用分子生物学技术克隆KDR基因的启动子KDRP,构建KDR启动子调控的双自杀基因(CDglyTK)真核表达质粒pcDNA3-KDRp-CdglyTK.并将其导AL9981和人肝癌细胞HepG2中.给予不同的前药(GCV和/或5-FC)处理后,应用MTT法检测各组细胞的存活率.并应用流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期和凋亡.结果 成功的克隆KDR启动子和构建pcDNA3-KDRp-CdglyTK质粒.pcDNA3-KDRp-CdglyTK转染后,L9981细胞中均可检测到CD和TK mRNA,而HepG2细胞中则无.联合应用5-FC+GCV处理对转双自杀基因细胞(L9981)的杀伤作用显著高于单独应用5-FC或GCV(P<0.05),且二者显示了良好的药物协同作用.结论 KDR基因启动子调控双自杀基因系统可以靶向性杀伤人肺癌细胞.     

腺病毒介导RNA干扰抑制核心结合因子α1表达阻断软骨细胞的肥大分化

背景:软骨细胞肥大分化是软骨内骨化启动的标志,也是软骨内骨化必不可少的步骤,它是一种级联反应,一旦启动就很难阻断,最终结果是形成骨骼结构。RNA干扰技术是一种转录后水平的基因沉默,相关研究显示采用RNA干扰技术阻断核心结合因子α1表达能够有效地抑制异位骨化形成。目的:利用RNA干扰技术抑制核心结合因子α1表达,从而阻断大鼠软骨细胞肥大分化。方法:构建沉默SD大鼠核心结合因子基因的腺病毒Ad-Cbfa1-si RNA。利用维甲酸及白细胞介素1α促进软骨细胞肥大分化,观察Ad-Cbfa1-si RNA对核心结合因子α1表达的抑制作用。利用核心结合因子α1免疫组化方法比较各组核心结合因子α1的表达从而分析软骨细胞的肥大分化情况。结果与结论:经维甲酸和白细胞介素1α诱导后,阴性对照病毒组软骨细胞出现肥大分化,核心结合因子α1的表达呈阳性反应;Ad-Cbfa1-si RNA组软骨细胞中未见核心结合因子α1明显表达。提示利用RNA干扰技术能够明显抑制核心结合因子α1的表达,从而阻断软骨细胞的肥大分化。